SNU-1750細胞

公司產品(pin)僅供(gong)科(ke)研研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床診(zhen)斷(duan)！

壹、商(shang)品介(jie)紹：

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生長至覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面積時(shi)，棄 25cm2培養瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹打(da)細胞使(shi)之脫落，然(ran)後將懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生長至覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面積時(shi)，棄 25cm2培養瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入培養液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打(da)細胞使(shi)之脫落，然(ran)後將懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放置(zhi)於凍(dong)存管(guan)中；

4）先將細胞凍(dong)存管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後轉入液氮中(zhong)進行(xing)長期(qi)保存(cun)。使用程序(xu)降溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培養操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以(yi)下細胞培養凍(dong)存處理(li)僅供(gong)參考(kao)，具(ju)體操(cao)作步驟以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書為主(zhu)。將含有1 mL細胞懸液的凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴中(zhong)迅速搖晃解凍(dong)，加4 mL培養基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加1-2 mL培養基(ji)後吹勻(yun)。然(ran)後將所(suo)有(you)細胞懸液加入含適(shi)量(liang)培養基(ji)的培養瓶中培養過(guo)夜（或(huo)將細胞懸液加入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜）。第(di)二天換(huan)液(ye)並(bing)檢查(zha)細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去(qu)培養上清(qing)，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使(shi)消(xiao)化液浸潤(run)所(suo)有(you)細胞，將(jiang)培養瓶置於37℃培養箱中消(xiao)化1-2 min（視細胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後在顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化情(qing)況，若細胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅速拿回(hui)操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶後加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸液按1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的含8 mL培養基(ji)的新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中，置(zhi)於培養箱中培養。 3) 細胞凍(dong)存：待細胞生長狀態(tai)良(liang)好(hao)時，可進行(xing)細胞凍(dong)存。下面 T25 瓶為例；a、收(shou)集細胞及(ji)細胞培養液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件(jian)下離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細胞計(ji)數。

b、根(gen)據細胞數量加入無血(xue)清細胞凍(dong)存液，使細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入液氮灌(guan)儲存。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿取(qu)。

三(san)、培養註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首(shou)先觀察(cha)細胞瓶是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若有上述(shu)現(xian)象 發(fa)生請及(ji)時和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細閱讀(du)細胞說(shuo)明書，了(le)解細胞相關信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需(xu) 細胞因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞培養條件(jian)壹致，若由(you)於培養條件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出現(xian)問題(ti)，責任由(you) 客戶自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態。因運輸(shu)問題(ti)，部分(fen)細胞由(you)於溫度 變(bian)化(hua)及劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎形成(cheng)碎片，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置於 37℃培養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以消(xiao)化，懸浮細胞直(zhi)接混勻收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的培養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接種到(dao)新的培養瓶或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培養箱中進行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶用(yong)相同條件(jian)的培養基(ji)用(yong)於細胞培養。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到(dao)細胞後前 3 天各拍幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態，便於和(he)我司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝通 交流。由(you)於運輸(shu)的原因，個別(bie)敏(min)感細胞會出現(xian)不(bu)穩(wen)定的情(qing)況，請(qing)及時和(he)我們(men)聯(lian)系，告知細胞 的具體(ti)情(qing)況，以(yi)便我(wo)們(men)的技(ji)術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞僅供(gong)科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培養細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按照說(shuo)明書細胞培 養條件(jian)新配制的培養基(ji)來(lai)培養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後第(di)壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出售的產品(pin)：

CLIAKitforCPAF(Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor)ELISAKit人(ren)衣(yi)原體樣(yang)活(huo)性因子(zi)規(gui)格：48T/96T

RatCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit 大鼠環0酸鳥苷(cGMP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) 96T/48T 進口分(fen)裝(zhuang)

細胞(NO)活(huo)性比(bi)色法(fa)定量(liang)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)50次(ci)

RatC-ReactiveProtein,CRPELISAKit大鼠C反(fan)應蛋白(bai)(CRP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

大鼠補(bu)體(ti)片(pian)斷(duan)5a(C5a)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ，英(ying)文(wen)名(ming)： C5a ELISA Kit

C組(zu)輪狀(zhuang)病(bing)毒(du)(HRV-C)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)(PCR-熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)法(fa)) 48T

HumanSerumamyloidP,SAPELISA試(shi)劑(ji)盒(he)人(ren)血(xue)清澱(dian)粉(fen)樣蛋(dan)白(bai)P(SAP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

ELISAKitSmad7小(xiao)鼠信號轉導分(fen)子(zi)7規(gui)格：48T/96T

Humancarbohydrate-deficieansferrin,CDTELISAKit人(ren)糖(tang)缺(que)失性轉(CDT)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

人(ren)Ⅱ(FⅡ)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒(he) 組(zu)裝/原裝

人(ren)柯薩(sa)奇病(bing)毒(du)IgG(CoxV-IgG)ELISA檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgGELISAKit 96T/48T

大鼠KI-67 免疫試(shi)劑(ji)盒(he) Rat KI-67 ELISA kit

CLIAKitforSmad1(HumanMothersagainstdecapeaplegichomolog1)ELISAKit人(ren)Smad1規(gui)格：48T/96T

乳(ru)酸球菌(Lactococcus)噬菌體特(te)異(yi)性PCR擴(kuo)增檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)20次(ci)

ELISAKitPYD人(ren)膠原交聯(lian)規格：48T/96T

腫(zhong)瘤抑(yi)制基(ji)因LATS1抗(kang)體(ti)

果糖(tang)-2,6-二磷酸酶1/磷酸果糖(tang)激(ji)酶(mei)2抗(kang)體(ti)

乳(ru)腺癌(ai)擴增序(xu)列蛋(dan)白(bai)4抗(kang)體(ti)

myocardin相關轉錄因子(zi)抗(kang)體(ti)

線(xian)粒體(ti)核糖(tang)體(ti)蛋(dan)白(bai)L24抗(kang)體(ti)

白(bai)細胞酪(lao)激(ji)酶受(shou)體(ti)抗(kang)體(ti)

磷酸化Src原癌基(ji)因重組(zu)兔單克(ke)隆抗(kang)體(ti)

SNU-1750細胞Cezanne蛋白(bai)抗(kang)體(ti)

堿型(xing)乙酰(xian)受體A2(神(shen)經(jing)型(xing))抗(kang)體(ti)