T98G細胞

公(gong)司產(chan)品僅供科(ke)研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

壹、商品介(jie)紹(shao)：

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察，待細胞回(hui)縮變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再輕(qing)輕吹打細胞使之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱細胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察，待細胞回(hui)縮變圓後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕輕(qing)吹打細胞使之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於凍(dong)存(cun)管中；

4）先將細胞凍(dong)存(cun)管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期(qi)保存(cun)。使用程序降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇細胞：以下(xia)細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅供參考(kao)，具(ju)體操作步(bu)驟(zhou)以隨貨產(chan)品說明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水浴中迅速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻。然後(hou)將所有(you)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含適量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換液並(bing)檢查(zha)細胞密度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞密度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清，用(yong)不含鈣(gai)、鎂離子的(de)PBS潤洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化(hua)液浸潤所有(you)細胞，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞情況而定(ding)），然後(hou)在(zai)顯微鏡下(xia)觀(guan)察細胞消化(hua)情況(kuang)，若細胞大部(bu)分(fen)變圓並(bing)脫落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無(wu)菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻。

c、將細胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待細胞生長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集細胞及細胞培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清液，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計數。

b、根據(ju)細胞數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清細胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標識。將凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄凍(dong)存(cun)管位置(zhi)以便下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察細胞瓶是否(fou)完(wan)好，培(pei)養(yang)液是(shi)否(fou)有(you)漏液、渾(hun)濁等現象，若有(you)上述現象 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞說明(ming)書，了解(jie)細胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所需(xu) 細胞因子等(deng)，確(que)保細胞培(pei)養(yang)條件壹致，若由於培(pei)養(yang)條件不壹致而導(dao)致細胞出現(xian)問題，責(ze)任由 客戶(hu)自行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶表面(mian)，顯微鏡下(xia)觀(guan)察細胞狀態。因(yin)運輸(shu)問題，部(bu)分(fen)細胞由於溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰(peng)亡破碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正(zheng)常現(xian)象。觀察好細胞狀態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可(ke)以消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直接混(hun)勻(yun)收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後(hou)前(qian) 3 天各拍幾張(zhang)細胞照片，記錄(lu)細胞狀態，便(bian)於和我司技術部(bu)溝通(tong) 交(jiao)流。由於運輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感細胞會(hui)出現(xian)不穩定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們聯(lian)系(xi)，告(gao)知細胞 的(de)具(ju)體情況，以便我們的(de)技術人員跟(gen)蹤回(hui)訪直(zhi)至問題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅供科(ke)研使用(yong)。

8. 備註：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請換用(yong)按(an)照說(shuo)明(ming)書細胞培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收到(dao)細胞後(hou)第(di)壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出售的(de)產(chan)品：

CLIAKitforISR-Beta(MouseInsulieceptorBeta)ELISAKit小(xiao)鼠(shu)胰島(dao)素受(shou)體β規(gui)格(ge)：48T/96T

ELISA 小(xiao)鼠(shu)纖維連(lian)結蛋(dan)白(bai)(mous FN) 48T/96T 進(jin)口(kou)分(fen)裝

通用型丁(ding)酰酯酶(mei)活(huo)性(xing)比(bi)色法定(ding)量(liang)檢測(ce)試劑(ji)盒20次(ci)

AIL-R1大鼠(shu)壞(huai)死因(yin)子(zi)相(xiang)關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體1規(gui)格(ge)：48T/96T

大鼠(shu)半(ban)乳(ru)糖-1-0酸(suan)尿(niao)苷酰轉移(yi)酶(mei)(GALT)ELISA試劑(ji)盒 ，英文名： GALT ELISA Kit

牛特定(ding)基(ji)因(yin)序列(Bovine)檢測(ce)試劑(ji)盒(PCR-熒光探針(zhen)法) 48T

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISA試劑(ji)盒人(ren)可(ke)溶性(xing)血(xue)管內(nei)皮生長(chang)因(yin)子受(shou)體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

ELISAKitgp130小(xiao)鼠(shu)糖蛋(dan)白130規(gui)格(ge)：48T/96T

Humanbetacellulin,BTCELISAKit人β細胞素(BTC)ELISA試劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

人膜輔蛋(dan)白(bai)(MCP/CD46)ELISA 試劑(ji)盒 96T/48T 試劑(ji)盒 組裝/原裝

人氧化(hua)酶(mei)亞基(ji)5A,線粒體(COX5A)免疫(yi)試劑(ji)盒 Human Cytochrome c oxidase subunit 5A,mitochondrial(COX5A)ELISA kit

還(hai)原(yuan)酶(mei)測(ce)試盒(he) 可(ke)見分(fen)光光度(du)法 50管/24樣

RatomeinELISA試劑(ji)盒大(da)鼠(shu)網(wang)膜素(omein)ELISA試劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

HumanHya]uronatebindingprotein,HABPELISA試劑(ji)盒人(ren)透(tou)明(ming)質(zhi)酸(suan)結合蛋白(bai)(HABP)ELISA試劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

humanmajorvaultprotein,MVPELISAKit人主(zhu)要(yao)穹(qiong)窿(long)蛋(dan)白(MVP)ELISA試劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

周期(qi)素D2抗(kang)體

海(hai)馬(ma)豐(feng)富基(ji)因(yin)轉錄蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體

三碘甲狀腺(xian)素T3抗(kang)體

NCK銜接蛋(dan)白2抗(kang)體

線粒體裂變調節(jie)蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體

半(ban)乳(ru)糖凝集素9C抗(kang)體

磷酸(suan)化(hua)叉頭(tou)蛋白(bai)家族1抗(kang)體

T98G細胞CTAGE6蛋白(bai)抗(kang)體

氧固醇(chun)結(jie)合蛋白(bai)樣2抗(kang)體