pFMV35S基(ji)因核(he)酸檢測試劑(ji)盒(he)

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 產(chan)品名稱(cheng)：pFMV35S基(ji)因核(he)酸檢測試劑(ji)盒(he)
規(gui)格(ge)：48T  0.2PCR管(guan)
編(bian)號：BH-P97056
分(fen)類：PCR-熒光(guang)探針(zhen)法
儲存條(tiao)件(jian)：-20℃避光保存，避免反復(fu)凍融(rong)。
運輸：低溫、避光，快遞免費送(song)貨上門(men)。
產(chan)品特(te)點：
◇高(gao)特異(yi)性(xing)：與(yu)其(qi)他(ta)病毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)，無(wu)非特(te)異(yi)性(xing)擴增；
◇高(gao)靈(ling)敏度：檢測靈(ling)敏度可達10~100拷貝；
◇操(cao)作簡(jian)便：該(gai)系列所(suo)有試劑(ji)均(jun)采用相同(tong)的體系和條(tiao)件(jian)，可(ke)同時進行多(duo)個檢測；
◇高(gao)通量：多(duo)種雙(shuang)重(zhong)PCR檢測以(yi)及三重(zhong)PCR檢測試劑(ji)盒(he)。

準備物(wu)品：
清(qing)理(li)液（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色液（t B）                                   微升
稀(xi)釋液（C）                                   毫(hao)升
溶(rong)解液（tD）                                   毫(hao)升
產(chan)品說(shuo)明(ming)書                                   1份(fen)
使(shi)用及效果(guo)：
PCR反(fan)應(ying)特點
(1) 特(te)異性(xing)強(qiang)
PCR反(fan)應(ying)的特異(yi)性決(jue)定(ding)因素(su)為：
①引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)DNA特(te)異正(zheng)確(que)的結合(he)；
②堿(jian)基配(pei)對原則；
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合成(cheng)反應(ying)的忠實性(xing)；
④靶(ba)基因(yin)的特異(yi)性與(yu)保(bao)守(shou)性(xing)。
其(qi)中(zhong)引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)的正確(que)結合(he)是(shi)關(guan)鍵。引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)的結合(he)及引(yin)物(wu)鏈(lian)的延(yan)伸(shen)是(shi)遵循(xun)堿(jian)基配(pei)對原則的。聚合(he)酶(mei)合成(cheng)反應(ying)的忠實性(xing)及Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐高溫性(xing)，使(shi)反應(ying)中(zhong)模(mo)板(ban)與(yu)引(yin)物(wu)的結合(he)(復(fu)性)可(ke)以在(zai)較(jiao)高的溫度下進行，結合(he)的特異(yi)性大(da)大(da)增加，被(bei)擴(kuo)增的靶基(ji)因片(pian)段(duan)也(ye)就能保持很高的正確(que)度。再(zai)通過(guo)選(xuan)擇(ze)特(te)異(yi)性和保守(shou)性高的靶基(ji)因區，其(qi)特(te)異(yi)性程度就更(geng)高。
(2) 靈(ling)敏度高
PCR產(chan)物(wu)的生成(cheng)量是(shi)以指(zhi)數方(fang)式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qi)始待(dai)測(ce)模(mo)板(ban)擴(kuo)增到(dao)微克(ug=10-6g)水平(ping)。能從(cong)100萬(wan)個細(xi)胞中(zhong)檢出(chu)壹個靶(ba)細(xi)胞；在(zai)病毒(du)的檢測中(zhong)，PCR的靈(ling)敏度可達3個(ge)RFU(空(kong)斑形成(cheng)單(dan)位(wei))；在(zai)細(xi)菌學(xue)中(zhong)zui小檢出(chu)率(lv)為3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡(jian)便、快速
PCR反(fan)應(ying)用耐高溫的Taq DNA聚(ju)合酶(mei)，壹次性(xing)地(di)將反應(ying)液加好(hao)後，即(ji)在(zai)DNA擴(kuo)增液和水浴鍋上進行變性(xing)-退(tui)火-延(yan)伸(shen)反(fan)應(ying)，壹般在(zai)2～4 小時(shi)完(wan)成(cheng)擴增反應(ying)。擴增產物(wu)壹般用(yong)電泳分析，不(bu)壹定要(yao)用同(tong)位(wei)素(su)，無(wu)放(fang)射性汙染、易推廣。
(4) 對標本(ben)的純度要求低
不(bu)需要(yao)分(fen)離病毒(du)或細(xi)菌及培養細(xi)胞，DNA 粗(cu)制品(pin)及總(zong)RNA均(jun)可作(zuo)為擴(kuo)增模(mo)板(ban)。可(ke)直(zhi)接(jie)用臨床標本(ben)如(ru)血液、體腔(qiang)液、洗嗽(sou)液、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞、活(huo)PCR技(ji)術概論(lun)。
CM-R043大(da)鼠小腸平滑(hua)肌細(xi)胞*培養基(ji)100mL1酸(suan)氫鉀(>98%,BC)Potassium hydrogen tartrate>98%,BC

U251膠(jiao)質瘤(liu)細(xi)胞乙(yi)基黃(huang)原酸鉀(jia)(>95%,BC)Potassium O-ethyl xanthate>95%,BC

EB病毒(du)轉(zhuan)化(hua)的B細(xi)胞;HH-29 腦膜(mo)細(xi)胞*培養基(ji) 100mL油(you)酸鉀(jia)(>96%,BR)Potassium oleate>96%,BR

上(shang)皮細(xi)胞;MCF-10A1酸(suan)氫二鉀(jia)三(san)水(分(fen)子生(sheng)物(wu)學(xue)級)Potassium phosphate, dibasic, trihydrate>98.5%,分(fen)子生(sheng)物(wu)學(xue)級

IL5 Others Mouse 小鼠(shu) IL5 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對照) 1酸(suan)三鉀(jia)三(san)水(>98%,BC)Potassium phosphate, tribasic trihydrate>98%,BC
DMS153細(xi)胞，小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞 大(da)鼠腎上腺(xian)嗜鉻細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞,PC12細(xi)胞 CM-H127晶(jing)狀體(ti)上(shang)皮細(xi)胞*培養基(ji)100mL精(jing)胺二1酸(suan)鹽(yan)美國(guo)進口(kou)Spermine diphosphate salt

PANC-1(胰(yi)腺(xian)癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2-N,S-二(er)氧(yang)化(hua)物(wu)美國(guo)進口(kou)Ranitidine-N,S-dioxide

Promocell C-28020 Hematopoietic ProgenitorMedium, 造(zao)血祖細(xi)胞培養基(ji)(即(ji)用型) 100ml去(qu)甲基(ji)美國(guo)進口(kou)Desmethyl Ranitidine

小鼠(shu)網織細(xi)胞肉瘤(liu);M5076N-氧(yang)化(hua)物(wu)美國(guo)進口(kou)Ranitidine N-Oxide

NRG1 Others Canine 狗(gou) NRG1-alpha (EGF Domain) 細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對照) 京(jing)尼平()HPLC≥98%，Genipin
pFMV35S基(ji)因核(he)酸檢測試劑(ji)盒(he)HCCC-9810(肝(gan)內膽(dan)管癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0393NCI-H209(小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2 非(fei)洲綠(lv)猴腎細(xi)胞;VERO德利(li)肥(fei)素(su)，英文(wen)名或英文(wen)縮寫(xie)：Destomycin，級別：生(sheng)物(wu)技術級，90%，規(gui)格(ge)：200U

肺(fei)巨細(xi)胞癌高轉(zhuan)移(yi)細(xi)胞株(zhu);PG-BE1間(jian)三拂(fu)基(ji)本全(quan) 3-(Trifluoromqthyl)bqnzcldqhydq 424-89-7

PON3 Others Human  PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對照) BENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐(bian)脒(mi),HCl蛋(dan)白組(zu)學(xue)級白色(se)精(jing)細(xi)結晶(jing)粉末(mo)COLDsigma

CM-R046大(da)鼠腸上皮(pi)細(xi)胞*培養基(ji)100mLβ-奈(nai)氧(yang)乙酸(suan)，英文(wen)名或英文(wen)縮寫(xie)：BNOA，級別：高(gao)，95%，規(gui)格(ge)：25KU

RL95-2, 內膜(mo)腺(xian)癌細(xi)胞系 羊(yang)膜(mo)細(xi)胞,H.A.細(xi)胞 WERI-Rb-1(視網膜(mo)母細(xi)胞瘤(liu))112246-73-8(+)-二(er)異蒎基錄(+)-Diisopinocampheyl chloroborane
檢測步驟：
壹、 試劑(ji)的準備
從(cong)試劑(ji)盒(he)中(zhong)取(qu)出(chu)熒光(guang)PCR反(fan)應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上融(rong)化(hua)並振蕩(dang)混(hun)勻(yun)後(hou)，10000rpm離心(xin)10s。
設(she)所(suo)需要(yao)的PCR反(fan)應(ying)管管(guan)數(shu)為N(N=樣(yang)本數(shu)+1管(guan)陰性對照+1管(guan)陽性對照)，每(mei)個測(ce)試反應(ying)體系配(pei)制如(ru)下表：
試劑(ji) 每(mei)個反(fan)應(ying)加入(ru)的量 N個(ge)反應(ying)加入(ru)的量
熒光(guang)PCR反(fan)應(ying)液 14µL N×14µL
酶(mei)混合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好(hao)各試劑(ji)的使(shi)用量，加(jia)入(ru)壹適當體積(ji)潔(jie)凈離心(xin)管中(zhong)，充(chong)分混(hun)勻(yun)，10000rpm離心(xin)10s，向(xiang)設(she)定(ding)的N個(ge)PCR反(fan)應(ying)管中(zhong)分(fen)別加(jia)入(ru)15μL熒光(guang)PCR反(fan)應(ying)液，向(xiang)每(mei)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)處(chu)理(li)後樣(yang)品或陰性對照(NTC)和(he)陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時離心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反(fan)應(ying)條(tiao)件(jian)
將各反(fan)應(ying)管放(fang)入(ru)定(ding)量PCR儀(yi)器的反應(ying)槽內。
循(xun)環條(tiao)件(jian):
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預(yu)變性(xing) 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸(shen)時(shi)收(shou)集熒光(guang)信號。報告(gao)基(ji)團(tuan)：設置(zhi)為FAM。淬(cui)滅基(ji)團(tuan)：NONE，請勿(wu)選(xuan)擇(ze)ROX參(can)比熒光(guang)。