OV-31細胞(bao)

公司產(chan)品僅(jin)供科研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷！

壹(yi)、商品介(jie)紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮(suo)變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱中培(pei)養；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮(suo)變圓後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入液氮(dan)中進(jin)行長(chang)期(qi)保(bao)存。使(shi)用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟以隨(sui)貨產品說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基混合均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如果細(xi)胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄去培(pei)養上(shang)清，用不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置於37℃培(pei)養箱中消(xiao)化1-2 min（視細胞(bao)情況(kuang)而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若細胞(bao)大部(bu)分(fen)變圓並(bing)脫落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中，置於培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良(liang)好時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞(bao)凍(dong)存液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液氮(dan)灌儲(chu)存。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置以便(bian)下(xia)次拿取(qu)。

公司正(zheng)在出(chu)售的(de)產(chan)品：

ELISAKitPF-4/CXCL4血小(xiao)板(ban)因子4規格：48T/96T

通用型HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性(xing)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)20次

大鼠促(cu)甲狀腺激素(TSH)ELISA 試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he) 組(zu)裝(zhuang)/原裝(zhuang)

人輕(qing)鏈lambda(λ-IgLC)免疫(yi)試(shi)劑盒(he) Human lambda immunoglobulin light chain,λ-IgLC ELISA Kit

MouseoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit小(xiao)鼠肌(ji)鈣蛋(dan)白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

ELISAKitapo-B100小(xiao)鼠載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白B100規格：48T/96T

Humancommonacelymphocyticleukaemiaaigen,CALLAELISAKit人普(pu)通急性(xing)淋巴(ba)細(xi)胞(bao)白血(xue)病(bing)抗(kang)原(CALLA)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

人乳(ru)酸脫氫(qing)酶(mei)(LDH) ELISA 試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he) 組(zu)裝(zhuang)/原裝(zhuang)

小(xiao)鼠胰(yi)α(AMY2A)免疫(yi)試(shi)劑盒(he) Mouse pancreatic alpha amylase,AMY2A ELISA kit

登(deng)革熱病毒通用型(DFV-U)檢測試劑(ji)盒(he)(PCR-熒光(guang)探(tan)針(zhen)法) 48T

CLIAKitforHumanCoronavirusesIgGELISAkit人規格：48T/96T

細胞(bao)b-葡糖(tang)苷酸酶(mei)活(huo)性(xing)染(ran)色(se)試(shi)劑(ji)盒(he)50次

ELISAKitOPGL大鼠骨保(bao)護素(su)配體(ti)規格：48T/96T

大鼠氧(yang)鯊(sha)烯(xi)環化酶(mei)(OSC)ELISA試劑(ji)盒(he) ，英(ying)文名(ming)： OSC ELISA Kit

Mouse gelsolin (Gelsolin) ELISA Kit 小(xiao)鼠凝(ning)溶膠蛋(dan)白(Gelsolin)ELISA試劑(ji)盒(he)

腫瘤/睪丸抗原62抗體(ti)

谷甘(gan)肽(tai)還原(yuan)酶(mei)抗(kang)體(ti)

溶質載(zai)體(ti)家族(zu)蛋(dan)白13成員A5抗體(ti)

MFSD5蛋(dan)白抗體(ti)

纖連蛋(dan)白7抗體(ti)

白介(jie)素(su)-1受體(ti)拮(jie)抗(kang)劑抗體(ti)

磷酸化Ephrin B抗體(ti)

OV-31細(xi)胞(bao)CD350抗(kang)體(ti)

血(xue)紅(hong)蛋(dan)白theta亞(ya)型1抗(kang)體(ti)

三(san)、培(pei)養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到細胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完好，培(pei)養液是(shi)否有漏(lou)液、渾濁等(deng)現象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請及時和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細胞(bao)說明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相關信息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態(tai)、所用(yong)培(pei)養基、血(xue)清比(bi)例(li)、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因子等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現問題(ti)，責任(ren)由(you) 客戶自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變化及劇烈(lie)碰亡(wang)破碎形(xing)成碎片(pian)，是(shi)正常現(xian)象。觀(guan)察(cha)好細胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養箱放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻(yun)收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或培(pei)養皿中，置於培(pei)養箱中進行(xing)培(pei)養。

5. 請客戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養基用(yong)於細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議客戶收到(dao)細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍幾張細胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司技術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸的(de)原因，個別敏感細胞(bao)會出(chu)現不穩定的(de)情況(kuang)，請及時和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具體(ti)情況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的(de)技術(shu)人員跟蹤(zong)回訪直(zhi)至問(wen)題解決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供科研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培(pei)養基 (灌液培(pei)養基) 不(bu)能再用來培(pei)養細胞(bao)，請換用按(an)照說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的培(pei)養基來(lai)培(pei)養細胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。