UKE-1(GM23245)細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅供科(ke)研研究(jiu)使用、不得用於臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

壹(yi)、商(shang)品介紹：

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察，待細胞(bao)回縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液終止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹打細胞(bao)使之脫(tuo)落，然(ran)後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱細胞(bao)用 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)培養箱中(zhong)培(pei)養；

2、細胞(bao)凍存：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察，待細胞(bao)回縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液終

止消(xiao)化(hua)，輕輕吹打細胞(bao)使之脫(tuo)落，然(ran)後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並放置(zhi)於凍存管中；

4）先將細胞(bao)凍存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中(zhong)進行長(chang)期(qi)保存。使用程序降(jiang)溫盒可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養操(cao)作

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以下細胞(bao)培養凍存處理(li)僅供參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以(yi)隨貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細胞(bao)懸液的凍(dong)存管在 37℃水浴中(zhong)迅速搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄去上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹勻(yun)。然後將所有細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含適(shi)量(liang)培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液並檢查(zha)細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行傳代(dai)培(pei)養。

a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中(zhong)，使(shi)消化液浸(jin)潤(run)所有細胞(bao)，將培(pei)養瓶置(zhi)於37℃培養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而定），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞(bao)消化情(qing)況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速拿回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕敲幾下培養瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養基終止消(xiao)化(hua)。輕輕打勻(yun)後裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液後吹勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸液按1:2比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養基的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於培養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍存：待細胞(bao)生長(chang)狀態良好時(shi)，可(ke)進行細胞(bao)凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培養液，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄去上清液，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行細胞(bao)計數(shu)。

b、根據(ju)細胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞(bao)凍存液，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支凍存管凍存1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍存管做好標(biao)識。將凍(dong)存管放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄凍存管位(wei)置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿(na)取。

三、培(pei)養註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察細胞(bao)瓶是否完好，培(pei)養液是否有漏液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述現(xian)象(xiang) 發(fa)生請(qing)及時(shi)和我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細胞(bao)相關信(xin)息，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所用培養基、血清比(bi)例(li)、所需 細胞(bao)因子等，確保(bao)細胞(bao)培養條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於培養條件(jian)不壹致(zhi)而導(dao)致細胞(bao)出現問題(ti)，責任由 客(ke)戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞(bao)狀態。因運(yun)輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於溫度 變化及劇(ju)烈碰(peng)亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是正常(chang)現象(xiang)。觀察好細胞(bao)狀態後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸浮(fu)細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養基重(zhong)懸 細胞(bao)，並接(jie)種到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶或(huo)培養皿中(zhong)，置(zhi)於培養箱中(zhong)進行培(pei)養。

5. 請(qing)客戶(hu)用相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養基用於細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄細胞(bao)狀態，便於和我司(si)技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的原因，個(ge)別敏(min)感細胞(bao)會出現不穩定的情(qing)況，請(qing)及時(shi)和我們聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以便(bian)我們的(de)技術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪直至問題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅供科(ke)研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的培(pei)養基 (灌(guan)液培養基) 不能(neng)再(zai)用來培(pei)養細胞(bao)，請(qing)換用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培 養條件(jian)新(xin)配制(zhi)的培(pei)養基來培(pei)養細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第(di)壹次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司(si)正(zheng)在出售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

Mouse macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 小(xiao)鼠(shu)巨噬細胞(bao)炎(yan)性蛋(dan)白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒(he)

大(da)鼠(shu)白細胞(bao)介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒(he) ，英文名： IL-1B ELISA Kit

MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 小(xiao)鼠(shu)溴(xiu)脫(tuo)氧(yang)核苷(BrdU)ELISA試劑盒(he) 96T/48T 進口(kou)分(fen)裝

CLIAKitforHumanomeinELISAKit人網(wang)膜素(su)規格：48T/96T

同位(wei)素(su)-蛋(dan)白結(jie)合(he)凝膠(jiao)電(dian)泳(yong)定量(liang)分(fen)析(xi)(McKay)試劑盒(he)20次

人免(mian)疫(yi)核糖(Irna)ELISA 試劑盒(he) 96T/48T 試劑盒(he) 組裝/原裝

小(xiao)鼠(shu)水(shui)通(tong)道蛋(dan)白1(AQP-1)免(mian)疫(yi)試劑盒(he) Mouse Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit

植物源(yuan)性(xing)成(cheng)分(fen)(RBCL)檢測試劑盒(he)(PCR-熒(ying)光(guang)探針(zhen)法(fa)) 48T

Humansulfatide,SFTELISA試劑盒(he)人(ren)腦苷酯(SFT)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

ELISAKitSS小(xiao)鼠(shu)規(gui)格(ge)：48T/96T

ELISAKitPV-IgG人脊髓灰質炎(yan)病(bing)毒IgG規格(ge)：48T/96T

大(da)鼠(shu)血管緊張(zhang)素Ⅱ受(shou)體(ti)1(AT1R)ELISA試劑盒(he) ，英文名： AT1R ELISA Kit

人腺病(bing)毒抗原(ADV-Ag)ELISA檢測試劑盒(he)HumanAdenovirusAigen,ADV-AgELISAKit 96T/48T

大(da)鼠(shu)CDP-甘(gan)油二(er)酯--甘(gan)油-3-0酸30脂(zhi)酰轉(zhuan)移(yi)酶(mei),線粒(li)體(ti)(PGS1)免(mian)疫(yi)試劑盒(he) Rat PGS1 ELISA kit

CLIAKitforsE-selectinELISAKit大(da)鼠(shu)可(ke)溶性(xing)E選擇(ze)素(su)規(gui)格(ge)：48T/96T

周(zhou)期(qi)素依(yi)賴性激(ji)酶(mei)1抗體(ti)

含普(pu)列克底物蛋(dan)白家族A成員(yuan)1抗體(ti)

三磷(lin)酸腺苷受(shou)體(ti)P2X5抗體(ti)

NDUFS5蛋(dan)白抗體(ti)

線粒(li)體(ti)外膜受(shou)體(ti)Tom20抗體(ti)

胞(bao)漿動力蛋(dan)白中間鏈2抗體(ti)

磷(lin)酸化蛋(dan)白激酶AKT3抗體(ti)

UKE-1(GM23245)細胞(bao)Cy5標(biao)記(ji)的腱(jian)調(tiao)蛋(dan)白/軟(ruan)骨調(tiao)節素樣1蛋(dan)白抗體(ti)

液泡(pao)蛋(dan)白分選蛋(dan)白13B抗體(ti)