SW156SW-156,SW156細(xi)胞(bao)

公(gong)司產品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨床診斷！

壹、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養基重懸，然後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培養箱中(zhong)培養；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適量的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放置(zhi)於凍(dong)存管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保存。使用(yong)程序(xu)降溫盒(he)可直接放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養操作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細胞(bao)培養凍(dong)存處理(li)僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入含適量培養基的(de)培養瓶中(zhong)培養過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基，培養過夜）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去(qu)培養上清，用不含鈣(gai)、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤(run)所有(you)細胞(bao)，將培養瓶置於(yu)37℃培養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消化情(qing)況，若細胞(bao)大部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅速拿回操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下培養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱中(zhong)培養。 3) 細胞凍(dong)存：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞培養液(ye)，裝入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞數(shu)量(liang)加(jia)入無血清細(xi)胞凍(dong)存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存管做(zuo)好標識。將凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存。記錄(lu)凍(dong)存管位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下次拿取(qu)。

三、培養註(zhu)意事項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶是否完好，培養液(ye)是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及時(shi)和我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞(bao)說明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培養基、血清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因子(zi)等，確(que)保細(xi)胞培養條件壹致(zhi)，若由於(yu)培養條件不(bu)壹致(zhi)而導(dao)致細胞(bao)出(chu)現問(wen)題，責(ze)任由(you) 客戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細胞瓶表面(mian)，顯(xian)微鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於(yu)溫度 變(bian)化(hua)及劇(ju)烈碰亡(wang)破碎形(xing)成碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精消毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可以消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細胞(bao)直接混(hun)勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培養基重懸 細胞，並(bing)接種到新的(de)培養瓶或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同條件的(de)培養基用(yong)於(yu)細(xi)胞培養。

6. 建議客戶收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)前 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和我(wo)司技術(shu)部(bu)溝通(tong) 交流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原因，個(ge)別敏感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時(shi)和我(wo)們聯(lian)系，告知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況，以便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的(de)培養基 (灌液(ye)培養基) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培養細胞，請換用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培 養條件新(xin)配(pei)制的(de)培養基來(lai)培養細胞。     收到細胞後(hou)第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司正(zheng)在出(chu)售的(de)產品：

Ratsolionclusterofdiffereiation14,sCD14ELISAKit 大(da)鼠(shu)可溶性(xing)白(bai)細胞分化(hua)抗(kang)原14(sCD14)ELISA試劑盒(he) 96T/48T 進口(kou)分裝

Human alpha smooth muscle actin (-SMA) ELISA Kit 人α平(ping)滑肌(ji)肌(ji)動蛋白(α-SMA)ELISA試(shi)劑盒(he)

CLIAKitforCollagenaseII(MouseCollagenaseTypeII)ELISAKit小鼠(shu)膠原酶II規(gui)格(ge)：48T/96T

細胞(bao)乙(yi)脫(tuo)氫酶4活(huo)性(xing)比(bi)色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)20次

RatcoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit大(da)鼠Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

小鼠(shu)突(tu)觸(chu)融合(he)蛋白1A(STX1A)免疫試劑盒(he) Mouse Syaxin-1A(STX1A)ELISA Kit

轉基因(yin)植(zhi)物(wu)NPTⅡ基因(yin)檢(jian)測試(shi)劑盒(he) 48T

HumansolubleE-selectin,sE-selectinELISA試劑(ji)盒(he)人可溶性(xing)E選擇(ze)素(su)(sE-selectin)ELISA試(shi)劑盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

ELISAKitVD小鼠(shu)D規(gui)格(ge)：48T/96T

HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit人骨(gu)特(te)異(yi)性(xing)堿(jian)性(xing)0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑(ji)盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

大鼠(shu)血管內(nei)皮(pi)細胞(bao)粘附(fu)分子(zi)1(VCAM-1)ELISA試劑盒(he) ，英文(wen)名： VCAM-1 ELISA Kit

人軍(jun)團(tuan)菌(jun)抗(kang)體(ti)IgM(LPAb-IgM)ELISA檢(jian)測試(shi)劑盒(he)HumanLegionellaaibodyIgM,LPAb-IgMELISAKit 96T/48T

大鼠(shu)D二(er)聚體(ti)(D2D)免疫試劑盒(he) Rat D-Dimer,D2D ELISA Kit

CLIAKitforsIgAELISAKit大鼠(shu)分泌型(xing)A規(gui)格(ge)：48T/96T

砷元(yuan)素(su)檢(jian)測樣(yang)品處理試(shi)劑(ji)盒(he)20次

周期素(su)A2抗(kang)體(ti)

過氧化(hua)物酶體合(he)成因(yin)子(zi)16抗(kang)體(ti)

軟骨細(xi)胞Ezrin樣(yang)蛋白抗(kang)體(ti)

NBPF16蛋白抗(kang)體(ti)

線粒體(ti)核(he)糖(tang)體(ti)蛋白S6抗(kang)體(ti)

半乳糖(tang)凝(ning)集(ji)素10抗(kang)體(ti)

磷酸化(hua)表(biao)皮(pi)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)受(shou)體重組兔單克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti)

SW156[SW-156,SW156]細(xi)胞CRISPR/Cas9單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti)

陽(yang)離子(zi)通道(dao)相(xiang)關(guan)蛋白3抗(kang)體(ti)