OV56細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅供科(ke)研研(yan)究使用、不(bu)得(de)用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

壹、商(shang)品(pin)介(jie)紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添加 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後(hou)加入 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫落(luo)，然後(hou)將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細胞用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然後(hou)按 1:2 比例(li)進行(xing)分瓶(ping)傳代，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添加 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後(hou)加入培養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化，輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫落(luo)，然後(hou)將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移(yi)入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進行(xing)長期保存。使(shi)用程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入-80℃。

二、細胞(bao)培養(yang)操作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下(xia)細胞培養(yang)凍(dong)存處(chu)理(li)僅供參(can)考(kao)，具體操作步(bu)驟以隨貨產(chan)品(pin)說明書(shu)為主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸液的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖晃解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所有(you)細(xi)胞懸液加(jia)入含(han)適(shi)量培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並檢查細胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳代培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化液(ye)浸潤所有(you)細(xi)胞，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況而(er)定(ding)），然後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變(bian)圓並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速拿回(hui)操作臺，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進行(xing)細胞(bao)凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集(ji)細胞(bao)及(ji)細(xi)胞培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去上(shang)清液，用PBS清洗壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細胞(bao)計數。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入無血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支凍存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意凍存管(guan)做(zuo)好(hao)標識。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿取。

公司(si)正(zheng)在出(chu)售的產(chan)品：

Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISA試劑(ji)盒(he)人胃泌素釋放(fang)肽前(qian)體(ti)(ProGRP)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

羥(qiang)脯(pu)(HYP)終點比色法(fa)定(ding)量(liang)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)50次

Humahrombieceptor,ELISAKit人受體()ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

大(da)鼠促黃(huang)體(ti)激素(LH)ELISA試劑(ji)盒(he) ，英文名(ming)： LH ELISA Kit

Mouse procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 小(xiao)鼠Ⅰ型前(qian)膠原(yuan)羧基(ji)端(duan)肽(PⅠCP)ELISA試劑(ji)盒(he)

HumanProteinSELISA試劑(ji)盒(he)人蛋白S(ProteinS)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

ELISAKitapo-A1小(xiao)鼠載脂(zhi)蛋(dan)白A1規(gui)格：48T/96T

Humancolony-stimulatingfactor，CSFELISAKit人集(ji)落刺激因(yin)子(CSF)ELISA試劑(ji)盒(he)規格：96T/48T

人乳(ru)酸(suan)(Lactate)ELISA試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he) 組裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)

小(xiao)鼠血紅(hong)蛋(dan)白(HbCO)免疫試劑(ji)盒(he) Mouse Carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit

MouseCiliaryNeuroophicFactor,CFELISAKit 小(xiao)鼠睫(jie)狀神經(jing)營養(yang)因(yin)子(CF)ELISA試劑(ji)盒(he) 96T/48T 進口(kou)分(fen)裝(zhuang)

CLIAKitforHumanComplemefragme5a,C5aELISAKit人補體片斷(duan)5a規(gui)格：48T/96T

細胞CaMKII激酶(mei)活性(xing)定(ding)量(liang)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)(A/B/C)20次

ELISAKitOPG大(da)鼠骨(gu)保護素規格(ge)：48T/96T

大(da)鼠氧(yang)化型(xing)(GSSG)ELISA試劑(ji)盒(he) ，英文名(ming)： GSSG ELISA Kit

腫瘤(liu)/睪(gao)丸抗原(yuan)65抗(kang)體(ti)

谷甘(gan)肽合(he)成酶(mei)抗體

溶(rong)質(zhi)載體家(jia)族蛋白(bai)16成員A10抗體(ti)

MFSD6蛋(dan)白抗體

纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)激活(huo)物(wu)抑制劑(ji)1 RNA結(jie)合(he)蛋(dan)白抗體

白(bai)介(jie)素1受體相(xiang)關蛋白(bai)樣(yang)1前(qian)體蛋白(bai)抗(kang)體(ti)

磷(lin)酸化(hua)Ets轉錄(lu)因(yin)子家(jia)族ets1抗體(ti)

OV56細(xi)胞(bao)CD351抗(kang)體(ti)

血(xue)紅(hong)蛋白(bai)α/Hemoglobin A1c抗體

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察(cha)細胞瓶(ping)是否完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是否有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱讀細(xi)胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息，如細胞形態、所用培養(yang)基(ji)、血(xue)清比例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因(yin)子等，確保細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀態。因(yin)運輸問(wen)題，部分細(xi)胞由(you)於(yu)溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎形成碎片，是正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀態後(hou)，75%酒精(jing)消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於(yu) 37℃培養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的(de)培養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中(zhong)進行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張細胞照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀態，便於和(he)我司(si)技(ji)術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由(you)於(yu)運輸的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏感細胞(bao)會出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯系，告知細胞 的(de)具體情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技(ji)術人員跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照說(shuo)明(ming)書細(xi)胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次(ci)傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。