UM-UC-14細胞(bao)

公(gong)司(si)產品(pin)僅供科(ke)研研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷！

壹、商(shang)品(pin)介紹：

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒(dao)置顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化，再(zai)輕(qing)輕吹打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比例進(jin)行分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒(dao)置顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置於(yu)凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其移入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中進(jin)行長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用程序(xu)降(jiang)溫(wen)盒(he)可直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處(chu)理僅供參考(kao)，具體操作(zuo)步(bu)驟以隨貨產品(pin)說明書(shu)為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿中，加入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不含鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸潤所(suo)有細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若細胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中或(huo)者瓶中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶為例；a、收(shou)集細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄盡(jin)PBS，進行細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量加入(ru)無血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好標識。將凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管(guan)位置以便(bian)下次拿(na)取(qu)。

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏液、渾濁(zhuo)等(deng)現象，若有(you)上述(shu)現象 發生請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀細胞(bao)說明書(shu)，了解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血清(qing)比例、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致，若(ruo)由於(yu)培(pei)養(yang)條件不(bu)壹致而(er)導(dao)致細胞(bao)出(chu)現問題，責任由 客(ke)戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問題，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎(sui)形成(cheng)碎片，是(shi)正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種到新的(de)培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收(shou)到細胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出現不穩定(ding)的(de)情(qing)況，請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系，告知細胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況，以便(bian)我們的技術(shu)人(ren)員跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科(ke)研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換(huan)用(yong)按(an)照說明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第(di)壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產品(pin)：

大(da)鼠白(bai)細胞(bao)介素1α(IL-1α/IL-1F1)ELISA試(shi)劑盒(he) ，英(ying)文(wen)名： IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit

ELISAKitsVCAM-1大(da)鼠可溶(rong)性血管(guan)細胞(bao)粘附(fu)分(fen)子1規格：48T/96T

Ricinus communis agglinin (FAA) ELISA Kit 蓖(bi)麻(ma)凝集素(FAA)ELISA試(shi)劑盒(he)

MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit 小鼠內臟(zang)脂肪(fang)特異性絲(si)抑(yi)制劑(vaspin)ELISA試(shi)劑盒(he) 96T/48T 進(jin)口分(fen)裝

CLIAKitforHumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit人(ren)核(he)基質(zhi)蛋白22規格：48T/96T

Humanaialnaiureticfactor，ANFELISAKit人(ren)心納素(ANF)ELISA試(shi)劑盒(he)規格：96T/48T

人(ren)免(mian)疫反應性(xing)生長(chang)激素(irGH)ELISA 試(shi)劑盒(he) 96T/48T 試(shi)劑盒(he) 組(zu)裝/原(yuan)裝

小鼠水通(tong)道蛋白0(AQP-0)免(mian)疫試(shi)劑盒(he) Mouse Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit

植(zhi)物源性(xing)成(cheng)分(fen)(RBCL)檢(jian)測試劑盒(he) 48T

HumanSuperOxidaseDimase,SODELISA試(shi)劑盒(he)人(ren)超氧化(hua)物(wu)歧(qi)化(hua)酶(SOD)ELISA試(shi)劑盒(he)規格：96T/48T

素-蛋白結(jie)合凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)(McKay)試(shi)劑盒(he)10次(ci)

ELISAKitCSF人(ren)集落(luo)刺激因(yin)子規格：48T/96T

大(da)鼠血管(guan)緊張(zhang)素Ⅱ受體(ti)1(AG1)ELISA試(shi)劑盒(he) ，英(ying)文(wen)名： AG1 ELISA Kit

Fish three iodothyronine (T3) ELISA Kit 魚類(lei)狀(zhuang)腺原(yuan)(T3)ELISA試(shi)劑盒(he)

Mousesolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 小鼠白介素1可溶(rong)性受體(ti)Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試(shi)劑盒(he) 96T/48T 進(jin)口分(fen)裝

周(zhou)期(qi)素依賴(lai)性激酶1重組兔(tu)單克(ke)隆抗體

含(han)普列克(ke)底物(wu)蛋白家(jia)族A成(cheng)員3抗(kang)體

三(san)磷酸(suan)腺苷(gan)受體(ti)P2X6抗(kang)體

NDUFS6蛋白抗(kang)體(ti)

線粒體(ti)型共(gong)濟失調(tiao)蛋白抗(kang)體(ti)

胞(bao)漿(jiang)鈣(gai)獨立(li)磷脂酶A2抗(kang)體

磷(lin)酸(suan)化蛋白激酶AKT底物(wu)1抗(kang)體

UM-UC-14細胞(bao)Cy5標記(ji)的(de)網(wang)格(ge)蛋白重鏈(lian)抗體(ti)

液泡蛋白分(fen)選蛋白13D抗(kang)體(ti)