化橘(ju)紅探針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)說(shuo)明書

儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集、處(chu)理及保存(cun)方法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使用不(bu)含(han)熱原和內毒(du)素(su)的試管，操作(zuo)過(guo)程中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何細胞刺(ci)激(ji)，收集(ji)血(xue)液(ye)後，3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘將(jiang)血(xue)清(qing)和紅細胞迅(xun)速小心(xin)地(di)分離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)30 分鐘取(qu)上(shang)清。
3. 細胞上(shang)清液(ye)：3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘去除(chu)顆(ke)粒和聚合物(wu)。
4. 組(zu)織勻(yun)漿：將(jiang)組(zu)織加(jia)入適(shi)量生(sheng)理鹽水搗碎(sui)。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘取(qu)上(shang)清。
5. 保存(cun)：如(ru)果樣(yang)本(ben)收(shou)集後不(bu)及(ji)時(shi)檢測，請按(an)壹次用(yong)量(liang)分裝，凍存(cun)於-20℃，避(bi)免(mian)反復凍融，在室(shi)溫(wen)下(xia)解(jie)凍(dong)並確(que)保樣品(pin)均(jun)勻地充分解(jie)凍(dong)。

特點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用戶只(zhi)需(xu)要(yao)提(ti)供(gong)病毒樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據地黃保守(shou)序列(lie)設(she)計的專(zhuan)壹性引(yin)物(wu)，與(yu)相(xiang)關病(bing)毒(du)無(wu)交叉(cha)反應(ying)。
3. 靈敏度(du)可(ke)以達到幾百(bai)拷貝(bei)/反應(ying)。
4. 壹管式熒光(guang)定(ding)量 PCR 檢測，避免(mian)後續汙染(ran)。
5. 本(ben)試劑盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體(ti)系(xi)的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用於(yu)科(ke)研(yan)，不(bu)能用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。

使用方法(fa)：
壹、樣品(pin)采(cai)集：
1、食(shi)品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采集與預培(pei)養按照樣品(pin)的(de)采集與預培(pei)養按照《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微(wei)生(sheng)物(wu)學(xue)檢驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸桿菌(jun)檢驗(yan)要求(qiu)進行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品(pin)：用(yong)無(wu)菌(jun)註射(she)器抽(chou)取(qu)受檢者靜脈(mai)血(xue)2mL，註入無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管，立(li)即(ji)混(hun)勻。
3、糞便樣(yang)品(pin)：取(qu)糞便置(zhi)於(yu)滅菌(jun)的收集管中(zhong)送檢。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位(wei)樣(yang)品(pin)：取(qu)發病部位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘(zhan)液(ye)膿(nong)血(xue)送檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀釋(shi)度(du)為(wei)例(li)）
1. 註意(yi)：由於標準品(pin)濃(nong)度(du)非(fei)常高(gao)，因此(ci)下(xia)列稀釋(shi)操作(zuo)壹定(ding)要在(zai)獨立的(de)區(qu)域(yu)進行(xing)，千(qian)萬(wan)不(bu)能汙染(ran)樣品(pin)或(huo)本試劑盒(he)的其(qi)他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增加產(chan)品(pin)穩(wen)定(ding)性和避(bi)免(mian)擴散傳(chuan)染性(xing)病原，本產(chan)品(pin)不(bu)提(ti)供(gong)活(huo)體(ti)樣(yang)品(pin)做(zuo)陽(yang)性對(dui)照，只(zhi)提(ti)供(gong)可以直(zhi)接(jie)使用的(de) DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽(yang)性對(dui)照。
2. 標記 6 個離(li)心(xin)管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分別加入 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀釋(shi)液(ye)（用(yong)帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待用(yong)。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在 6 號(hao)管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(上(shang)步(bu)稀釋(shi)所(suo)得)，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待用(yong)。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在 5 號(hao)管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照到 5 號(hao)管中(zhong)，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待用(yong)。
7. 重(zhong)復上(shang)面的(de)操作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀釋(shi)度(du)的(de)陽(yang)性對(dui)照。放冰(bing)上(shang)待用(yong)。
註：上(shang)述樣(yang)品(pin)建(jian)議(yi)經過增菌(jun)後，收集(ji)培(pei)養物用(yong)於檢測。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采(cai)用(yong)PCR試劑盒(he)配備(bei)的(de)DNA抽(chou)提(ti)液(ye)，按(an)以(yi)下說(shuo)明進(jin)行(xing)DNA核(he)酸的(de)粗提(ti)。也(ye)可采購(gou)上(shang)海澤(ze)葉生(sheng)物(wu)科(ke)技(ji)有(you)限(xian)公(gong)司(si)生(sheng)產(chan)的(de)DNA提(ti)取(qu)試劑盒(he)(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒(ying)光(guang)配套(tao))或(huo)其(qi)他(ta)合適(shi)的商(shang)業化產(chan)品(pin)，並按(an)照相(xiang)應(ying)試劑盒(he)說(shuo)明進(jin)行(xing)操作(zuo)。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養物：取(qu)液(ye)體(ti)培(pei)養物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量吸(xi)棄(qi)上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
2、固體(ti)培(pei)養物：挑(tiao)取單(dan)克隆(long)菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞便樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取米粒大小糞便於(yu)滅菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，加(jia)入0.5mL生(sheng)理鹽水，振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻，13000rpm離(li)心(xin)3分鐘，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體(ti)標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
註：陽(yang)性對(dui)照和陰(yin)性(xing)對照為已(yi)經抽(chou)提(ti)好的(de)核(he)酸(無(wu)需(xu)提(ti)取(qu))，直(zhi)接(jie)取5μL加(jia)入到(dao)反應(ying)體(ti)系(xi)中(zhong)即(ji)可(ke)。由(you)於陽(yang)性對(dui)照濃度(du)較高(gao)，建(jian)議(yi)在樣品(pin)制(zhi)備區(qu)域(yu)加入陽(yang)性對(dui)照。 
KC-5103  Tifluadom/KC-5103  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98.5%,BR,可(ke)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養 小(xiao)鼠(shu)堿(jian)性(xing)成(cheng)纖維(wei)細胞生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)6(bFGF-6)ELISA檢測試劑盒(he)Mousebasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISAKit 96T/48T

/  Valacyclovir HCl  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%,BR 人(ren)高(gao)半(Hcy)試劑盒(he) Human Homocysteine,HCY ELISA Kit

/（標準品(pin)）  Valacyclovir HCl  質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準品(pin) Rathemeoxygenase1,HO-1ELISAKit大鼠(shu)血(xue)紅素氧(yang)合酶(mei)1(HO-1)ELISA試劑盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

維(wei)庫(ku)銨(an)  Vecuronium Bromide  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%,BR BJ5183鈣(gai)轉(zhuan)感(gan)受(shou)態細菌(jun)5X100微(wei)升

維(wei)庫(ku)銨(an)（標準品(pin)）  Vecuronium Bromide  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%,標準品(pin) MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒(he)小鼠(shu)白(bai)介素(su)1受(shou)體(ti)拮(jie)抗(kang)劑(IL1Ra)ELISA試劑盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

硫(liu)酸長(chang)春地辛  Vindesine sulfate  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>95%,BR 小(xiao)鼠(shu)生(sheng)長(chang)分化(hua)因(yin)子(zi)15(GDF-15)ELISA試劑盒(he) ，英文(wen)名(ming)： GDF-15 ELISA Kit

紮(zha)西(xi)他(ta)濱,2',3'-二(er)脫(tuo)氧(yang)胞苷(gan)  Zalcitabine,DDC  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98%,BR 雞N-乙酰-β-D-氨基(ji)葡(pu)萄糖苷(gan)酶(mei)(NAG)ELISA檢測試劑盒(he)ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 96T/48T

玉(yu)米(mi)素(su)核苷(gan)   Trans-Zeatin Riboside   質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98%,反式,BR 人(ren)5羥(qiang)色(se)胺/血(xue)清(qing)素(su)/血(xue)清(qing)胺(an)(5HT/ST)抗(kang)體(ti)(IgM)試劑盒(he) Human 5-hydroxyyptamine/serotonin(5HT/ST)aibody(IgM)ELISA kit

齊(qi)留通(tong)  Zileuton  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%,BR 英文(wen)名(ming)稱(cheng)MouseIL-10ELISAKIT小(xiao)鼠(shu)白(bai)介素(su)10(IL-10)ELISAKIT規(gui)格(ge)：96T/48T

齊(qi)留通(tong)（標準品(pin)）  Zileuton  質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準品(pin) 冰(bing)凍(dong)切片組(zu)織CDK2蛋白表達熒(ying)光(guang)顯微鏡(jing)檢測試劑盒(he)10/20
Colelomycerone A  中(zhong)文(wen)名(ming)：  分子(zi)式：C17H18O6    豬(zhu)血(xue)栓(shuan)調(tiao)節蛋白elisa試劑盒(he)   豬(zhu)血(xue)栓(shuan)調(tiao)節蛋白試劑盒(he)   規(gui)格(ge)型(xing)號：96T/48T 

Clotrimazole  中(zhong)文(wen)名(ming)：  分子(zi)式：C22H17ClN2    豬(zhu)性血(xue)友病(bing)因(yin)子(zi)elisa試劑盒(he)   豬(zhu)性血(xue)友病(bing)因(yin)子(zi)試劑盒(he)   規(gui)格(ge)型(xing)號：96T/48T  

Clorofene  中(zhong)文(wen)名(ming)：4-氯-2-芐(bian)基(ji)  分子(zi)式：C13H11ClO    豬(zhu)細胞粘(zhan)附(fu)分子(zi)-1elisa試劑盒(he)   豬(zhu)細胞粘(zhan)附(fu)分子(zi)-1試劑盒(he)   規(gui)格(ge)型(xing)號：96T/48T 

Clopidogrel bisulfate  中(zhong)文(wen)名(ming)：硫(liu)酸氫(qing)  分子(zi)式：C16H18ClNO6S2    豬(zhu)血(xue)小(xiao)板(ban)衍(yan)生(sheng)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)(PDGF)ELISA試劑盒(he)  

Clevidipine butyrate  中(zhong)文(wen)名(ming)：丁(ding)酸氯維(wei)地平(ping)  分子(zi)式：C21H23Cl2NO6    豬(zhu)血(xue)小(xiao)板(ban)活(huo)化(hua)因子(zi)(PAF)ELISA試劑盒(he)
  Nateglinide  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%,BR,可(ke)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養  大鼠(shu)糖原0酸化(hua)酶(mei)(GP)試劑盒(he) Rat glycogen phosphorylase,GP ELISA Kit

  Nateglinide  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%,BR,可(ke)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養 大鼠(shu)糖原0酸化(hua)酶(mei)同(tong)工酶(mei)BB(GP-BB)ELISA檢測試劑盒(he)RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T

丁(ding)東(dong)莨(liang)菪(dang)堿    "(-)scopolamine N-butyl bromide "  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98%,BR 大鼠(shu)糖原0酸化(hua)酶(mei)同(tong)工酶(mei)BB(GP-BB)試劑盒(he) Rat Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit

單(dan)寧(ning)酸,鞣(rou)酸,丹(dan)寧(ning)酸  Tannic acid  質(zhi)量規(gui)格(ge)：AR,98% 大鼠(shu)糖原0酸化(hua)酶(mei)同(tong)工酶(mei)II(GP-II)ELISA檢測試劑盒(he)RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T

馬(ma)拉韋若(ruo)  Maraviroc  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99% 大鼠(shu)糖原0酸化(hua)酶(mei)同(tong)工酶(mei)MM(GP-MM)ELISA檢測試劑盒(he)RatGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T

群勃(bo)龍(long)醋(cu)酸酯(zhi)   Revalor-H Trenbolone acetate  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98%,BR,可(ke)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養 大鼠(shu)糖原0酸化(hua)酶(mei)同(tong)工酶(mei)MM(GP-MM)試劑盒(he) Rat Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit

(標準品(pin))  Silibinin  質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC>97%，標準品(pin) 大鼠(shu)糖原合成(cheng)酶(mei)激(ji)酶(mei)(GSK)ELISA檢測試劑盒(he)Ratglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 96T/48T

  Silibinin  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>97%,BR 大鼠(shu)糖原合成(cheng)酶(mei)激(ji)酶(mei)(GSK)試劑盒(he) Rat glycogen syhase kinase,GSK ELISA Kit

依(yi)澤(ze)替米貝(bei);依(yi)折(zhe)麥布  Ezetimibe  質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99% 大鼠(shu)糖原合成(cheng)酶(mei)激(ji)酶(mei)3α(GSK3A)試劑盒(he) Rat glycogen syhase kinase 3 alpha,GSK3A ELISA kit

依(yi)澤(ze)替米貝(bei);依(yi)折(zhe)麥布(標準品(pin))  Ezetimibe  質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC>99%,標準品(pin) 大鼠(shu)糖原合成(cheng)酶(mei)試劑盒(he) Rat glycogen syhetase ELISA Kit
化(hua)橘(ju)紅探針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)說(shuo)明書N-亞硝基(ji)哌(pai)啶，10 ng/ul於(yu)甲(jia)醇 標準品(pin) Penconazole  10ng/ul於(yu)甲(jia)醇，10ML 特征(zheng)形態 液(ye)態(tai)

N-亞硝基(ji)嗎(ma)啉(lin) 10ng/ul 標準品(pin) Nonadecanoicacidmethylester  10ng/ul於(yu)甲(jia)醇,10ML 特征(zheng)形態 液(ye)態(tai)

N-亞硝基(ji)-雙(shuang)-異(yi)-丙(bing)基(ji)胺(an)，10ng/ul於(yu)甲(jia)醇 標準 N-Nitroso-di-iso-propylamine  10ng/ul於(yu)甲(jia)醇,10ML 特征(zheng)形態 液(ye)態(tai)
實驗(yan)流(liu)程：
1. 整(zheng)個檢測過程應(ying)嚴格(ge)按(an)照本說(shuo)明書要求(qiu)分別在試劑準備區(qu)、樣(yang)本處(chu)理區(qu)和PCR擴(kuo)增區(qu)進(jin)行(xing)操作(zuo)，各區(qu)實驗(yan)服(fu)、儀(yi)器 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨立使用，不(bu)能混(hun)用；實驗(yan)用吸(xi)頭(tou)采用帶(dai)濾芯(xin)吸頭(tou)；樣本處(chu)理區(qu)應(ying)配有(you)生(sheng)物(wu)安全(quan)櫃，樣(yang)本(ben)處(chu)理在生(sheng)物(wu)安全(quan)櫃中(zhong)進(jin)行(xing)操作(zuo)；三個區(qu)應(ying)該配(pei)有(you)紫外(wai)線(xian)殺菌(jun)裝置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解(jie)，樣(yang)本(ben)處(chu)理過程應(ying)在0-4℃條(tiao)件下(xia)操作(zuo)，且完成(cheng)實驗(yan)後立即(ji)上(shang)機檢測；樣本(ben)處(chu)理過程中(zhong)使用的(de)器具耗(hao)材(cai)應(ying)經過(guo)無(wu)核酶(mei)處(chu)理。

3. 每(mei)次(ci)實驗(yan)應(ying)該設(she)置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性對(dui)照。
4. 試劑盒(he)所有(you)試劑在(zai)使用前(qian)應(ying)該在(zai)常溫下充分融(rong)化(hua)混(hun)勻，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離(li)心(xin)。
5. 試劑盒(he)內所(suo)配(pei)陰性和陽(yang)性對(dui)照在壹次使用前(qian)應(ying)全部(bu)轉移至(zhi)標本準備區(qu)，並單(dan)獨存(cun)放。
6. 為(wei)防(fang)止熒(ying)光(guang)幹擾，應(ying)避免(mian)裸手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸PCR反應(ying)管，並應(ying)避免(mian)在PCR反應(ying)管上(shang)進行(xing)任(ren)何標記。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增相(xiang)關參(can)數(shu)應(ying)按照本說(shuo)明書相(xiang)關要(yao)求(qiu)進行(xing)設(she)置(zhi)；不(bu)同(tong)批號(hao)試劑不(bu)能混(hun)用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR儀(yi)參數(shu)設(she)置(zhi)中(zhong)不(bu)選ROX校正，淬(cui)滅基(ji)因(yin)選擇None。
9. 實驗(yan)過程中(zhong)產(chan)品(pin)的(de)廢(fei)棄(qi)物(wu)應(ying)該進(jin)行(xing)無(wu)害化(hua)處(chu)理後方可丟棄(qi)。