NPTII基因核(he)酸檢測試劑(ji)盒

訂(ding)購信息：
 產(chan)品名稱：NPTII基因核(he)酸檢測試劑(ji)盒
規格：48T  0.2PCR管(guan)
編(bian)號：BH-P97040
分類(lei)：PCR-熒(ying)光(guang)探(tan)針法(fa)
儲(chu)存條件(jian)：-20℃避光(guang)保(bao)存(cun)，避免反復(fu)凍(dong)融。
運輸：低溫(wen)、避光(guang)，快遞(di)免費送貨(huo)上門。
產(chan)品特點(dian)：
◇高(gao)特異(yi)性(xing)：與其(qi)他病毒(du)無交(jiao)叉反應(ying)，無非(fei)特異(yi)性(xing)擴增(zeng)；
◇高(gao)靈敏(min)度(du)：檢(jian)測靈(ling)敏度可(ke)達(da)10~100拷(kao)貝(bei)；
◇操(cao)作簡便(bian)：該系列所(suo)有試劑(ji)均采(cai)用相同的(de)體(ti)系和(he)條(tiao)件(jian)，可(ke)同時進行多個(ge)檢測；
◇高(gao)通量(liang)：多種(zhong)雙(shuang)重(zhong)PCR檢(jian)測以(yi)及三(san)重(zhong)PCR檢(jian)測試劑(ji)盒。

準(zhun)備(bei)物(wu)品：
清(qing)理液（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染色液（t B）                                   微(wei)升(sheng)
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產(chan)品說(shuo)明(ming)書                                   1份
使(shi)用及(ji)效(xiao)果(guo)：
PCR反應(ying)特點(dian)
(1) 特異(yi)性(xing)強
PCR反應(ying)的(de)特異(yi)性(xing)決定(ding)因素(su)為(wei)：
①引(yin)物(wu)與模(mo)板DNA特異(yi)正(zheng)確(que)的(de)結合；
②堿(jian)基配(pei)對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚合酶合成(cheng)反應(ying)的(de)忠(zhong)實性(xing)；
④靶基因的(de)特異(yi)性(xing)與保(bao)守(shou)性(xing)。
其(qi)中引(yin)物(wu)與模(mo)板的(de)正確(que)結(jie)合是(shi)關(guan)鍵。引物(wu)與模(mo)板的(de)結合及引物(wu)鏈的(de)延伸是(shi)遵循(xun)堿基配(pei)對(dui)原(yuan)則的(de)。聚合酶合成(cheng)反應(ying)的(de)忠(zhong)實性(xing)及Taq DNA聚合酶耐高溫(wen)性(xing)，使(shi)反應(ying)中模(mo)板與(yu)引(yin)物(wu)的(de)結合(復(fu)性(xing))可(ke)以(yi)在(zai)較高的(de)溫度(du)下(xia)進行，結合的(de)特異(yi)性(xing)大大增(zeng)加(jia)，被(bei)擴增(zeng)的(de)靶基因片(pian)段也(ye)就能(neng)保(bao)持(chi)很(hen)高的(de)正確(que)度(du)。再通過選(xuan)擇特異(yi)性(xing)和(he)保(bao)守(shou)性(xing)高的(de)靶基因區，其特異(yi)性(xing)程度(du)就更(geng)高(gao)。
(2) 靈(ling)敏度(du)高(gao)
PCR產(chan)物(wu)的(de)生(sheng)成(cheng)量(liang)是(shi)以(yi)指(zhi)數方(fang)式(shi)增(zeng)加(jia)的(de)，能將(jiang)皮克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的(de)起始(shi)待(dai)測模(mo)板擴增(zeng)到微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平。能(neng)從100萬(wan)個(ge)細胞中(zhong)檢出(chu)壹個(ge)靶細胞；在(zai)病毒(du)的(de)檢測中(zhong)，PCR的(de)靈敏(min)度(du)可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空(kong)斑形成(cheng)單位)；在(zai)細菌學(xue)中(zhong)zui小(xiao)檢出(chu)率為(wei)3個(ge)細菌。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速
PCR反應(ying)用耐(nai)高(gao)溫的(de)Taq DNA聚合酶，壹次性(xing)地將(jiang)反應(ying)液加(jia)好(hao)後(hou)，即在DNA擴(kuo)增(zeng)液和(he)水(shui)浴鍋(guo)上進行變性(xing)-退(tui)火(huo)-延伸反應(ying)，壹般在2～4 小(xiao)時完(wan)成(cheng)擴增(zeng)反應(ying)。擴增(zeng)產物(wu)壹般用電(dian)泳(yong)分析(xi)，不(bu)壹(yi)定要用同位素(su)，無放(fang)射(she)性(xing)汙染、易(yi)推廣。
(4) 對(dui)標(biao)本(ben)的(de)純度(du)要求低
不(bu)需(xu)要分離(li)病毒(du)或細菌及(ji)培(pei)養細胞，DNA 粗(cu)制(zhi)品及總RNA均(jun)可(ke)作為擴(kuo)增(zeng)模板(ban)。可(ke)直(zhi)接(jie)用臨(lin)床標(biao)本(ben)如(ru)血(xue)液(ye)、體(ti)腔液、洗嗽(sou)液(ye)、毛發、細胞、活(huo)PCR技(ji)術概(gai)論(lun)。
CTSC Others Human  CTSC / DPPI 細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 隱(yin)綠原(yuan)酸()Cryptochlorogenic acidHPLC≥98%，

中(zhong)國倉鼠卵巢(chao)細胞(亞(ya)系克(ke)隆(long));DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1鷹(ying)嘴豆(dou)芽素(su)A()Biochanin AHPLC≥98%，

IL1R1 Others Mouse 小(xiao)鼠 IL1R1 / CD121a 細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 鷹(ying)嘴豆(dou)芽素(su)ABiochanin A>98%,BR

Jurkat(懸(xuan)浮) 急(ji)性(xing)T細胞白(bai)血(xue)病柚(you)皮苷(gan),川(chuan)陳皮素(su)NaringinHPLC≥98%，

PC-3前(qian)列腺(xian)癌細胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培(pei)養基+10%FBS羽(yu)扇豆(dou)醇(chun)（）LupeolHPLC≥98%，
胰(yi)腺導管(guan)上(shang)皮細胞Many types of cells　5 × 105方(fang)(1ml)8-氟(fu)-6-甲(jia)氧基莫(mo)西(xi)沙星美國進口(kou)8-Fluoro-6-methoxy Moxifloxacin

EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑(ban)馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) (R)-酰(xian)基-β-D-葡(pu)萄糖(tang)苷(gan)酸芐基酯美國進口(kou)(R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester

大鼠腎上腺(xian)嗜(shi)鉻細胞瘤(liu)細胞;PC-12 [PC12](S)-酰(xian)基-β-D-葡(pu)萄糖(tang)苷(gan)酸芐基酯美國進口(kou)(S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester

MRC-5細胞，胚(pei)肺(fei)細胞 大鼠肺(fei)上(shang)皮Ⅱ型細胞,RLE-6TN細胞 T-109B彈(dan)性(xing)蛋白(bai)酶(含(han)100mL酶(mei)解緩沖(chong)液(ye))10mL(R)-O-去(qu)甲基美國進口(kou)(R)-O-Desmethyl Naproxen

SK-OV-3(卵巢(chao)癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2莫(mo)沙(sha)必(bi)利美國進口(kou)Mosapride
NPTII基因核(he)酸檢測試劑(ji)盒CM-R072大鼠腎管(guan)狀上(shang)皮細胞*培(pei)養基100mL硫(liu)代基脲25克(ke)

小(xiao)鼠B細胞雜(za)交(jiao)瘤(liu)細胞;SH2 小(xiao)鼠腸粘膜(mo)上(shang)皮細胞*培(pei)養基 100mL2,2,2-三(san)拂醇(chun) 2,2,2-Trifluoroqthcnol; 72-89-8

MN-c, 小(xiao)鼠皮質(zhi)神經元(yuan) Mouse鉀25克(ke)RT

KIT Others Mouse 小(xiao)鼠 c-kit / CD117 細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 羥(qiang)脯(pu)酸測試盒25支(zhi)/包(bao)

急(ji)性(xing)T細胞白(bai)血(xue)病細胞;Jurkat, Clone E6-110203-08-43,5-二錄(lu)3,5-Dichloro
檢(jian)測步(bu)驟：
壹(yi)、 試劑(ji)的(de)準備(bei)
從試劑(ji)盒中取(qu)出(chu)熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混合物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融化並振蕩混勻(yun)後，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設所需(xu)要的(de)PCR反應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei)N(N=樣(yang)本數+1管(guan)陰(yin)性(xing)對(dui)照+1管(guan)陽(yang)性(xing)對(dui)照)，每(mei)個(ge)測試反應(ying)體(ti)系配(pei)制(zhi)如(ru)下(xia)表：
試劑(ji) 每(mei)個(ge)反應(ying)加(jia)入的(de)量(liang) N個(ge)反應(ying)加(jia)入的(de)量(liang)
熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液 14µL N×14µL
酶(mei)混合物(wu) 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好各試劑(ji)的(de)使(shi)用量(liang)，加(jia)入壹適(shi)當(dang)體(ti)積(ji)潔(jie)凈離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，充分混勻(yun)，10000rpm離(li)心(xin)10s，向(xiang)設定的(de)N個(ge)PCR反應(ying)管(guan)中(zhong)分別加(jia)入15μL熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液，向(xiang)每(mei)管(guan)中(zhong)加(jia)入處理後樣(yang)品或陰(yin)性(xing)對(dui)照(NTC)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離(li)心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反應(ying)條件(jian)
將(jiang)各反應(ying)管(guan)放(fang)入定量(liang)PCR儀(yi)器的(de)反應(ying)槽內(nei)。
循(xun)環(huan)條件(jian):
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預變性(xing) 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延伸時收(shou)集(ji)熒(ying)光(guang)信號。報告(gao)基團：設置(zhi)為FAM。淬(cui)滅基團：NONE，請(qing)勿(wu)選(xuan)擇ROX參(can)比熒(ying)光(guang)。