Z-138細(xi)胞(bao)

公司產品僅供科研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨床(chuang)診斷！

壹(yi)、商品介紹：

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按 1:2 比例進行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入培養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化(hua)，輕輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管中(zhong)；

4）先將細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮中進行(xing)長期保(bao)存。使用(yong)程序降(jiang)溫(wen)盒(he)可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅供參(can)考(kao)，具體(ti)操(cao)作步驟(zhou)以隨(sui)貨產品說明(ming)書為(wei)主。將含有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下離(li)心3 min，棄去上清液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入含適量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿中，加入約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第二(er)天換液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然後在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良好(hao)時，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心4 min，棄去上清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根據細(xi)胞(bao)數量(liang)加入無(wu)血(xue)清細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支凍存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍存管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管位(wei)置(zhi)以便下次拿取(qu)。

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁等現象，若(ruo)有(you)上述現象 發生(sheng)請(qing)及時和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責任由(you) 客戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變化(hua)及劇烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現象。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以消化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相(xiang)同條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技術(shu)部(bu)溝通 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會出現不(bu)穩(wen)定的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時和(he)我(wo)們聯系，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們的(de)技術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供科研(yan)使用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公司正(zheng)在出售的(de)產品：

ELISA 小(xiao)鼠(shu)Ghrelin(mouse Ghrelin) 48T/96T 進口分裝(zhuang)

Mouse beta 2 glycoprotein aibody IgA/G/M (1 beta 2-GP1 IgA/G/M) ELISA Kit 小(xiao)鼠(shu)β2糖蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體(ti)IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

CLIAKitforIRAP(HumanICEprotease-activatingfactor)ELISAKit人ICE激活因子規(gui)格：48T/96T

通用(yong)型(xing)非(fei)變性裂(lie)解(jie)液(ye)適合各種細(xi)胞(bao)native蛋(dan)白(bai)

ELISAKitNE大(da)鼠(shu)中(zhong)性粒細(xi)胞(bao)彈(dan)性(xing)規(gui)格：48T/96T

小(xiao)鼠(shu)生(sheng)長激素(su)(GH)免疫試(shi)劑(ji)盒(he) Mouse growth hormone,GH ELISA KIT

廣(guang)州管圓(yuan)線(xian)蟲(chong)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)(熒(ying)光(guang)PCR法(fa))

Huma-cellspecificGTPase,TgtpELISA試(shi)劑(ji)盒(he)人T細(xi)胞(bao)特異性(xing)鳥苷(gan)三0酸(suan)酶(mei)(Tgtp)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

ELISAKitNP-Y小(xiao)鼠(shu)神(shen)經肽Y規(gui)格：48T/96T

HumanArachidonicAcid,AAELISAKit人花生四(si)烯酸(suan)(AA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)規(gui)格：96T/48T

大(da)鼠(shu)血(xue)管活性腸(chang)肽(tai)(VIP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ，英(ying)文(wen)名(ming)： VIP ELISA Kit

人百(bai)日咳毒素(su)(PT)ELISA檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)HumanPeussioxin,PTELISAKit 96T/48T

大(da)鼠(shu)CD34分子(CD34)免疫試(shi)劑(ji)盒(he) Rat cluster of differeiation 34,CD34 ELISA Kit

CLIAKitforSDPR(humanserumdeprivatioesponse)ELISAKit人血(xue)清剝奪(duo)反(fan)應(ying)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)規(gui)格：48T/96T

樣品檸檬(meng)酸(suan)比色(se)法定量(liang)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)20次

周(zhou)期(qi)素(su)依(yi)賴(lai)性(xing)激酶8重(zhong)組兔單(dan)克隆(long)抗體(ti)

核(he)RNA結(jie)合蛋(dan)白(bai)P54抗(kang)體(ti)

三(san)肽(tai)基(ji)肽酶2抗(kang)體(ti)

NFKB激活蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

腺(xian)苷(gan)A1A受(shou)體(ti)抗(kang)體(ti)

胞(bao)膜間內(nei)質網(wang)調節蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體(ti)

磷(lin)酸(suan)化(hua)蛋(dan)白(bai)激酶Cη抗(kang)體(ti)

Z-138細(xi)胞(bao)C型(xing)凝(ning)集素(su)結構(gou)域家(jia)族(zu)16成員(yuan)A抗(kang)體(ti)

液(ye)泡蛋(dan)白(bai)分選受體(ti)SORCS3抗(kang)體(ti)