HCC1419細胞

公(gong)司產(chan)品僅供(gong)科研研究(jiu)使用、不(bu)得用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

壹(yi)、商品介(jie)紹：

1、細(xi)胞傳代：

1）細胞生(sheng)長至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使之脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細(xi)胞凍存：

1）細胞生(sheng)長至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使之脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移(yi)入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉入(ru)液氮(dan)中進(jin)行長(chang)期保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序

降溫盒可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以(yi)下細(xi)胞培養(yang)凍(dong)存處(chu)理僅供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書(shu)為主。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞懸液的凍存(cun)管在 37℃水浴中迅速搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養(yang)基(ji)混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞懸液加入(ru)含適(shi)量培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細胞懸液加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查(zha)細(xi)胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳代培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上清(qing)，用(yong)不含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的PBS潤洗細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中，使消(xiao)化液浸(jin)潤所(suo)有(you)細胞，將培養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況而定），然(ran)後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅速拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞懸液按1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的含8 mL培養(yang)基(ji)的新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存：待細(xi)胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可進(jin)行細(xi)胞凍存。下面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集細(xi)胞及細胞培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄盡PBS，進(jin)行細(xi)胞計數。

b、根據(ju)細(xi)胞數量加入無血清(qing)細(xi)胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支凍存管凍存1mL細(xi)胞懸液，註(zhu)意(yi)凍存管做好標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入液氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以(yi)便下次(ci)拿(na)取。

公(gong)司正在出售(shou)的產(chan)品：

細胞半（CASPASE）總活(huo)性(xing)熒(ying)光(guang)定量檢測試(shi)劑盒

等電(dian)聚焦(jiao)蛋(dan)白電(dian)泳(yong)（IEF）10倍陽電(dian)泳(yong)緩(huan)沖(chong)液

活(huo)力(li)－死(si)亡細菌(jun)雙重(zhong)熒(ying)光(guang)檢測試(shi)劑盒

石(shi)蠟(la)切片組(zu)織CASPASE-5蛋白表達(da)NBT顯(xian)色(se)光(guang)學顯(xian)微(wei)鏡(jing)檢(jian)測試(shi)劑盒

植(zhi)物(wu)源性食(shi)品芹(qin)菜（cellery）基(ji)因檢(jian)測試(shi)劑盒

10倍TBST濃縮緩(huan)沖(chong)清(qing)理溶(rong)液(ye)

細胞磷(lin)酸二(er)酯(zhi)酶（PDE）總活(huo)性(xing)熒(ying)光(guang)定量檢測試(shi)劑盒

真(zhen)菌(jun)/酵母細胞內氧化應(ying)激活(huo)性(xing)氧（ROS）高(gao)質綠色(se)熒(ying)光(guang)測定(ding)試劑盒

HERTEGA染(ran)色(se)試劑盒

DOPAC高(gao)效(xiao)液(ye)相色譜(pu)電(dian)化學定(ding)量檢測試(shi)劑盒

線粒(li)體(ti)內膜(mo)功(gong)能/膜電(dian)位測定(ding)試劑盒

長鏈脂(zhi)肪(fang)酸連接(jie)酶1/2抗體(ti)

肝(gan)腸鈣(gai)粘(zhan)連(lian)蛋白(bai)抗體(ti)

缺氧誘(you)導因子(zi)1α單克隆抗體(ti)

KIAA0355蛋白抗體(ti)

細胞角蛋(dan)白(bai)72抗體(ti)

α蛋白激酶3抗體(ti)

賴tRNA的連接(jie)酶抗體(ti)

HCC1419細(xi)胞ATP依(yi)賴RNA解(jie)旋(xuan)酶DDX52抗體(ti)

鋅指蛋(dan)白(bai)Zic2抗體(ti)

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞後首先觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細(xi)胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞相關信息，如細胞形態(tai)、所用(yong)培養(yang)基(ji)、血清(qing)比(bi)例、所(suo)需 細胞因子等，確保(bao)細(xi)胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細胞出現(xian)問(wen)題，責任(ren)由 客(ke)戶(hu)自行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶表面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分(fen)細胞由於溫度(du) 變(bian)化及劇(ju)烈碰(peng)亡破碎(sui)形成碎片，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可以(yi)消(xiao)化，懸浮細(xi)胞直接(jie)混勻收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新的培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培養(yang)基(ji)用於(yu)細胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收到(dao)細胞後前 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我(wo)司技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由於運(yun)輸(shu)的原因(yin)，個別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞會出現(xian)不(bu)穩(wen)定的情(qing)況，請及時(shi)和我(wo)們聯系(xi)，告知細胞 的具體(ti)情(qing)況，以(yi)便我(wo)們的技術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至問(wen)題解(jie)決。

7. 該細胞僅供(gong)科研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用(yong)來(lai)培養(yang)細(xi)胞，請換用按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制的培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞。     收到細胞後第壹(yi)次傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。