要完成(cheng)壹(yi)項漂(piao)亮(liang)的ELISA實驗(yan),不光(guang)要做(zuo)足實驗(yan)的準備(bei),還要對其(qi)他(ta)各(ge)種(zhong)輔(fu)助材(cai)料有(you)所了解,這(zhe)其(qi)中(zhong)防腐劑(ji)的運用(yong)很重要,ELISA試劑(ji)盒(he)中常用(yong)的防腐劑(ji)有:
1.疊(die)氮(dan)鈉是(shi)HRP的(de)抑制劑(ji),凡是(shi)和HRP接觸(chu)的(de)試劑(ji),壹(yi)定不能(neng)用(yong);
2.硫柳(liu)汞(gong)在ELISA試劑(ji)中可(ke)普(pu)遍使(shi)用(yong),但因其(qi)有(you)毒,較(jiao)少使(shi)用(yong);
3. 市面許多試劑(ji)盒(he)產品,用(yong)抗(kang)生素(su)做防腐劑(ji)較(jiao)多,如慶(qing)大(da)。
4. 如果試劑(ji)僅在實驗(yan)室短(duan)期(qi)使(shi)用(yong),其(qi)實並(bing)不需(xu)加(jia)防腐劑(ji),常規(gui)試劑(ji)放4度(du)冰(bing)箱,抗(kang)體、酶等加甘(gan)油分(fen)裝凍存(cun)即(ji)可。
5. 防汙(wu)染(ran)可添(tian)加(jia)0.02%的疊(die)氮(dan)鈉,或(huo)0.01%的(de)硫(liu)柳(liu)汞(gong)。疊(die)氮(dan)鈉在多數(shu)情(qing)況下有用(yong)且(qie)有(you)效,但在有些實驗(yan)中卻(que)不合(he)適(shi),因(yin)為(wei)它(ta)能(neng)阻(zu)斷細胞(bao)的(de)電子傳遞鏈,對許多生物體都有(you)毒性(xing),因(yin)此不能(neng)用(yong)於活(huo)體實驗(yan);因為(wei)含有(you)氨(an)基(ji)而(er)能(neng)幹擾(rao)許多標記方法(fa);不能(neng)用(yong)於辣根過(guo)氧化物酶標(biao)記(ji)的抗(kang)體。而(er)硫柳(liu)汞(gong)不含(han)氨(an)基(ji),不影響基(ji)質的(de)穩(wen)定性。如果將抗(kang)體應(ying)用(yong)於生(sheng)物(wu)活(huo)性檢測、體內(nei)實驗(yan),壹(yi)般(ban)不使(shi)用(yong)任何(he)防腐劑(ji),這(zhe)些實驗(yan)用(yong)的抗(kang)體應(ying)少量分(fen)裝冷存(cun),切忌反復(fu)凍融。
6. 吐溫(wen)-20是(shi)作(zuo)為(wei)穩定劑(ji),可減少非特(te)異(yi)性(xing)黏(nian)合(he)。
7.甘(gan)油是(shi)防止(zhi)凍(dong)融過程(cheng)中的(de)固-液(ye)相變而引起(qi)蛋(dan)白(bai)變性(xing),能有(you)效地增強蛋(dan)白質的(de)穩(wen)定性,-20度(du)凍(dong)存(cun)時(shi)甘(gan)油的濃度(du)可(ke)以(yi)在20~30%。