SNU-840細胞(bao)

公司產(chan)品(pin)僅供(gong)科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商(shang)品(pin)介(jie)紹：

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基重(zhong)懸，然後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中(zhong)進(jin)行長期保存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序降溫盒(he)可(ke)直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操(cao)作

1) 復蘇細胞(bao)：以下細胞(bao)培(pei)養凍存(cun)處(chu)理僅供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操(cao)作步驟(zhou)以隨貨產(chan)品(pin)說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖(yao)晃解凍，加(jia)4 mL培養基(ji)混合均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或將細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸潤(run)所有細胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置於37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而定），然後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大(da)部(bu)分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終(zhong)止消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到新的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態良好時，可進行細胞(bao)凍存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養液，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數。

b、根據細胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使(shi)細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標識。將凍存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍存(cun)管(guan)位置以便下次(ci)拿取(qu)。

三、培(pei)養註意(yi)事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完好，培(pei)養液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有上述現象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時和我們(men)聯系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明書，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細胞(bao)形(xing)態、所用(yong)培(pei)養基、血清比例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子等(deng)，確(que)保細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養(yang)條(tiao)件不壹致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞(bao)出(chu)現問(wen)題，責(ze)任由(you) 客(ke)戶自行承擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸問(wen)題，部(bu)分細胞(bao)由(you)於溫度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破碎形(xing)成碎(sui)片(pian)，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮細胞(bao)直(zhi)接混勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件的(de)培養基用(yong)於細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議(yi)客(ke)戶收到(dao)細胞(bao)後(hou)前 3 天各拍幾(ji)張細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細胞(bao)狀(zhuang)態，便於和我司(si)技術(shu)部(bu)溝通(tong) 交流。由(you)於運輸的原因，個別(bie)敏感細胞(bao)會(hui)出(chu)現不穩(wen)定的情(qing)況，請及(ji)時和我們(men)聯系(xi)，告知細胞(bao) 的(de)具體(ti)情況，以便我們(men)的技術(shu)人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸用(yong)的(de)培養基 (灌液培養基(ji)) 不能(neng)再用(yong)來(lai)培養細胞(bao)，請換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司正在出(chu)售的產(chan)品(pin)：

通(tong)用(yong)型(xing)蛋(dan)白免(mian)疫共(gong)沈澱(dian)(蛋(dan)白A樹脂(zhi))試(shi)劑(ji)盒(he)10次(ci)

CLIAKitfom-1(HumanKidneyinjurymolecule1)ELISAKit人腎(shen)損(sun)傷分(fen)子1規(gui)格：48T/96T

ELISAKitMHCⅢ/H-1Ⅲ大鼠主(zhu)要組(zu)織相容(rong)性復合體(ti)Ⅲ類規(gui)格：48T/96T

大鼠別(bie)孕烯(xi)醇(chun)(AP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ，英文名(ming)： AP ELISA Kit

Rat esogen receptor (ER) ELISA Kit 大鼠雌(ci)激(ji)素(su)受體(ti)(ER)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

Humansolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA試(shi)劑(ji)盒(he)人(ren)白介(jie)素(su)1可溶性(xing)受體(ti)Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

ELISAKitAGEs小(xiao)鼠晚期糖(tang)基化終(zhong)末產(chan)物(wu)規(gui)格：48T/96T

HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISAKit人骨(gu)形(xing)成蛋(dan)白6(BMP-6)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

人內肽(tai)-2(EM-2)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒(he) 組(zu)裝/原裝

小(xiao)鼠糖(tang)皮(pi)質類固醇(chun)受體(ti)(GR)免(mian)疫試(shi)劑(ji)盒(he) Mouse glucocoicoid receptor,GR ELISA Kit

總巰基(ji)測試(shi)盒(he) 可見分(fen)光光度(du)法 50管(guan)/24樣

Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試(shi)劑(ji)盒(he)大(da)鼠酰(xian)胺腺(xian)嘌呤二(er)核苷(gan)酸(suan)0酸(suan)(NADPH)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

Humanhistatin5,HTN5ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)人(ren)富組(zu)蛋(dan)白(HTN5)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β,MIP-1βELISAKit人巨(ju)噬(shi)細胞(bao)炎(yan)性蛋(dan)白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

大鼠血管(guan)生(sheng)成素(su)4(ANGPT4)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ，英文名(ming)： ANGPT4 ELISA Kit

重(zhong)組(zu)激(ji)活基因(yin)2蛋(dan)白抗(kang)體(ti)

過(guo)氧(yang)化物(wu)酶-2抗體(ti)

乳腺珠(zhu)蛋(dan)白1抗體(ti)

NADPH氧(yang)化酶活(huo)化蛋(dan)白p47抗體(ti)

線粒體(ti)核糖(tang)體(ti)蛋(dan)白S21抗體(ti)

半胺酸(suan)蛋(dan)白-13抗體(ti)

磷酸(suan)化白介(jie)素(su)-1受體(ti)相關(guan)激(ji)酶4抗體(ti)

SNU-840細胞(bao)cornichon樣(yang)蛋(dan)白抗(kang)體(ti)

巖(yan)藻(zao)糖(tang)轉移酶2抗(kang)體(ti)