T3M-4細(xi)胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅(jin)供(gong)科研研究(jiu)使用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋培養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的培養液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培養

液終(zhong)止消化，再(zai)輕(qing)輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行分瓶傳(chuan)代，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培養箱中培養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋培養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的培養液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入培養液終(zhong)

止消化，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）用(yong)適量的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放置(zhi)於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜(ye)，24h 後轉入液氮(dan)中(zhong)進行長(chang)期(qi)保(bao)存。使用(yong)程序降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直接放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養操作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴中迅速搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心3 min，棄去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培養基後吹勻。然後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入含適量培養基的培養瓶中(zhong)培養過夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培養基，培養過夜(ye)）。第二天換液(ye)並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果細(xi)胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代培養。

a、棄去培養上清，用(yong)不含鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使消化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置(zhi)於(yu)37℃培養箱中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而(er)定），然後在(zai)顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速拿回操作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶後加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝入無菌(jun)離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的含8 mL培養基的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態良(liang)好(hao)時，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液，裝入(ru)無菌離心管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心4 min，棄去上(shang)清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計數。

b、根據細(xi)胞(bao)數量加(jia)入無(wu)血清細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰箱，24 h後轉入液氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置(zhi)以便下次(ci)拿取(qu)。

三(san)、培養註意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後首先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完好(hao)，培養液是否(fou)有(you)漏液(ye)、渾濁等(deng)現(xian)象，若有(you)上述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請及時和我們(men)聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞(bao)說明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相(xiang)關信息，如細(xi)胞(bao)形態、所用(yong)培養基、血清比例(li)、所需 細(xi)胞(bao)因子(zi)等，確保(bao)細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若由(you)於培養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出現(xian)問題(ti)，責任由(you) 客戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀態。因運(yun)輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破碎形成碎片，是正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒精消毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可(ke)以消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新(xin)鮮的培養基重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的培養瓶或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱中進行培養。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培養基用(yong)於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建議客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態，便於和我司技(ji)術部溝(gou)通 交流。由(you)於運(yun)輸的原因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩(wen)定的情況，請(qing)及(ji)時和我們(men)聯系，告知細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況，以便我們(men)的技術人員跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至問題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科研使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培養基 (灌液培養基) 不能(neng)再(zai)用(yong)來培養細(xi)胞(bao)，請換用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的培養基來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後第壹次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳代 。

9. 註意：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出售(shou)的產(chan)品：

細(xi)胞(bao)乙酰(xian)乙酰(xian)轉移酶(ACAT)活(huo)性(xing)比(bi)色(se)法(fa)定量檢測試(shi)劑(ji)盒20次(ci)

CLIAKitforColIVELISAKIT大鼠(shu)Ⅳ型膠原(yuan)規格(ge)：48T/96T

RatClusterofdiffereiation3,CD3ELISAKit大鼠(shu)CD3分子(zi)(CD3)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格：96T/48T

大鼠(shu)半(ban)乳(ru)糖凝(ning)集(ji)素3(Galectin3)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ，英文(wen)名(ming)： Galectin3 ELISA Kit

Mouse ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 小鼠(shu)β幹(gan)擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試(shi)劑(ji)盒

HumansolubleTumorNecrosisFactorαreceptor,sTNFαRELISA試(shi)劑(ji)盒人可(ke)溶(rong)性(xing)腫瘤壞(huai)死(si)因子(zi)α受體(ti)(sTNFαR)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格：96T/48T

ELISAKitA1c小鼠(shu)糖化血紅(hong)蛋白(bai)A1c規格(ge)：48T/96T

Humanbeta2glycoprotein，β2-GPELISAKit人β2糖蛋白(bai)(β2-GP)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格：96T/48T

人膜攻擊復(fu)合(he)物(MAC)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒 組裝(zhuang)/原裝(zhuang)

小鼠(shu)酶2(CA-2)免疫(yi)試(shi)劑(ji)盒 Mouse carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISA Kit

大鼠(shu)CXC趨化因子(zi)受體(ti)5(CXCR5)免疫(yi)試(shi)劑(ji)盒 Rat CXC-chemokine receptor 5,CXCR5 ELISA Kit

CLIAKitforSHBG(Humansexhormone-bindingglobulin)ELISAKit人性激素結合(he)球蛋白(bai)規(gui)格(ge)：48T/96T

素標(biao)記二抗(kang)(抗人;抗兔(tu);抗小鼠(shu);抗大(da)鼠(shu))100微(wei)升

ELISAKitPTH人甲狀旁腺(xian)激素規格(ge)：48T/96T

大鼠(shu)血管內(nei)皮細(xi)胞(bao)生(sheng)長因子(zi)C(VEGF-C)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒 組裝(zhuang)/原裝(zhuang)

周期(qi)素D1重(zhong)組兔(tu)單克隆(long)抗(kang)體(ti)

還原(yuan)型輔酶Ⅱ氧化酶5/腺二核(he)苷酸磷酸抗體(ti)

朊蛋白(bai)DPL抗體(ti)

NCK銜(xian)接(jie)蛋白(bai)1重(zhong)組兔(tu)單克隆(long)抗(kang)體(ti)

線粒體(ti)裂變(bian)1蛋白(bai)重(zhong)組鼠(shu)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti)

半乳(ru)糖凝(ning)集(ji)素9B抗體(ti)

磷酸化叉(cha)頭(tou)蛋白(bai)家(jia)族1(Ser319)抗體(ti)

T3M-4細(xi)胞(bao)CSRNP3蛋白(bai)抗(kang)體(ti)

氧固醇結合(he)蛋白(bai)樣(yang)1A抗(kang)體(ti)