HCC2157細(xi)胞(bao)

公司產(chan)品僅(jin)供科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞回縮變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹打細胞使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱細胞用(yong) 1-2ml 培養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例進行(xing)分瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞回縮變圓後(hou)加(jia)入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打細胞使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並放置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮(dan)中進行(xing)長(chang)期保(bao)存。使(shi)用(yong)程序

降溫(wen)盒可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養操(cao)作

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存處(chu)理僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以(yi)隨貨產品說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量培(pei)養基的(de)培養瓶中培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過(guo)夜）。第(di)二天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清(qing)，用(yong)不含鈣、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中，使(shi)消化(hua)液浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞，將培養瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀察細胞消化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞(bao)大部分變(bian)圓並脫落(luo)，迅(xun)速拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的含8 mL培(pei)養基的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞生長(chang)狀態良(liang)好(hao)時(shi)，可進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細(xi)胞培養液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細胞(bao)數量加(jia)入(ru)無血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在出(chu)售的(de)產(chan)品：

植物聚甲基半(ban)乳(ru)糖(tang)醛(quan)酸酶(mei)（Polymethylgalacturonase；PMG）活性比色(se)法定量檢(jian)測試劑(ji)盒

通用(yong)型蛋(dan)白(bai)電(dian)泳考馬(ma)斯亮(liang)藍(lan)染色(se)試劑(ji)盒

裂解液(ye)VIII：細菌(jun)活性化(hua)蛋(dan)白(bai)制(zhi)備溶液(ye)

載(zai)玻片(pian)細胞(bao)CASPASE-6蛋(dan)白(bai)表(biao)達(da)NBT顯色(se)光(guang)學(xue)顯微(wei)鏡(jing)檢(jian)測試劑(ji)盒

乳(ru)品三(san)聚胺快速顯色(se)定性檢測試劑(ji)盒（家用(yong)型/工業(ye)型）

透(tou)射(she)電(dian)鏡(jing)（TEM）銅質載(zai)網(wang)

組織(zhi)磷酸二酯酶(mei)2（PDE2）活性酶(mei)連續循(xun)環(huan)光譜(pu)法定量檢(jian)測試劑(ji)盒

植物氧化(hua)應激活性氧（ROS）比色(se)法定量檢(jian)測試劑(ji)盒（超氧陰(yin)離(li)子）

石(shi)蠟(la)切(qie)片網(wang)硬蛋(dan)白(bai)（RETICULIN）染色(se)試劑(ji)盒

色(se)羥(qiang)化(hua)酶(mei) （Tryptophan Hydroxylase）活性

細胞(bao)CDK2蛋(dan)白(bai)表(biao)達(da)流式細胞儀(yi)檢測試劑(ji)盒

飼料(liao)氨壹(yi)步法定量檢(jian)測試劑(ji)盒

冰(bing)凍(dong)切(qie)片(pian)組(zu)織(zhi)COLLAGEN II蛋(dan)白(bai)表(biao)達(da)NBT顯色(se)光(guang)學(xue)顯微(wei)鏡(jing)檢(jian)測試劑(ji)盒

細胞(bao)基質(zhi)金(jin)屬(shu) 125I同(tong)位素(su)標(biao)記(ji)檢(jian)測試劑(ji)盒

植物氧化(hua)酶(mei)活性測定試劑(ji)盒

長(chang)壽(shou)相關(guan)基因(yin)lASS1抗體(ti)

肝糖(tang)原磷酸化(hua)酶(mei)抗體(ti)

染色(se)盒同(tong)源(yuan)物4抗體(ti)

KIAA0802蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti)

細胞(bao)角(jiao)蛋(dan)白(bai)80抗體(ti)

α-甲基酰(xian)基消旋酶(mei)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)

賴(lai)特異(yi)性脫甲(jia)基酶(mei)4B重(zhong)組(zu)兔(tu)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)

HCC2157細(xi)胞(bao)ATP-依(yi)賴(lai)的RNA解(jie)旋(xuan)酶(mei)32抗體(ti)

鋅指(zhi)蛋(dan)白(bai)結構(gou)域ZFYVE16抗體(ti)

三(san)、培(pei)養註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首先觀察細胞瓶是(shi)否完好(hao)，培(pei)養液(ye)是否有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等現象，若(ruo)有(you)上(shang)述現象 發生請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞(bao)形態、所(suo)用(yong)培養基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞培養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞出(chu)現問題，責任由 客戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀察細胞狀態。因(yin)運(yun)輸問題，部分細(xi)胞(bao)由於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰亡破(po)碎(sui)形(xing)成碎片，是正(zheng)常現象。觀察好(hao)細(xi)胞狀態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶或(huo)培養皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中進行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養基用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收到細胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀態，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不穩定的情(qing)況，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系，告知(zhi)細(xi)胞 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以(yi)便(bian)我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員跟蹤回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問題解決。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用(yong)的培(pei)養基 (灌(guan)液培養基) 不能(neng)再用(yong)來培養細(xi)胞，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的培(pei)養基來培養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。