SNU-761細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科研(yan)研究使用、不得用於臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代，最後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適量的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放置於凍存管中；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮中進(jin)行(xing)長(chang)期保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序降(jiang)溫(wen)盒可(ke)直接放(fang)入(ru)-80℃。

壹、商品(pin)介紹：

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供(gong)參考，具(ju)體(ti)操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說明書(shu)為主。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心3 min，棄去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液加入含適量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸液加入10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天換液並檢查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上(shang)清，用不含(han)鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使消化液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓(yuan)並脫落，迅(xun)速(su)拿(na)回操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝入無(wu)菌(jun)離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸液按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無(wu)菌(jun)離心管中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心4 min，棄去上(shang)清液，用PBS清洗(xi)壹遍，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數量加入(ru)無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註意凍存管做(zuo)好標(biao)識。將凍(dong)存管放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮灌(guan)儲存。記(ji)錄凍存管位置以(yi)便下(xia)次(ci)拿(na)取。

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏液、渾濁(zhuo)等現象，若(ruo)有(you)上(shang)述現象 發(fa)生請及(ji)時(shi)和我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說明書(shu)，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形態、所(suo)用培(pei)養(yang)基、血(xue)清比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因子等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹致，若(ruo)由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件不壹致而(er)導致細(xi)胞(bao)出(chu)現問題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸問題，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇烈(lie)碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成碎(sui)片，是(shi)正常現象。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞(bao)狀態後(hou)，75%酒精消毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸浮細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培(pei)養(yang)基重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件的培(pei)養(yang)基用於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於和我司技(ji)術(shu)部溝通 交(jiao)流。由(you)於運輸的原因，個別敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會出(chu)現不穩(wen)定(ding)的情況，請及(ji)時(shi)和我們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況，以(yi)便我們的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤(zong)回訪直至問題解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使用。

8. 備註：運輸用的培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請換用按照(zhao)說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳(chuan)代建議 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公司(si)正在(zai)出(chu)售的(de)產(chan)品(pin)：

Ratansforminggrowthfactorsβ2,TGFβ2ELISAKit 大鼠轉(zhuan)化生長(chang)因子(zi)β2(TGFβ2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 進(jin)口(kou)分(fen)裝

Human alpha mannosidase (alpha Manase) ELISA Kit 人α甘(gan)露(lu)糖苷(gan)酶(α Manase)ELISA試(shi)劑(ji)盒

COXIgGII柯(ke)薩(sa)奇(qi)病(bing)毒(du)IgGⅡ(間(jian)接(jie)法(fa)二(er)步(bu)法(fa))

細(xi)胞(bao)乙醇脫(tuo)氫酶總(zong)活(huo)性(N)比色(se)法定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒20次

RatCollageypeⅣ,ColⅣELISAKit大鼠Ⅳ型(xing)膠原(ColⅣ)ELISA試(shi)劑(ji)盒規格(ge)：96T/48T

小鼠脫(tuo)氫表(biao)雄(xiong)(DHEA)免(mian)疫試(shi)劑(ji)盒 Mouse Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit

轉基因(yin)植(zhi)物(wu)PAT基因(yin)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(PCR-熒光探針法) 48T

HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISA試(shi)劑(ji)盒人可(ke)溶(rong)性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試(shi)劑(ji)盒規格(ge)：96T/48T

ELISAKitVE小鼠E規格(ge)：48T/96T

Humanbrainnaiureticpeptide，BNPELISAKit人腦素(su)/腦尿(niao)肽(tai)(BNP)ELISA試(shi)劑(ji)盒規格(ge)：96T/48T

大鼠血(xue)管(guan)生成素樣蛋白1(ANGPTL1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ，英文(wen)名： ANGPTL1 ELISA Kit

Mouse prostaglandin F (PGF) ELISA Kit 小鼠前(qian)列腺素(su)F(PGF)ELISA試(shi)劑(ji)盒

MouseStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 小鼠幹細(xi)胞(bao)因子受體(ti)(SCFR)ELISA試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 進(jin)口(kou)分(fen)裝

CLIAKitforHumanBeta-Thromboglobulin,Beta-TGELISAKit人β血(xue)小(xiao)板球(qiu)蛋白/β血(xue)栓(shuan)環(huan)蛋白規格(ge)：48T/96T

細(xi)胞(bao)DNA損傷(shang)彗(hui)星熒光檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒20次

腫瘤轉移抑(yi)制基因(yin)抗體(ti)

過(guo)氧化氫誘導(dao)轉錄蛋白1抗體(ti)

乳腺(xian)腫瘤病(bing)毒(du)受體(ti)同源(yuan)蛋白抗體(ti)

NADPH oxidase 3抗體(ti)

線粒(li)體(ti)核糖體(ti)蛋白S17抗體(ti)

半(ban)胺酸-2抗體(ti)

磷酸化氨基末(mo)端(duan)激(ji)酶1抗體(ti)

SNU-761細(xi)胞(bao)Cordon bleu蛋白樣1抗體(ti)

巖(yan)藻糖(tang)1磷酸鳥(niao)苷(gan)酰(xian)轉移酶抗體(ti)