TALL-1細胞(bao)

公司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床診斷(duan)！

壹(yi)、商品介(jie)紹(shao)：

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯微鏡下觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止消化，再(zai)輕輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)培(pei)養(yang)箱中培(pei)養；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯微鏡下觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終(zhong)

止消化，輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍存(cun)管中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存(cun)管放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉入(ru)液氮中進(jin)行長(chang)期(qi)保存(cun)。使用(yong)程序(xu)降溫盒(he)可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水浴(yu)中迅速搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混合均勻(yun)。在1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含適(shi)量培(pei)養基的培養瓶(ping)中培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基，培養過夜）。第(di)二(er)天換液(ye)並(bing)檢查(zha)細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置於(yu)37℃培養箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況(kuang)而定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡下觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落，迅速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止消化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的(de)含8 mL培養基的新皿中或(huo)者瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據細胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放(fang)入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管位(wei)置以便下次(ci)拿(na)取(qu)。

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到細胞(bao)後(hou)首先觀察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔細閱讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基、血清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致(zhi)，若由於(yu)培(pei)養條件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出(chu)現(xian)問題(ti)，責任(ren)由 客(ke)戶(hu)自行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微鏡下觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問題(ti)，部(bu)分細胞(bao)由於(yu)溫度 變化及(ji)劇(ju)烈碰亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培(pei)養基重懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種到新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同(tong)條件的培養基用(yong)於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收到細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於和我(wo)司技術部溝通(tong) 交流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情況，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系，告知細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況，以便我(wo)們(men)的技術人員跟蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研(yan)使用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來培養(yang)細胞(bao)，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新配制(zhi)的培養(yang)基來培養(yang)細胞(bao)。     收到細胞(bao)後(hou)第(di)壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司正(zheng)在(zai)出售(shou)的產(chan)品：

HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 倉(cang)鼠(shu)核(he)因(yin)子(zi)κB受(shou)體(ti)活化因(yin)子(zi)配基(RANKL)ELISA試劑盒(he) 96T/48T 進口(kou)分(fen)裝

Rat growth hormone releasing hormone (GRH) ELISA Kit 大鼠(shu)促(cu)生(sheng)長(chang)激(ji)素釋放(fang)激(ji)素(GRH)ELISA試劑盒(he)

CLIAKitforColIV(MouseCollageypeIV)ELISAKIT小鼠(shu)Ⅳ型(xing)膠(jiao)原(yuan)規格：48T/96T

細胞(bao)乙(yi)酰(xian)乙(yi)酰(xian)轉移酶(ACAT)活性熒(ying)光定(ding)量(liang)檢測(ce)試(shi)劑盒(he)20次(ci)

RatClaracellprotein,CC16ELISAKit大鼠(shu)克拉(la)拉(la)細胞(bao)蛋(dan)白(bai)(CC16)ELISA試劑盒(he)規格：96T/48T

小鼠(shu)酶1(CA-1)免疫(yi)試(shi)劑盒(he) Mouse carbonic anhydrase 1,CA-1 ELISA Kit

牛特定(ding)基因序列(lie)(Bovine)檢測(ce)試(shi)劑盒(he) 48T

HumanSomatostatin,SSELISA試劑盒(he)人(ren)(SS)ELISA試劑盒(he)規格：96T/48T

ELISAKitCA-2小鼠(shu)酶2規格：48T/96T

HumanBence-Jonesprotein,BJPELISAKit人本周(zhou)蛋(dan)白(bai)(BJP)ELISA試劑盒(he)規格：96T/48T

大鼠(shu)血(xue)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)B(VEGF-B)ELISA試劑盒(he) ，英文(wen)名(ming)： VEGF-B ELISA Kit

人白喉抗體(ti)(DiphtheriaAb)ELISA檢測(ce)試(shi)劑盒(he)HumanDiphtheriaaibodyELISAKit 96T/48T

大鼠(shu)CXC趨(qu)化因(yin)子(zi)受(shou)體(ti)4(CXCR4)免疫(yi)試(shi)劑盒(he) Rat CXC-chemokine receptor 4,CXCR4 ELISA Kit

CLIAKitforSHBGELISAKit大鼠(shu)性(xing)激(ji)素(su)結(jie)合球(qiu)蛋(dan)白(bai)規格：48T/96T

素標記二(er)抗DAB顯色試劑盒(he)10次(ci)

周(zhou)期(qi)素(su)D3抗體(ti)

海馬(ma)鈣(gai)蛋(dan)白(bai)樣4多肽(tai)抗(kang)體(ti)

三號染(ran)色(se)體(ti)開放閱讀(du)框抗體(ti)

ND4L抗體(ti)

線(xian)粒(li)體(ti)裂變因(yin)子(zi)MFF抗體(ti)

半乳糖凝集素9抗體(ti)

磷(lin)酸(suan)化叉頭(tou)蛋(dan)白(bai)家族(zu)抗(kang)體(ti)

TALL-1細胞(bao)CTBS蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

氧(yang)固(gu)醇(chun)結(jie)合蛋(dan)白(bai)樣3抗(kang)體(ti)