BAR基(ji)因核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)（PCR-熒光(guang)探(tan)針法(fa)）

產品特點(dian)：
◇高特異性：與其(qi)他病毒無(wu)交叉(cha)反應，無(wu)非(fei)特異性擴增(zeng)；
◇高靈敏度(du)：檢(jian)測靈(ling)敏度(du)可達10~100拷貝(bei)；
◇操(cao)作(zuo)簡便(bian)：該(gai)系(xi)列(lie)所(suo)有(you)試(shi)劑均(jun)采用相同(tong)的體(ti)系(xi)和(he)條件(jian)，可同(tong)時(shi)進行多(duo)個(ge)檢(jian)測；
◇高通(tong)量(liang)：多(duo)種雙重PCR檢(jian)測以及(ji)三重PCR檢(jian)測試(shi)劑盒(he)。

訂(ding)購(gou)信息：
 產品名(ming)稱：BAR基因核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)（PCR-熒光(guang)探(tan)針法(fa)）
規(gui)格：48T  0.1PCR管
編號：BH-P97057
分類(lei)：PCR-熒光(guang)探(tan)針法(fa)
儲(chu)存(cun)條件(jian)：-20℃避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)，避(bi)免反復(fu)凍融(rong)。
運輸：低(di)溫、避(bi)光(guang)，快遞(di)免費送(song)貨上(shang)門(men)。

準備物(wu)品：
清(qing)理(li)液(ye)（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色(se)液(ye)（t B）                                   微升
稀釋液(ye)（C）                                   毫(hao)升
溶(rong)解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升
產(chan)品說明書(shu)                                   1份(fen)
使(shi)用及(ji)效果(guo)：
PCR反應特點(dian)
(1) 特異性強(qiang)
PCR反應的(de)特異性決(jue)定(ding)因素(su)為(wei)：
①引物與模(mo)板(ban)DNA特異正(zheng)確(que)的結(jie)合(he)；
②堿基(ji)配對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚合酶(mei)合成反應的(de)忠實(shi)性；
④靶(ba)基因的特異性與保(bao)守(shou)性。
其中(zhong)引物(wu)與模(mo)板(ban)的正(zheng)確(que)結(jie)合(he)是關鍵(jian)。引物(wu)與模(mo)板(ban)的結(jie)合(he)及(ji)引物(wu)鏈的延(yan)伸(shen)是遵循(xun)堿基(ji)配對(dui)原(yuan)則的。聚合酶(mei)合成反應的(de)忠實(shi)性及(ji)Taq DNA聚合酶(mei)耐高(gao)溫性，使(shi)反應中(zhong)模板(ban)與引(yin)物(wu)的結(jie)合(he)(復(fu)性)可以在(zai)較高(gao)的溫(wen)度(du)下(xia)進行，結(jie)合(he)的(de)特異性大(da)大(da)增(zeng)加，被(bei)擴增(zeng)的靶(ba)基因片段也(ye)就能(neng)保(bao)持(chi)很(hen)高的(de)正確(que)度(du)。再通(tong)過(guo)選擇(ze)特異性和(he)保(bao)守(shou)性高(gao)的(de)靶(ba)基因區，其特異性程(cheng)度(du)就更高。
(2) 靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)
PCR產物的生(sheng)成量(liang)是以指(zhi)數方(fang)式增(zeng)加的(de)，能(neng)將(jiang)皮克(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的起始待(dai)測模(mo)板(ban)擴增(zeng)到(dao)微克(ug=10-6g)水(shui)平。能(neng)從(cong)100萬(wan)個(ge)細(xi)胞(bao)中(zhong)檢(jian)出壹(yi)個(ge)靶(ba)細(xi)胞(bao)；在(zai)病毒的(de)檢(jian)測中(zhong)，PCR的靈(ling)敏度(du)可達3個(ge)RFU(空斑形成單位)；在細(xi)菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小檢(jian)出率(lv)為(wei)3個(ge)細(xi)菌(jun)。
(3) 簡便(bian)、快速(su)
PCR反應用(yong)耐(nai)高溫的(de)Taq DNA聚合酶(mei)，壹(yi)次(ci)性地(di)將反應液(ye)加好後，即在(zai)DNA擴增(zeng)液(ye)和(he)水(shui)浴鍋上進行變(bian)性-退(tui)火-延(yan)伸(shen)反應，壹(yi)般(ban)在2～4 小(xiao)時(shi)完(wan)成擴增(zeng)反應。擴增(zeng)產物(wu)壹(yi)般(ban)用電泳分析(xi)，不(bu)壹(yi)定(ding)要(yao)用(yong)同(tong)位素(su)，無(wu)放(fang)射(she)性汙染(ran)、易推廣。
(4) 對(dui)標(biao)本(ben)的(de)純(chun)度(du)要(yao)求低
不(bu)需要(yao)分離(li)病毒或(huo)細(xi)菌(jun)及(ji)培養(yang)細(xi)胞(bao)，DNA 粗(cu)制品及(ji)總RNA均可作(zuo)為(wei)擴增(zeng)模板(ban)。可直接用臨床標本(ben)如血液(ye)、體(ti)腔液(ye)、洗(xi)嗽液(ye)、毛(mao)發、細(xi)胞(bao)、活PCR技術概(gai)論。

檢(jian)測步(bu)驟：
壹(yi)、 試劑的(de)準備
從試(shi)劑盒(he)中(zhong)取(qu)出(chu)熒光(guang)PCR反應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融(rong)化(hua)並(bing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)後(hou)，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設(she)所(suo)需要(yao)的PCR反應管管數(shu)為(wei)N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1管陰性對(dui)照(zhao)+1管陽(yang)性對(dui)照(zhao))，每(mei)個(ge)測(ce)試反應體(ti)系(xi)配制如下(xia)表(biao)：
試劑 每(mei)個(ge)反應加入(ru)的量(liang) N個(ge)反應加入(ru)的量(liang)
熒光(guang)PCR反應液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好各試劑的(de)使(shi)用量(liang)，加入(ru)壹(yi)適(shi)當體積潔凈離(li)心(xin)管中(zhong)，充分(fen)混(hun)勻(yun)，10000rpm離心(xin)10s，向設(she)定(ding)的(de)N個(ge)PCR反應管中(zhong)分別加入(ru)15μL熒光(guang)PCR反應液(ye)，向(xiang)每(mei)管中(zhong)加入(ru)處理(li)後樣(yang)品或陰性對(dui)照(zhao)(NTC)和(he)陽(yang)性對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離(li)心(xin)10秒。
7.2 qPCR反應條件(jian)
將(jiang)各反應管放(fang)入(ru)定(ding)量(liang)PCR儀器(qi)的(de)反應槽(cao)內。
循(xun)環條件(jian):
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴增(zeng) 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸(shen)時(shi)收(shou)集熒光(guang)信號。報(bao)告基(ji)團：設(she)置(zhi)為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基(ji)團：NONE，請勿(wu)選(xuan)擇(ze)ROX參(can)比(bi)熒光(guang)。
CM-R042大(da)鼠直腸平滑肌(ji)細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji)100mL肯特肽抗(kang)體Anti-Kentsin>95%,BR

SGC7901細(xi)胞(bao)，低(di)分化胃(wei)癌(ai)細(xi)胞(bao) 轉染(ran)了tk基(ji)因的SW038-C2細(xi)胞(bao),SW038-C2-tk細(xi)胞(bao) 長尾(wei)綠(lv)猴(hou)腎細(xi)胞(bao);4647心(xin)房(fang)利鈉肽（1-28）,大(da)鼠Atrial Natriuretic Peptide (1-28),rat>95%,BR

COS-1(非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴(hou)SV40轉化(hua)的(de)腎細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2心(xin)房(fang)利鈉肽（126-149）Atrial Natriuretic Peptide (126-149) (rat)>95%,BR

CCL1 Others Human  CCL1 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 心(xin)房(fang)利鈉肽（126-150），大(da)鼠Atrial Natriuretic Peptide (126-150) (rat)>95%,BR

腎癌(ai)Wilms細(xi)胞(bao);G401心(xin)鈉素(su)Ⅰ，大(da)鼠Atriopeptin I (rat)>95%,BR
EPHA2 Others Human  EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 鹽酸(suan)美(mei)利曲(qu)辛(xin)（）含量(liang)測(ce)定(ding)Melitracen

JEC, 內膜(mo)腺癌細(xi)胞(bao)系(xi)咪(mi)唑(zuo)斯汀(ting)（）HPLC法(fa)含量(liang)測(ce)定(ding)Mizolastine

mRTEC, 小(xiao)鼠腎小(xiao)管上(shang)皮細(xi)胞(bao) 小鼠胰腺癌beta細(xi)胞(bao)，Beta-TC-6細(xi)胞(bao) EB (NBL-4)(牛胚氣(qi)管細(xi)胞(bao))地(di)（）UV法含量(liang)測(ce)定(ding)Desloratadine

紅系(xi)白(bai)血病細(xi)胞(bao);TF-1糠酸莫(mo)米（）鑒(jian)別Mometasone Furoate

HAVCR1 Others Canine 狗(gou) KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 甲鈷胺>98%,BRMecobalamin
BAR基因核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)（PCR-熒光(guang)探(tan)針法(fa)）RT4膀(pang)胱移(yi)行細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao) RT4 human ansitional cell bladder papillary tumor cells McCOY's 5+10%FBS鳥苷(gan)-5'-二(er)嶙(lin)酸(suan)二(er)鈉鹽，英文名(ming)或英文縮(suo)寫(xie)：5'-GDP，2Na，級別：BR，98%，規(gui)格：2500u

FGF6 Protein Human 重(zhong)組 FGF6 / FGF-6 蛋(dan)白(bai)本(ben)全(quan) Bqnzcldqhydq (List ChqMiccl);Bqnzoyl hydridq;Bqnzqnq ccroncl 100-2-7

B16-F10(小(xiao)鼠皮膚(fu)色素(su)瘤(liu)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)神經(jing)膠質(zhi)細(xi)胞(bao)HM反式-3-吲哚(duo)酸，英文名(ming)或英文縮(suo)寫(xie)：IAA，級別：超(chao)，98%，規(gui)格：5KU

肺動脈(mai)成纖維細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHPAF NA層析(xi)氧化鋁，英文名(ming)或英文縮(suo)寫(xie)：Alumina，級別：BR，97%，規(gui)格：1克

CDH8 Others Rat 大(da)鼠 Cadherin-8 / CDH8 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) N-Acetyl-D-Glucosamine 1g/5g/25g原裝(zhuang) Sigma A8625