SJRH30細(xi)胞

公司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

壹、商品介(jie)紹：

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生長至覆(fu)蓋培養(yang)瓶的 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化(hua)，再輕輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱(dian)細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比例進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞培養(yang)箱中培養(yang)；

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞生長至覆(fu)蓋培養(yang)瓶的 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕吹打(da)細(xi)胞使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮中進行(xing)長期(qi)保存(cun)。使用(yong)程(cheng)序(xu)降溫(wen)盒(he)可(ke)直接(jie)放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以下細(xi)胞培養(yang)凍(dong)存處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考，具體(ti)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨(sui)貨產(chan)品說明書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中培養(yang)過夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜(ye)）。第二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳代(dai)：如果細(xi)胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代培養(yang)。

a、棄去培養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中，使(shi)消化(hua)液(ye)浸潤(run)所有細(xi)胞，將(jiang)培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況而定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消化(hua)情況，若細(xi)胞大部分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落，迅速拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕打(da)勻後裝入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基的(de)新皿(min)中或者瓶中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞生長狀(zhuang)態(tai)良好時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清細(xi)胞凍(dong)存液(ye)，使細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻，每支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞懸液(ye)，註意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮灌儲存。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以便下(xia)次(ci)拿(na)取。

三、培養(yang)註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是否完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否有漏液(ye)、渾濁等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說明書，了(le)解細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培養(yang)基、血(xue)清比(bi)例、所需 細(xi)胞因子等，確(que)保細(xi)胞培養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若由(you)於(yu)培養(yang)條件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導(dao)致細(xi)胞出現(xian)問題，責(ze)任(ren)由(you) 客戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞瓶表(biao)面，顯微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題，部分(fen)細(xi)胞由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈碰亡(wang)破碎形(xing)成碎片(pian)，是正(zheng)常現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可以消化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞直接(jie)混勻收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培養(yang)基重懸 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新的(de)培養(yang)瓶或培養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中進行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件的(de)培養(yang)基用(yong)於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建議客戶收到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾張(zhang)細(xi)胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和(he)我司(si)技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的原因，個(ge)別敏(min)感(gan)細(xi)胞會出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的情況，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告知細(xi)胞 的具(ju)體(ti)情況，以便我(wo)們(men)的技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至問(wen)題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅供(gong)科(ke)研使用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養(yang)基 (灌液(ye)培養(yang)基) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書細(xi)胞培 養(yang)條件新(xin)配(pei)制(zhi)的培養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞。     收到(dao)細(xi)胞後第壹次(ci)傳代建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代就是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

MouseUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit小鼠(shu)高敏(min)甲狀(zhuang)腺(xian)素(u-T4)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

人G Fc段受體(ti)Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)免疫(yi)試劑(ji)盒(he) Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit

石(shi)蠟(la)切片(pian)組織BCL2蛋(dan)白(bai)表達NBT顯色光(guang)學(xue)顯微鏡檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)10/20次

HumanProstaglandinDsyhase,PTGDSELISA試劑(ji)盒(he)人(ren)前(qian)列(lie)腺(xian)素D合成(cheng)酶(PTGDS)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

Humahymicsomallymphopoietin,TSLPELISAKit人胸腺(xian)基質淋巴細(xi)胞生成(cheng)素(TSLP)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

小鼠(shu)心(xin)肌(ji)肌(ji)球(qiu)蛋(dan)白(bai)重鏈(lian)(MHC)自身(shen)抗(kang)體(ti)免疫(yi)試劑(ji)盒(he) Mouse cardiac myosin heavy chain(MHC)aoaibody ELISA kit

弧菌(jun)(O139)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)(PCR-熒光(guang)探針法(fa)) 48T

Humansalivaryductaoaibody,SDAELISA試劑(ji)盒(he)人(ren)抗(kang)唾(tuo)液(ye)腺導(dao)管組織抗體(ti)(SDA)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

ELISAKitANG-R-Tie1小鼠(shu)血(xue)管生(sheng)成素受(shou)體(ti)Tie1規格(ge)：48T/96T

HumanCathepsinAibodies,CathAbELISAKit人組織抗體(ti)(CathAb)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

大鼠血(xue)小板(ban)反(fan)應蛋(dan)白(bai)(THBS1)ELISA試劑(ji)盒(he) ，英(ying)文名(ming)： THBS1 ELISA Kit

Mouse coisol (Coisol) ELISA Kit 小鼠(shu)(Coisol)ELISA試劑(ji)盒(he)

MouseUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 小鼠(shu)型纖溶酶原(yuan)激活物(wu)受(shou)體(ti)(PLAUR/uPAR)ELISA試劑(ji)盒(he) 96T/48T 進口(kou)分(fen)裝

CLIAKitforHumanchemerinELISAKit人chemerin規格(ge)：48T/96T

細(xi)胞CHK2激酶活(huo)性定量檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(A/B/C)20次

腫瘤(liu)壞(huai)死(si)因子受體(ti)相(xiang)互作用(yong)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

冠(guan)狀(zhuang)病(bing)毒表面(mian)S蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

肉毒堿(jian)O-乙酰(xian)基轉(zhuan)移酶

MSL1蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

線粒體(ti)二(er)羧酸(suan)載體(ti)蛋(dan)白(bai)11抗體(ti)

白細(xi)胞介(jie)素(su)1受體(ti)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

磷(lin)酸(suan)化(hua)p53結合蛋(dan)白(bai)1抗體(ti)

SJRH30細(xi)胞CD8β鏈(lian)（CD8-β）抗體(ti)

血(xue)小板(ban)源(yuan)性生(sheng)長因子D/脊(ji)髓源(yuan)性生(sheng)長因子B抗體(ti)