NCI-H187H187細胞

公(gong)司產品僅(jin)供科(ke)研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷！

壹(yi)、商(shang)品介紹(shao)：

1、細胞傳代：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入 5ml 培養

液(ye)終止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養基重懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例進行分瓶傳代，最後放入 37℃，5%CO2細胞

培養箱中(zhong)培養；

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入培養液(ye)終

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並(bing)放置於(yu)凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存(cun)管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)中(zhong)進行長期保存(cun)。使(shi)用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫盒可直(zhi)接放(fang)入-80℃。

二、細胞培養操作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞：以下(xia)細胞培養凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供參(can)考(kao)，具體操作(zuo)步(bu)驟以隨(sui)貨產品說明書為主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管在 37℃水(shui)浴(yu)中迅速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後吹(chui)勻(yun)。然後將(jiang)所有(you)細胞懸液(ye)加(jia)入含適(shi)量(liang)培(pei)養基的(de)培養瓶中培(pei)養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入10 cm皿中，加入約8 mL培養基，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢查(zha)細胞密度(du)。

2) 細(xi)胞傳代：如果細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即可進行傳代培養。

a、棄去(qu)培養上清，用(yong)不含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細胞，將(jiang)培(pei)養瓶置於(yu)37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況而定），然(ran)後在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細胞大部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶後加2-3ml培(pei)養基終止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)按1:2比(bi)例分(fen)到新的(de)含8 mL培(pei)養基的(de)新皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置於(yu)培(pei)養箱中(zhong)培養。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞生長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時，可進行細胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養液(ye)，裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進行細胞計數。

b、根據細胞數量(liang)加(jia)入無血清細(xi)胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放(fang)入-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管位置以便下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司正在出(chu)售(shou)的(de)產品：

通(tong)用(yong)型血(xue)液(ye)對(dui)氧磷酶1（PON1）有(you)機磷酸(suan)酶活(huo)性(xing)比色法(fa)定量(liang)檢測試劑盒(he)

通(tong)用(yong)型微(wei)型(xing)RNA（miRNA）擴增(zeng)試(shi)劑盒

氣(qi)生(sheng)蘭(lan)（epiphytic）克(ke)隆增(zeng)殖(zhi)培養基

石(shi)蠟(la)切(qie)片組織JNK/SAPK蛋白表達熒(ying)光(guang)顯微(wei)鏡檢測試劑盒(he)

通(tong)用(yong)型絲(si)核(he)菌(jun)種(zhong)（Rhizoctonia species）基因檢測試劑盒(he)

細(xi)胞尿(niao)素(su)比色(se)法(fa)定量(liang)檢測試劑盒(he)

血(xue)液(ye)總(zong)酶連(lian)續循環(huan)熒(ying)光(guang)定量(liang)檢測試劑盒(he)

組(zu)織樣(yang)品組織(zhi)型(xing)纖維(wei)蛋白溶酶原激活(huo)劑(ji)（tPA）活(huo)性(xing)比色法(fa)定量(liang)檢測試劑盒(he)

細(xi)胞甘(gan)肽(tai)（GLUTATHIONE）總濃度(du)熒(ying)光(guang)定量(liang)檢測試劑盒(he)

細(xi)菌醋(cu)酸(suan)鉛(qian)瓊(qiong)脂平(ping)板(ban)

細胞BAX蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒(he)

果類果膠酶比色法(fa)定量(liang)檢測試劑盒(he)

M. scrofulaceum RFLP基因分析試(shi)劑盒(he)

細胞PKCβ1激酶活(huo)性(xing)定量(liang)檢測試劑盒(he)（A/B/C）

動物細(xi)胞β-半(ban)乳糖(tang)苷(gan)酶活(huo)性(xing)超(chao)敏熒(ying)光(guang)定量(liang)檢測試劑盒(he)

致(zhi)癌基因N myc相(xiang)互作(zuo)用(yong)因子(zi)抗體

谷受(shou)體1抗(kang)體

溶酶體相(xiang)關膜(mo)蛋白4α抗體

MAGEG1抗(kang)體(ti)

細胞質FMR1相(xiang)關蛋白2抗體

艾(ai)滋病病毒(du)p24抗體(ti)

磷酸(suan)甘(gan)油酸(suan)脫氫(qing)酶單(dan)克(ke)隆抗體

NCI-H187[H187]細胞CBFA2T3單(dan)克(ke)隆抗體

嗅球蛋白樣(yang)蛋白1抗(kang)體

三、培養註意事項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞後首(shou)先觀察細(xi)胞瓶是否(fou)完(wan)好(hao)，培養液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等現(xian)象，若有(you)上述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和我們聯系。

2. 仔細閱(yue)讀細(xi)胞說明書，了(le)解(jie)細(xi)胞相(xiang)關信息(xi)，如細(xi)胞形態、所用(yong)培養基、血清比(bi)例(li)、所需 細(xi)胞因子(zi)等，確(que)保細(xi)胞培養條件(jian)壹(yi)致，若由(you)於培養條件(jian)不(bu)壹(yi)致而導致細(xi)胞出現(xian)問(wen)題，責任由(you) 客戶自(zi)行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞瓶表面，顯微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞狀(zhuang)態。因運輸問題，部分細(xi)胞由(you)於溫度 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是正常(chang)現(xian)象。觀察好(hao)細胞狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞可以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的(de)培養基重懸 細(xi)胞，並(bing)接種(zhong)到新的(de)培養瓶或培(pei)養皿中，置於(yu)培(pei)養箱中(zhong)進行培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條件(jian)的(de)培養基用(yong)於細(xi)胞培養。

6. 建議客戶收到細(xi)胞後前 3 天(tian)各拍幾(ji)張細(xi)胞照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態，便於和我司技術(shu)部(bu)溝通(tong) 交(jiao)流。由(you)於運輸的(de)原因，個別(bie)敏感(gan)細胞會出(chu)現(xian)不穩(wen)定的(de)情(qing)況，請(qing)及(ji)時(shi)和我們聯系，告(gao)知細胞 的(de)具體(ti)情(qing)況，以便我們的(de)技術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤回訪直至問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅(jin)供科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運輸用(yong)的(de)培養基 (灌液(ye)培(pei)養基) 不能再用(yong)來(lai)培養細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按照說(shuo)明書細胞培 養條件(jian)新配制(zhi)的(de)培養基來(lai)培養細胞。     收到細(xi)胞後第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建議 1：2 傳代 。

9. 註意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。