SNU-8細(xi)胞(bao)

公(gong)司產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用、不得(de)用於臨床診(zhen)斷(duan)！

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹：

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡下觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後加入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消化，再輕(qing)輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比例進(jin)行分瓶(ping)傳代，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡下觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後加入培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消化，輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並放置於凍存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管放置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中進(jin)行長期保存(cun)。使用程(cheng)序(xu)降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培養(yang)凍(dong)存處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基混合均(jun)勻。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)含適量培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換液(ye)並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳代培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上清(qing)，用不含鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液(ye)浸潤(run)所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置於37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而(er)定），然(ran)後(hou)在顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕打勻後(hou)裝入(ru)無菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比例分到新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好時，可(ke)進(jin)行細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄盡PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數量加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍存管位(wei)置以(yi)便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完好，培養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有(you)上述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及時和我們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關信(xin)息，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比例、所需 細(xi)胞(bao)因子等，確(que)保細(xi)胞(bao)培養(yang)條件(jian)壹(yi)致，若由(you)於培養(yang)條件(jian)不壹(yi)致而(er)導致(zhi)細(xi)胞(bao)出現(xian)問題(ti)，責任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變化(hua)及劇烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正常現(xian)象(xiang)。觀察好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混勻收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相同(tong)條件(jian)的(de)培養(yang)基用(yong)於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後前 3 天各拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照片，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於和我司技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸的(de)原因，個別敏感細(xi)胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩定(ding)的(de)情況，請(qing)及時和我們(men)聯系(xi)，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具體情況，以(yi)便我們(men)的(de)技術(shu)人員跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用的(de)培養(yang)基 (灌液(ye)培養(yang)基) 不能再用(yong)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用按照說明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條件(jian)新(xin)配(pei)制的(de)培養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司正在出售的(de)產品(pin)：

Mouse ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 小鼠(shu)α幹擾素(IFN-α)ELISA試(shi)劑盒(he)

大(da)鼠(shu)二(MDA)ELISA試(shi)劑盒(he) ，英(ying)文(wen)名： MDA ELISA Kit

ELISA 小鼠(shu)內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)合酶(mei)(mouse eNOS) 48T/96T 進(jin)口(kou)分裝(zhuang)

CLIAKitforKLHELISAKit小鼠(shu)鑰(yao)孔(kong)蟲戚(qi)血(xue)藍(lan)蛋(dan)白規格(ge)：48T/96T

通(tong)用(yong)型大(da)腸(chang)彎曲(qu)桿(gan)菌(Campylobactercoli)試(shi)劑盒(he)20次(ci)

人能a1A受(shou)體(ti)(ADRA1A)ELISA 試(shi)劑盒(he) 96T/48T 試(shi)劑盒(he) 組(zu)裝(zhuang)/原裝

小鼠(shu)載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白E(Apo-E)免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒(he) Mouse apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit

豬流(liu)行性腹(fu)瀉病(bing)毒(du)(PEDV)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)(-PCR法) 48T

HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISA試(shi)劑盒(he)人血血(xue)小板(ban)衍(yan)生(sheng)生(sheng)長因子可(ke)溶(rong)性(xing)受(shou)體(ti)α(PDGFsR-α)ELISA試(shi)劑盒(he)規格(ge)：96T/48T

ELISAKitMHC魚(yu)類主要組織(zhi)相容性復合(he)體(ti)規格(ge)：48T/96T

ELISAKitAZT大(da)鼠(shu)規格(ge)：48T/96T

大(da)鼠(shu)血(xue)管(guan)生(sheng)成素受(shou)體(ti)Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試(shi)劑盒(he) 96T/48T 試(shi)劑盒(he) 組(zu)裝(zhuang)/原裝

人細(xi)胞(bao)周期蛋(dan)白A1(CCNA1)免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒(he) Human Cyclin-A1,CCNA1 ELISA kit

抗(kang)壞(huai)血(xue)酸(AsA)含(han)量(liang)測(ce)試(shi)盒(he) 紫外分光(guang)光(guang)度(du)法 50管(guan)/48樣

Ratneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISA試(shi)劑盒(he)大(da)鼠(shu)中(zhong)性(xing)粒細(xi)胞(bao)明(ming)膠酶(mei)相關脂質運(yun)載蛋(dan)白(NGAL)ELISA試(shi)劑盒(he)規格(ge)：96T/48T

重(zhong)組(zu)程(cheng)序(xu)性死亡(wang)配體(ti)1兔(tu)單(dan)克隆抗(kang)體(ti)

過(guo)氧(yang)化物還原酶(mei)4抗(kang)體(ti)

乳腺腫(zhong)瘤(liu)新(xin)因子1抗(kang)體(ti)

NADPH氧(yang)化(hua)酶(mei)2抗(kang)體(ti)

線(xian)粒體(ti)核(he)糖體(ti)蛋白S18A抗(kang)體(ti)

半(ban)胺(an)酸-7抗(kang)體(ti)

磷酸化氨基末(mo)端(duan)激酶(mei)2抗(kang)體(ti)

SNU-8細(xi)胞(bao)CoREST2蛋白抗(kang)體(ti)

巖(yan)藻(zao)糖基轉移酶(mei)6抗(kang)體(ti)