SK-N-AS細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科研研究使用、不得(de)用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷！

壹、商品(pin)介紹：

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止消(xiao)化，再(zai)輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重懸，然(ran)後按(an) 1:2 比例進(jin)行(xing)分瓶傳(chuan)代，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培養(yang)箱中培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入培養(yang)液(ye)終

止消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍存管中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮中(zhong)進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序(xu)降溫(wen)盒(he)可直接放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操作

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培養(yang)凍存處理僅(jin)供(gong)參考，具(ju)體(ti)操作步驟以隨貨(huo)產(chan)品(pin)說明書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存管在 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速搖晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基混合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心3 min，棄去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入含(han)適量(liang)培養(yang)基的培養(yang)瓶中培養(yang)過(guo)夜（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中，加(jia)入約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜）。第二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶置於(yu)37℃培養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然後(hou)在顯(xian)微鏡(jing)下觀察細(xi)胞(bao)消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分變圓並(bing)脫落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作臺(tai)，輕敲幾(ji)下培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基終止消(xiao)化。輕輕打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比例分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養(yang)基的新(xin)皿(min)中或者瓶中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀態(tai)良好(hao)時，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌離心管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心4 min，棄去(qu)上清液(ye)，用PBS清(qing)洗壹遍，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意(yi)凍存管做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管位置以便下次(ci)拿取。

三、培養(yang)註意(yi)事項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否(fou)有漏液(ye)、渾濁(zhuo)等現象，若(ruo)有上述現(xian)象 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說明書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關(guan)信息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因子(zi)等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由於培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題(ti)，責任由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下觀察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由於(yu)溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎形成碎片，是正(zheng)常現(xian)象。觀察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可以消化，懸浮細(xi)胞(bao)直接混勻收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基重懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到新(xin)的(de)培養(yang)瓶或培養(yang)皿(min)中，置於培養(yang)箱中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培養(yang)基用於(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建議客戶(hu)收(shou)到細(xi)胞(bao)後前 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和(he)我司技術(shu)部溝通(tong) 交流(liu)。由於(yu)運輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏感細(xi)胞(bao)會出(chu)現不穩(wen)定的情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系(xi)，告知細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們(men)的技術(shu)人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科研使用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的(de)培養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用按(an)照說明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第(di)壹次(ci)傳代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。

公司(si)正(zheng)在出(chu)售的(de)產(chan)品(pin)：

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Human alpha 2 aiplasmin (alpha 2-AP) ELISA Kit 人α2抗纖(xian)溶(rong)酶(mei)(α2-AP)ELISA試劑(ji)盒(he)

大鼠(shu)叉頭(tou)框(kuang)蛋白O1(FOXO1)ELISA試劑(ji)盒(he) ，英文名(ming)： FOXO1 ELISA Kit

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISAKit 大鼠(shu)主(zhu)要(yao)組(zu)織(zhi)相(xiang)容(rong)性(xing)復合(he)體(ti)Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑(ji)盒(he) 96T/48T 進(jin)口(kou)分裝(zhuang)

CLIAKitforcPLA2(HumancytosolicphospholipaseA2)ELISAKit人胞(bao)漿型(xing)0脂酶(mei)A2規格：48T/96T

細(xi)胞(bao)樣(yang)品(pin)氧化酶表達(da)免疫組(zu)織(zhi)化學(xue)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)10/20次(ci)

人脾(pi)臟酪(lao)酸(suan)激酶(mei)(Syk)ELISA 試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he) 組(zu)裝/原裝(zhuang)

小鼠(shu)纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)激(ji)活(huo)物(wu)抑制(zhi)因子(zi)1(PAI-1)免疫試(shi)劑(ji)盒(he) Mouse plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit

侵襲性大腸桿菌(EIEC)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)(PCR-熒光探針法) 48T

Humansecondarylymphoid-tissuechemokine,SLCELISA試劑(ji)盒(he)人(ren)二(er)級淋巴(ba)組(zu)織(zhi)趨(qu)化因子(zi)(SLC/CCL21)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

ELISAKitVEGFR-3小鼠(shu)血(xue)管內皮(pi)細(xi)胞(bao)生長因子(zi)受(shou)體(ti)-3規格：48T/96T

ELISAKitDes人結(jie)蛋白規格：48T/96T

大鼠(shu)血(xue)栓調節(jie)蛋(dan)白(TM)ELISA 試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he) 組(zu)裝/原裝(zhuang)

人纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)(Plg)免疫試(shi)劑(ji)盒(he) Human Plg ELISA Kit

總(zong)抗氧化能力(T-AOC)測(ce)試(shi)盒(he) 可見(jian)分光光度法 50管/48樣(yang)

RatNervegrowthfactor,NGFELISA試劑(ji)盒(he)大鼠(shu)神經生長因子(zi)(NGF)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

腫(zhong)瘤抗原CML66抗體(ti)

8/半(ban)抑制(zhi)劑(ji)8抗體(ti)

乳酸(suan)菌S-層蛋白抗體(ti)

MTO1蛋白(bai)抗體(ti)

線粒(li)體(ti)復合(he)物(wu)NDUFS4蛋白(bai)抗體(ti)

白細(xi)胞(bao)介素(su)28A抗體(ti)

磷酸(suan)化Ras GTP酶活(huo)化蛋白結(jie)合(he)蛋(dan)白1抗體(ti)

SK-N-AS細(xi)胞(bao)CD98輕鏈(lian)抗體(ti)

血(xue)型(xing)糖(tang)蛋白δ抗體(ti)

Human alpha 2 aiplasmin (alpha 2-AP) ELISA Kit 人α2抗纖(xian)溶(rong)酶(mei)(α2-AP)ELISA試劑(ji)盒(he)

大鼠(shu)叉頭(tou)框(kuang)蛋白O1(FOXO1)ELISA試劑(ji)盒(he)，英文名(ming)： FOXO1 ELISA Kit

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISAKit 大鼠(shu)主(zhu)要(yao)組(zu)織(zhi)相(xiang)容(rong)性(xing)復合(he)體(ti)Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑(ji)盒(he) 96T/48T 進(jin)口(kou)分裝(zhuang)

CLIAKitforcPLA2(HumancytosolicphospholipaseA2)ELISAKit人胞(bao)漿型(xing)0脂酶(mei)A2規格：48T/96T

細(xi)胞(bao)樣(yang)品(pin)氧化酶表達(da)免疫組(zu)織(zhi)化學(xue)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)10/20次(ci)

人脾(pi)臟酪(lao)酸(suan)激酶(mei)(Syk)ELISA 試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he)組(zu)裝/原裝(zhuang)

小鼠(shu)纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)激(ji)活(huo)物(wu)抑制(zhi)因子(zi)1(PAI-1)免疫試(shi)劑(ji)盒(he) Mouse plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit

侵襲性大腸桿菌(EIEC)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)(PCR-熒光探針法) 48T

Humansecondarylymphoid-tissuechemokine,SLCELISA試劑(ji)盒(he)人(ren)二(er)級淋巴(ba)組(zu)織(zhi)趨(qu)化因子(zi)(SLC/CCL21)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

ELISAKitVEGFR-3小鼠(shu)血(xue)管內皮(pi)細(xi)胞(bao)生長因子(zi)受(shou)體(ti)-3規格：48T/96T

ELISAKitDes人結(jie)蛋白規格：48T/96T

大鼠(shu)血(xue)栓調節(jie)蛋(dan)白(TM)ELISA 試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he)組(zu)裝/原裝(zhuang)

人纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)(Plg)免疫試(shi)劑(ji)盒(he) Human Plg ELISA Kit

總(zong)抗氧化能力(T-AOC)測(ce)試(shi)盒(he)可見(jian)分光光度法 50管/48樣(yang)

RatNervegrowthfactor,NGFELISA試劑(ji)盒(he)大鼠(shu)神經生長因子(zi)(NGF)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

腫(zhong)瘤抗原CML66抗體(ti)

8/半(ban)抑制(zhi)劑(ji)8抗體(ti)

乳酸(suan)菌S-層蛋白抗體(ti)

MTO1蛋白(bai)抗體(ti)

線粒(li)體(ti)復合(he)物(wu)NDUFS4蛋白(bai)抗體(ti)

白細(xi)胞(bao)介素(su)28A抗體(ti)

磷酸(suan)化Ras GTP酶活(huo)化蛋白結(jie)合(he)蛋(dan)白1抗體(ti)

SK-N-AS細(xi)胞(bao)CD98輕鏈(lian)抗體(ti)

血(xue)型(xing)糖(tang)蛋白δ抗體(ti)