NCI-H1792細(xi)胞(bao)

公司產品僅供科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

壹(yi)、商(shang)品介紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察，待細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化，再(zai)輕輕吹打細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比例進(jin)行分瓶傳代(dai)，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察，待細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入培養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化，輕輕吹打細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放置於(yu)凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入液(ye)氮中(zhong)進(jin)行長期保(bao)存。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降溫盒可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培養(yang)凍存(cun)處理(li)僅供參考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步驟以隨(sui)貨(huo)產品說明(ming)書(shu)為(wei)主。將含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入含適(shi)量培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶置於(yu)37℃培養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況而定(ding)），然後(hou)在顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消化情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良好時(shi)，可(ke)進(jin)行細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據細(xi)胞(bao)數量加(jia)入無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意凍存(cun)管(guan)做好標(biao)識(shi)。將凍存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管(guan)位(wei)置以便(bian)下(xia)次拿取。

公(gong)司正在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

組(zu)織(zhi)堿(jian)性焦磷(lin)酸(suan)酶(mei)（Alkaline Pyrophosphatase）活性比色(se)法定(ding)量檢(jian)測試劑盒

總(zong)微型RNA（miRNA）超(chao)濾法(fa)分(fen)離(li)試劑盒

菊(ju)花(hua)生(sheng)根(gen)（rhizogenesis）培養(yang)基(ji)

IKB-ALPHA蛋白(bai)表(biao)達(da)西方雜(za)交(jiao)分析(xi)試劑盒

通(tong)用(yong)型南瓜(gua)黃(huang)化花(hua)葉(ye)病毒（Zucchini Yellow Mosaic Virus；ZYMV）

血(xue)液(ye)糖(tang)原化學(xue)水(shui)解比色(se)法定(ding)量檢(jian)測試劑盒

血(xue)液(ye)遊(you)離(li)酶(mei)連續(xu)循(xun)環比色(se)法定(ding)量檢(jian)測試劑盒

活化部分凝(ning)血(xue)活酶(mei)時(shi)間（APTT）檢(jian)測試劑盒

植(zhi)物還原型甘肽(tai)（GSH）濃(nong)度比色(se)法定(ding)量檢(jian)測試劑盒

細(xi)菌鹽（MSA）選擇瓊(qiong)脂(zhi)平板(ban)

石(shi)蠟(la)切(qie)片(pian)組織(zhi)BAD蛋白(bai)表(biao)達(da)NBT顯(xian)色(se)光學(xue)顯(xian)微鏡檢(jian)測試劑盒

通(tong)用(yong)型果(guo)膠(jiao)化(hua)學(xue)比色(se)法定(ding)量檢(jian)測試劑盒

Cr. Neoformans RFLP基(ji)因(yin)分(fen)析(xi)試劑盒

細(xi)胞(bao)PIM1激(ji)酶(mei)活性定量檢(jian)測試劑盒（A/B/C）

真菌/酵(jiao)母細(xi)胞(bao)β-半(ban)乳(ru)糖(tang)苷(gan)酶(mei)活性比色(se)法定(ding)量檢(jian)測試劑盒

酯(zhi)酶(mei)抑制(zhi)蛋白(bai)C1IN抗(kang)體

孤兒(er)核受體(ti)蛋白(bai)Nur77抗(kang)體

溶(rong)酶(mei)體相(xiang)關(guan)跨(kua)膜(mo)蛋白(bai)5抗(kang)體

MACROD1蛋白(bai)抗(kang)體

細(xi)胞(bao)粘附分子(zi)4抗(kang)體

艾(ai)滋病病毒-1包(bao)膜(mo)糖(tang)蛋白(bai)抗(kang)體

磷(lin)酸(suan)二(er)酯酶(mei)9A抗(kang)體

NCI-H1792細(xi)胞(bao)CASP2雕亡相(xiang)關蛋白(bai)抗(kang)體

嗅覺(jiao)受體家(jia)族5亞(ya)基(ji)3抗(kang)體

三、培養(yang)註意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好，培養(yang)液(ye)是(shi)否有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現象，若有上(shang)述(shu)現象 發生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說明(ming)書(shu)，了解細(xi)胞(bao)相關信息，如細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細(xi)胞(bao)出現問題，責任由(you) 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸問題，部分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫度 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常現象。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置於(yu) 37℃培養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接種到(dao)新(xin)的培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技(ji)術部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由(you)於(yu)運輸的原因(yin)，個(ge)別敏(min)感細(xi)胞(bao)會出現不穩定(ding)的情(qing)況，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具(ju)體情(qing)況，以便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科研使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用(yong)按照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。