OVSAHO細(xi)胞

公司(si)產(chan)品僅供科(ke)研研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷！

壹(yi)、商(shang)品介紹：

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆(fu)蓋培(pei)養瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養瓶中，倒置顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回縮變圓後加入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止消(xiao)化，再輕輕吹打細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫落，然後(hou)將懸液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈澱細(xi)胞用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代，最後(hou)放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱中培養；

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆(fu)蓋培(pei)養瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養瓶中，倒置顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回縮變圓後加入培養(yang)液(ye)終

止消(xiao)化，輕輕吹打細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫落，然後(hou)將懸液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並放置於(yu)凍(dong)存管(guan)中；

4）先將細(xi)胞凍(dong)存管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移入-80℃過夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮中進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用程序

降溫盒(he)可直接放入-80℃。

二、細(xi)胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以下細(xi)胞培養(yang)凍(dong)存處(chu)理僅供參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步驟以隨貨產(chan)品說明書(shu)為主。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然後將所(suo)有細(xi)胞懸液(ye)加入含(han)適量(liang)培養基(ji)的培養瓶中培養過(guo)夜(ye)（或將細(xi)胞懸液(ye)加入10 cm皿中，加入約8 mL培(pei)養基(ji)，培養(yang)過夜）。第二(er)天(tian)換液(ye)並檢查(zha)細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄(qi)去培(pei)養上清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤(run)所有細(xi)胞，將培(pei)養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況而定），然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化情況，若(ruo)細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓並脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打勻(yun)後裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿中或者(zhe)瓶中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱中培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細(xi)胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時(shi)，可進(jin)行(xing)細(xi)胞凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培養(yang)液(ye)，裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數。

b、根(gen)據細(xi)胞數量(liang)加入無血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞懸液(ye)，註意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好(hao)標識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮灌(guan)儲存。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以便下次(ci)拿取。

公司(si)正在出(chu)售(shou)的產品：

石蠟切(qie)片(pian)細(xi)胞細(xi)胞有絲(si)分裂(lie)熒(ying)光(guang)顯微(wei)鏡(jing)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒10/20次(ci)

MouseypsinELISAKit小鼠胰(ypsin)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

HumanProgesterone,PROGELISA試(shi)劑(ji)盒人孕(yun)激(ji)素(su)/孕(yun)同(tong)(PROG)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit人抗(kang)復合(he)物(wu)(TAT)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

大(da)鼠雌(ci)激(ji)素(su)轉(zhuan)移酶(SULT1E1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ，英文(wen)名： SULT1E1 ELISA Kit

漢坦(tan)病毒(du)通(tong)用型(HTV-U)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(PCR-熒光(guang)探(tan)針法) 48T

Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISA試(shi)劑(ji)盒人3特(te)異(yi)性抗(kang)中性粒細(xi)胞胞質(zhi)抗體(ti)(PR3-ANCA)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

ELISAKitFT4小鼠遊離甲(jia)狀(zhuang)腺素(su)規(gui)格(ge)：48T/96T

HumanCollectinELISAKit人膠(jiao)原凝(ning)集素(su)(Collectin)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

人熱(re)休(xiu)克因(yin)子1(HSF-1)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒 組(zu)裝/原裝

人腺苷(gan)脫氨酶(mei)(ADA)免疫(yi)試(shi)劑(ji)盒 Human adenosine deaminase,ADA ELISA Kit

脫氫(qing)抗(kang)壞(huai)血(xue)酸(suan)(DHA)含(han)量(liang)測試(shi)盒 紫(zi)外分光(guang)光(guang)度法 50管/48樣(yang)

RatMethylaseELISA試(shi)劑(ji)盒大(da)鼠甲(jia)基(ji)化酶(Methylase)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

Humanhepaticlipase,HLELISA試(shi)劑(ji)盒人肝脂(zhi)酶(mei)(HL)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

HumanLongactingthyroidstimulator,LATSELISAKit人長(chang)效甲狀(zhuang)腺刺(ci)激(ji)素(su)(LATS)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

腫(zhong)瘤(liu)/睪(gao)丸(wan)抗(kang)原家(jia)族4亞型7抗體(ti)

谷氧(yang)還(hai)蛋(dan)白2抗體(ti)

溶(rong)質(zhi)載體(ti)家族蛋(dan)白20成(cheng)員A1抗體(ti)

MHC I類鏈相(xiang)關(guan)蛋(dan)白A/組(zu)織(zhi)相(xiang)容(rong)性復合(he)物(wu)MHCIa抗體(ti)

纖維(wei)蛋(dan)白肽(tai)B/血纖(xian)肽(tai)B抗體(ti)

白介素(su)-22抗體(ti)

磷(lin)酸(suan)化FRA-1蛋白抗(kang)體(ti)

OVSAHO細(xi)胞CD39重(zhong)組(zu)兔(tu)單克隆抗體(ti)

血(xue)紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗(kang)體(ti)

三(san)、培養(yang)註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞後首先觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是否(fou)完好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有上述(shu)現象 發(fa)生(sheng)請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說明(ming)書，了解細(xi)胞相(xiang)關(guan)信息(xi)，如(ru)細(xi)胞形態(tai)、所(suo)用培養基(ji)、血清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因(yin)子等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞培養(yang)條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細(xi)胞出現(xian)問題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細(xi)胞瓶表面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸問題(ti)，部分(fen)細(xi)胞由於(yu)溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正常(chang)現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可以消(xiao)化，懸浮細(xi)胞直接(jie)混(hun)勻(yun)收集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮的培養基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞，並接(jie)種到新(xin)的培養瓶或培(pei)養皿(min)中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱中進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同(tong)條件(jian)的培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技術部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸的原因(yin)，個別敏(min)感細(xi)胞會出(chu)現不(bu)穩定的情況，請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞 的具(ju)體(ti)情況，以便我(wo)們(men)的技術人員跟蹤回訪(fang)直至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅供科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用的培養基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能再用來培養細(xi)胞，請換用按(an)照(zhao)說明書細(xi)胞培 養(yang)條件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的培養基(ji)來培(pei)養細(xi)胞。     收到(dao)細(xi)胞後第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。