SW1271細胞

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷！

壹(yi)、商(shang)品介紹：

1、細胞傳代：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱(dian)細胞用 1-2ml 培養基(ji)重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止消化，輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並放(fang)置於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其移入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存(cun)。使用程序降(jiang)溫盒(he)可直接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培養(yang)凍(dong)存處(chu)理(li)僅供(gong)參考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹(chui)勻。然後將所有細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養基的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培養過夜（或將細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約8 mL培養(yang)基，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液(ye)並檢查細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳代：如果細胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳代培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞，將培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況而(er)定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞消化情況，若細(xi)胞大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落，迅速拿回(hui)操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止消化。輕輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基的(de)新皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細胞凍(dong)存：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良(liang)好時(shi)，可進(jin)行細胞凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細胞及細(xi)胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞計數(shu)。

b、根據細(xi)胞數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標(biao)識。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下次拿取。

三(san)、培(pei)養註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好，培(pei)養液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若有(you)上述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯系。

2. 仔細閱讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細胞形(xing)態、所用(yong)培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例、所需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹(yi)致，若由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而(er)導致(zhi)細胞出現(xian)問(wen)題，責任由(you) 客戶自行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分(fen)細胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎形成(cheng)碎片，是(shi)正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞狀態後，75%酒精消毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可以(yi)消化，懸浮(fu)細胞(bao)直接混勻收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養基重懸(xuan) 細(xi)胞，並接種到新(xin)的培(pei)養瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件(jian)的培養基用於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到細(xi)胞後前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞狀態，便(bian)於(yu)和(he)我司(si)技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定的(de)情況，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯系，告知細胞 的(de)具體(ti)情況，以(yi)便(bian)我們(men)的(de)技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供(gong)科研(yan)使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養(yang)基 (灌液(ye)培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養細胞，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的培養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞。     收(shou)到細(xi)胞後第(di)壹(yi)次傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正在(zai)出售(shou)的產品(pin)：

大(da)鼠磺基(ji)轉移(yi)酶(mei)(PST)ELISA試(shi)劑盒 ，英(ying)文名： PST ELISA Kit

RatcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit大(da)鼠Ⅱ(FⅡ)ELISA試(shi)劑盒規(gui)格(ge)：96T/48T

Rat follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit 大(da)鼠促卵(luan)泡素(su)(FSH)ELISA試(shi)劑盒

Ratalcoholdehydrogenase,ADHELISAKit 大(da)鼠乙(yi)醇脫(tuo)輕(qing)酶(mei)(ADH)ELISA試(shi)劑盒 96T/48T 進(jin)口(kou)分(fen)裝

CLIAKitforCollagenaseI(MouseCollagenaseTypeI)ELISAKit小(xiao)鼠膠原(yuan)酶(mei)I規(gui)格(ge)：48T/96T

Humanbonesialoprotein,BSPELISAKit人骨(gu)涎(xian)蛋(dan)白(BSP)ELISA試(shi)劑盒規(gui)格(ge)：96T/48T

人腦啡(fei)肽(ENK)ELISA 試(shi)劑盒 96T/48T 試(shi)劑盒 組裝(zhuang)/原(yuan)裝

小(xiao)鼠透明質酸(suan)(HA)免(mian)疫(yi)試劑(ji)盒 Mouse Hyaluronic acid,HA ELISA Kit

轉基(ji)因植物(wu)Bar基(ji)因檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒 48T

Humansolublefibrinmonomercomplex,SFMCELISA試(shi)劑盒人可(ke)溶性(xing)血(xue)纖(xian)蛋(dan)白單(dan)體(ti)復(fu)合(he)物(SFMC)ELISA試(shi)劑盒規(gui)格(ge)：96T/48T

腺固(gu)著(zhe)液(ye)(Oh固(gu)著(zhe)液(ye))50毫(hao)升

ELISAKitTPO人甲(jia)狀(zhuang)腺過氧(yang)化物(wu)酶(mei)規(gui)格(ge)：48T/96T

大(da)鼠血(xue)管內皮(pi)細胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi)受(shou)體(ti)2(VEGFR-2)ELISA試(shi)劑盒 ，英(ying)文名： VEGFR-2 ELISA Kit

人水(shui)痘帶狀(zhuang)皰(pao)疹(zhen)病毒IgG(VZV-IgG)ELISA檢(jian)測試劑(ji)盒(he)HumanVaricellazostervirusIgG,VZV-IgGELISAKit 96T/48T

大(da)鼠C型(xing)尿肽(CNP)免(mian)疫(yi)試劑(ji)盒 Rat C-type naiuretic peptide,CNP ELISA Kit

周(zhou)期(qi)素(su)B1抗(kang)體(ti)

過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei)體(ti)合(he)成因子(zi)5抗(kang)體(ti)

軟(ruan)骨相(xiang)關(guan)蛋(dan)白CRTAP抗(kang)體(ti)

NBPF5蛋(dan)白抗(kang)體(ti)

線粒體(ti)核(he)糖體(ti)蛋(dan)白S9抗(kang)體(ti)

半(ban)乳糖凝(ning)集素(su)14抗(kang)體(ti)

磷(lin)酸(suan)化(hua)丙(bing)酮酸(suan)激酶(mei)M2抗(kang)體(ti)

SW1271細胞CRMP2單克(ke)隆抗體(ti)

陽(yang)離(li)子(zi)通道相(xiang)關(guan)蛋(dan)白β亞(ya)基抗(kang)體(ti)