SW1463細胞(bao)

公司產品(pin)僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不得(de)用於臨(lin)床診斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長至覆(fu)蓋培(pei)養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮變圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞(bao)使(shi)之脫落，然(ran)後將(jiang)懸液轉(zhuan)移至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分(fen)瓶傳代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)培養箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長至覆(fu)蓋培(pei)養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮變圓(yuan)後加入(ru)培養(yang)液終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕吹打(da)細胞(bao)使(shi)之脫落，然(ran)後將(jiang)懸液轉(zhuan)移至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存(cun)管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期保(bao)存(cun)。使(shi)用程序降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

壹(yi)、商品(pin)介紹(shao)：

二(er)、細胞(bao)培養操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下細胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考，具體操(cao)作步驟以隨貨(huo)產品(pin)說明書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養基混(hun)合均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養基後吹勻。然(ran)後將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸液加入(ru)含適量(liang)培養(yang)基的(de)培養瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜（或將(jiang)細胞(bao)懸液加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培(pei)養過夜）。第二天換液並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上清(qing)，用不含(han)鈣、鎂離子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所有(you)細胞(bao)，將培養瓶置(zhi)於37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況(kuang)而定(ding)），然(ran)後在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大部分變圓(yuan)並(bing)脫落，迅速拿回操(cao)作臺，輕敲幾(ji)下培(pei)養瓶後加2-3ml培(pei)養基終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無菌離心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液後吹勻。

c、將細胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分到新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基的(de)新皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生長狀態良(liang)好(hao)時，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶為例；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培養液，裝(zhuang)入(ru)無菌離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計數(shu)。

b、根據(ju)細胞(bao)數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管位置(zhi)以便(bian)下次(ci)拿(na)取(qu)。

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶是否完好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否有漏液、渾(hun)濁等(deng)現象，若有上述(shu)現象 發(fa)生請及時和我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞(bao)說明書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態、所用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致細胞(bao)出(chu)現問題(ti)，責(ze)任由 客(ke)戶自(zi)行承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀態。因運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部分細胞(bao)由於(yu)溫(wen)度 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰亡破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀態後，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶壁將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直接混(hun)勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養(yang)基重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到新的(de)培(pei)養瓶或培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用相同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用於細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到細胞(bao)後前(qian) 3 天各拍幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照片，記(ji)錄細胞(bao)狀態，便(bian)於(yu)和(he)我司技術(shu)部溝通(tong) 交流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感細胞(bao)會(hui)出(chu)現不穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及時和我們聯(lian)系，告知(zhi)細胞(bao) 的具體情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能再(zai)用來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換用按照(zhao)說明書(shu)細胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的培(pei)養基來(lai)培養細胞(bao)。     收到細胞(bao)後第(di)壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司正在出(chu)售的產(chan)品(pin)：

RatClusterin,CLUELISAKit大鼠(shu)凝(ning)聚(ju)素(su)(CLU)ELISA試(shi)劑盒(he)規格(ge)：96T/48T

細胞(bao)乙酰脂(zhi)酶(mei)活(huo)性(xing)染(ran)色(se)試(shi)劑盒(he)50次(ci)

大鼠(shu)胞(bao)外銅(tong)鋅(xin)超氧化(hua)物(wu)歧(qi)化(hua)酶(mei)(Cu/Zn-SOD/SOD3)ELISA試(shi)劑盒(he) ，英文名： Cu/Zn-SOD/SOD3 ELISA Kit

Mouse beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 小(xiao)鼠(shu)β澱粉(fen)樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試(shi)劑盒(he)

ELISA 小(xiao)鼠(shu)Flt3(mouse Flt3) 48T/96T 進(jin)口分裝(zhuang)

ELISAKitVB6小(xiao)鼠(shu)B6規格(ge)：48T/96T

Humanbonemorphogeneticproteins，BMPsELISAKit人骨(gu)形(xing)成蛋白(BMPs)ELISA試(shi)劑盒(he)規格(ge)：96T/48T

人腦腸(chang)肽(BGP/Gehrelin)ELISA 試(shi)劑盒(he) 96T/48T 試(shi)劑盒(he) 組(zu)裝/原裝

小(xiao)鼠(shu)銅(tong)藍(lan)蛋白(CP/CER)免疫試(shi)劑盒(he) Mouse Ceruloplasmin,CP/CER ELISA Kit

轉基因植(zhi)物(wu)TE基因檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)(PCR-熒光探(tan)針(zhen)法(fa)) 48T

CLIAKitforsICAM-1ELISAKit大鼠(shu)可溶性細胞(bao)間粘附分子(zi)1規格(ge)：48T/96T

腎素化(hua)學(xue)發(fa)光法(fa)定量(liang)檢測(ce)試(shi)劑盒(he)20次(ci)

ELISAKitTHAA人甲狀腺(xian)非肽激素(su)抗(kang)體規格(ge)：48T/96T

大鼠(shu)血管內(nei)皮細胞(bao)生長因子(zi)受(shou)體2(VEGFR-2)ELISA 試(shi)劑盒(he) 96T/48T 試(shi)劑盒(he) 組(zu)裝/原裝

人細胞(bao)色素P450(CYP450)免疫試(shi)劑盒(he) Human Cytochrome P450 ELISA kit

周期素B1重組(zu)兔單克(ke)隆抗(kang)體

過氧化(hua)物(wu)酶(mei)體合成因子(zi)6抗(kang)體

軟(ruan)骨(gu)衍生(sheng)形(xing)態發(fa)生蛋白1/GDF 5抗(kang)體

NBPF6蛋白抗(kang)體

線粒體琥珀(po)酸脫氫酶(mei)D抗(kang)體

半(ban)乳糖(tang)凝(ning)集(ji)素1抗(kang)體

磷酸化(hua)丙(bing)酮(tong)酸脫氫酶(mei)α1抗(kang)體

SW1463細胞(bao)CROC4抗(kang)體

陽離(li)子通(tong)道相(xiang)關(guan)蛋白δ抗(kang)體