桔(ju)梗染(ran)料法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒保存(cun)

實驗流程：
1. 整個(ge)檢測(ce)過程(cheng)應嚴格按(an)照(zhao)本說明(ming)書要求(qiu)分別(bie)在試劑(ji)準備區、樣(yang)本(ben)處理區(qu)和(he)PCR擴增區(qu)進(jin)行(xing)操作，各(ge)區實驗服(fu)、儀器(qi) 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立使(shi)用(yong)，不(bu)能(neng)混(hun)用；實驗用(yong)吸(xi)頭(tou)采用(yong)帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣(yang)本(ben)處理區(qu)應(ying)配有生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃，樣(yang)本(ben)處理在(zai)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃中進行(xing)操作；三個區(qu)應該配有紫(zi)外(wai)線殺(sha)菌裝置(zhi)。
2. 為避(bi)免RNA降解(jie)，樣(yang)本(ben)處理過(guo)程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條件下(xia)操作，且完成實驗後(hou)立即上(shang)機(ji)檢測(ce)；樣(yang)本(ben)處理過(guo)程(cheng)中使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具(ju)耗(hao)材(cai)應經過(guo)無(wu)核酶(mei)處理。
3. 每(mei)次實驗應(ying)該設(she)置陰、陽(yang)性對照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒所有試劑(ji)在使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)該在常(chang)溫下(xia)充(chong)分融(rong)化(hua)混(hun)勻，並(bing)應(ying)瞬(shun)時離心(xin)。
5. 試劑(ji)盒內所(suo)配陰性和陽(yang)性對照(zhao)在壹次使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)全(quan)部(bu)轉(zhuan)移至標本準備區，並單獨(du)存(cun)放。
6. 為防(fang)止(zhi)熒(ying)光(guang)幹擾，應避(bi)免(mian)裸(luo)手(shou)直接(jie)接(jie)觸PCR反應(ying)管，並(bing)應(ying)避免在(zai)PCR反應(ying)管上(shang)進(jin)行(xing)任何(he)標記(ji)。
7. 儀器(qi) 擴增相(xiang)關(guan)參數(shu)應按(an)照(zhao)本說明(ming)書相(xiang)關(guan)要求(qiu)進行(xing)設(she)置；不(bu)同批號(hao)試(shi)劑(ji)不能(neng)混(hun)用。
8. ABI系列熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數設(she)置中不選(xuan)ROX校正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過(guo)程中產品的(de)廢(fei)棄(qi)物(wu)應該進行(xing)無害(hai)化處理後(hou)方(fang)可(ke)丟棄(qi)。

特點：
1. 即開(kai)即用(yong)，用戶只需要(yao)提供病毒(du)樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據地(di)黃(huang)保守(shou)序(xu)列設(she)計(ji)的(de)專壹性引(yin)物，與(yu)相(xiang)關(guan)病毒(du)無交(jiao)叉反應(ying)。
3. 靈敏(min)度(du)可(ke)以(yi)達到(dao)幾(ji)百(bai)拷貝/反應(ying)。
4. 壹管(guan)式熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢測(ce)，避免(mian)後續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本試(shi)劑(ji)盒足夠 50 次 20μL 反應(ying)體(ti)系的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品只適(shi)用於(yu)科(ke)研，不能(neng)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)。
使(shi)用(yong)方(fang)法：
壹、樣(yang)品(pin)采集(ji)：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采集(ji)與(yu)預培養按(an)照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采集(ji)與(yu)預培養按(an)照(zhao)《食品(pin)衛生微(wei)生物(wu)學(xue)檢(jian)驗阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌檢(jian)驗要(yao)求進(jin)行(xing)。
2、血液(ye)樣(yang)品(pin)：用(yong)無(wu)菌(jun)註射(she)器(qi)抽(chou)取(qu)受檢(jian)者靜脈(mai)血2mL，註入無菌EDTA2Na(或(huo)檸檬(meng)酸(suan)鈉)抗凝(ning)管，立即混(hun)勻。
3、糞便樣(yang)品(pin)：取(qu)糞(fen)便置(zhi)於(yu)滅(mie)菌的(de)收(shou)集(ji)管(guan)中送(song)檢(jian)。
4、病竈(zao)部(bu)位(wei)樣(yang)品(pin)：取(qu)發(fa)病部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲出物、粘液(ye)膿血送(song)檢(jian)。
壹、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性對照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這(zhe) 6 個 10 倍稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)例(li)）
1. 註意(yi)：由於標準品濃(nong)度(du)非(fei)常(chang)高，因此(ci)下列稀(xi)釋(shi)操作壹定(ding)要在(zai)獨(du)立的(de)區(qu)域進(jin)行(xing)，千(qian)萬不能(neng)汙(wu)染(ran)樣(yang)品(pin)或(huo)本試劑(ji)盒的(de)其(qi)他成(cheng)分）。為增加產(chan)品(pin)穩定(ding)性和避(bi)免(mian)擴散傳(chuan)染(ran)性病原(yuan)，本產品(pin)不提供活體(ti)樣(yang)品(pin)做(zuo)陽(yang)性對照(zhao)，只提供可(ke)以(yi)直接(jie)使(shi)用(yong)的(de) DNA段(duan)作為陽(yang)性對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個離心(xin)管，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)分別(bie)加入 45 μL 熒光(guang) PCR 模板(ban)稀釋(shi)液(ye)（用(yong)帶芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下(xia)同(tong)）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)(上步(bu)稀釋(shi)所得(de))，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管(guan)中，充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用。
7. 重復(fu)上面(mian)的(de)操(cao)作直到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀(xi)釋(shi)度(du)的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用。
註：上(shang)述樣(yang)品(pin)建(jian)議經過(guo)增菌(jun)後(hou)，收集(ji)培養物用(yong)於檢測(ce)。 
二、DNA提取：
可(ke)采用(yong)PCR試劑(ji)盒配備的(de)DNA抽提液(ye)，按(an)以(yi)下說明(ming)進行(xing)DNA核酸(suan)的(de)粗(cu)提。也可(ke)采購(gou)上(shang)海澤葉生(sheng)物(wu)科(ke)技(ji)有限公司(si)生產(chan)的(de)DNA提取試(shi)劑(ji)盒(過柱(zhu)法-熒光(guang)配套)或(huo)其(qi)他合(he)適(shi)的(de)商(shang)業(ye)化(hua)產品，並按(an)照(zhao)相(xiang)應(ying)試劑(ji)盒說明(ming)進行(xing)操作。
1、液(ye)體(ti)培養物：取(qu)液(ye)體(ti)培養物100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離心(xin)管中，8000rpm離心(xin)3min，盡量(liang)吸(xi)棄上(shang)清(qing)，加入50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
2、固體(ti)培養物：挑(tiao)取單克(ke)隆菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞便樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒大小糞便於(yu)滅(mie)菌離心(xin)管中，加入0.5mL生理(li)鹽水(shui)，振蕩混(hun)勻，13000rpm離心(xin)3分鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱中加入50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
4、其(qi)他液(ye)體(ti)標本(ben)：取標(biao)本2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱中加入50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
註：陽(yang)性對照(zhao)和陰性對照(zhao)為已(yi)經抽(chou)提好(hao)的(de)核酸(suan)(無需提取)，直接(jie)取5μL加入到(dao)反應(ying)體(ti)系中即可(ke)。由於陽(yang)性對照(zhao)濃度(du)較(jiao)高，建議在樣(yang)品(pin)制備區域加入陽(yang)性對照(zhao)。 
人(ren)小膠質細胞(bao)總RNAHM NA七(qi)水(shui)(AR)Iron(II) sulfate, heptahydrate質量(liang)規(gui)格：AR,>99%

CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 1酸(suan)三鉀Potassium phosphate, tribasic質量(liang)規(gui)格：>98%

人(ren)上(shang)皮細胞(bao)*培養基 100mL鈣黃(huang)綠素(su)二鈉(na)鹽(yan)Calcein,  salt質量(liang)規(gui)格：IND grade

COS-7細胞(bao)，SV40轉(zhuan)化的(de)非(fei)洲(zhou)綠猴(hou)腎細胞(bao) 293T/17 [HEK 293T/17] (人(ren)胚(pei)腎細(xi)胞(bao)) 雜交(jiao)瘤(B類);Z1510C6D10F4G6植酸(suan)鈉Phytic acid dodeca salt hydrate質量(liang)規(gui)格：>98%,BR

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組(zu)斑(ban)馬(ma)魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白(bai) (His 標簽(qian))菊(ju)粉(fen);菊(ju)糖Inulin from chicory質量(liang)規(gui)格：>90%,BR
大鼠骨髓瘤細(xi)胞(bao);Y3-Ag 1.2.3神經氨(an)酸(suan)酶(mei)(≥10 units/ mg )質量(liang)規(gui)格：≥10 units/ mg Neuraminidase from Clostridium perfringens

CD33 Others Human 人(ren) CD33 / Siglec-3 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 乙酸(suan)鎳四(si)水(>98%,BC)質量(liang)規(gui)格：>98%,BCNickel (II) acetate, tetrahydrate

CL-0013A2780(人(ren)卵巢癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶×2氧(yang)化(標準品)質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標準品Oxymatrine

KB細胞(bao)，人(ren)口(kou)腔表(biao)皮樣(yang)癌(ai)細胞(bao) 人(ren)血管(guan)內皮(pi)細(xi)胞(bao),VE細胞(bao) 大鼠肝癌(ai)細胞(bao);RH-35內酯質量(liang)規(gui)格：>98%,BRAndrographolide

BT-549(人(ren)管(guan)癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2內酯（標準品）質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標準品Andrographolide
Hela, 人(ren)細(xi)胞(bao)系(xi) 小鼠成纖維(wei)細(xi)胞(bao),3T3TK細胞(bao) SPA-A1(肺腺(xian)癌(ai)細胞(bao))泡(pao)蛙(wa)肽質量(liang)規(gui)格：>95%,BRPhysalaemin

小鼠單核巨噬細(xi)胞(bao)白(bai)血病細(xi)胞(bao);RAW 264.7 [RAW264.7PKI-tide質量(liang)規(gui)格：>95%,BRPKI-tide

FGFR2 Others Human 人(ren) FGFR2 / CD332 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 血小板因子4質量(liang)規(gui)格：>95%,BRPlatelet Factor 4 (58-70)(human)

小鼠子細胞(bao);U14Pneumadin，人(ren)質量(liang)規(gui)格：>95%,BRPneumadin (human)

IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 1酸(suan)鋅四(si)水(>98%,BR)質量(liang)規(gui)格：>98%,BRZinc phosphate tetrahydrate
桔(ju)梗染(ran)料法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒保存(cun)CD80 Others Human 人(ren) B7-1 / CD80 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) TRICINE三羥(qiang)甲(jia)基甲(jia)基甘酸(suan)1克(ke)IND

人(ren)肝細(xi)胞(bao)RNAHH miRNA5 μg1-十二(er)流醇(chun) 1-Dodqccnqthiol 11-22-0

大鼠心肌細胞(bao)(RCM)(1×106)M-TGE肉湯(tang)shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：500毫(hao)升(sheng)

荷(he)蘭白(bai)花奶肺細(xi)胞(bao);DCL1錄(lu)化(hua)-2-羥(qiang)基-3-(基)基聚(ju)環(huan)氧(yang)纖維(wei)素(su)，英文名(ming)或(huo)英文縮(suo)寫：Polyquaternium-10，級別(bie)：IND，規格：25克(ke)

T739小鼠肺腺(xian)癌(ai)瘤株(zhu)
儲存(cun)條件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集(ji)、處理及(ji)保存(cun)方(fang)法
1. 血清(qing)：使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原(yuan)和內毒(du)素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操(cao)作過程(cheng)中避免任何(he)細胞(bao)刺(ci)激(ji)，收(shou)集(ji)血液(ye)後(hou)，3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分鐘(zhong)將血清(qing)和紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速小心地分離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽或(huo)肝素(su)抗凝(ning)。3000 轉(zhuan)離心(xin)30 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
3. 細胞(bao)上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒和(he)聚合(he)物(wu)。
4. 組織(zhi)勻漿(jiang)：將組(zu)織(zhi)加入適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
5. 保存(cun)：如(ru)果樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)後(hou)不及(ji)時檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次用量(liang)分裝，凍(dong)存(cun)於-20℃，避免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)，在(zai)室(shi)溫下(xia)解(jie)凍(dong)並確保樣(yang)品(pin)均(jun)勻(yun)地(di)充(chong)分解(jie)凍(dong)。