OD全稱(cheng)optical density，也就是光(guang)密度(du)，也可(ke)以稱(cheng)為(wei)吸(xi)光(guang)度(du)。吸(xi)光(guang)度(du)指(zhi)的是利(li)用物質有的吸(xi)收(shou)光(guang)譜(pu)，來(lai)鑒(jian)別物質或(huo)者(zhe)測(ce)定物質的(de)含量，也就是將壹束特(te)定波長(chang)的(de)光通(tong)過(guo)被(bei)檢測(ce)物，被檢測(ce)物可以將光吸(xi)收(shou)掉(diao)壹(yi)部(bu)分(fen)，通(tong)過(guo)吸(xi)光(guang)度(du)計算被檢測(ce)物的濃度(du)。壹般(ban)被檢測(ce)物濃度(du)越高(gao)，吸(xi)光(guang)度(du)的值(zhi)就會越高。實驗中(zhong)也是利(li)用“OD值”和(he)被檢測(ce)物的濃度(du)之間的(de)關系來根(gen)據(ju)吸(xi)光(guang)度(du)。
 

　　OD值是用酶(mei)標儀(yi)測(ce)定的，其(qi)範(fan)圍(wei)壹般(ban)在0-3之(zhi)間，也有高於(yu)3.0的(de)，其(qi)值的大小(xiao)跟(gen)孔(kong)中(zhong)顏(yan)色的深(shen)淺成(cheng)比(bi)例，壹般(ban)顏色深(shen)，OD值(zhi)就比(bi)較高(gao)，另外ELISA所(suo)測定的OD值反(fan)應的(de)結果壹般(ban)是壹(yi)定稀釋度(du)的抗(kang)體效價，如果妳所(suo)用的抗體稀釋度(du)很小，效(xiao)價(jia)很高的(de)話(hua)，其(qi)OD值是會(hui)很高的(de)。
 

　　實驗中(zhong)OD值(zhi)偏(pian)低(di)情況(kuang)分析(xi)：
 

　　第壹種(zhong)情(qing)況(kuang)，整體的OD值偏(pian)低(di)
 

　　可能(neng)情況(kuang)分析：
 

　　1. 標準(zhun)問(wen)題，標(biao)準(zhun)濃度(du)有沒(mei)有提高的潛(qian)力(li)，標(biao)準(zhun)曲(qu)線的擬合方(fang)式等(deng)
 

　　2. 顯(xian)色試(shi)劑問(wen)題，顯(xian)色試(shi)劑是否(fou)新(xin)鮮，是否(fou)汙染
 

　　3. 檢測(ce)抗體，檢測(ce)抗體效價是否(fou)OK，保存方(fang)法(fa)是否(fou)合適，稀(xi)釋(shi)液中不(bu)含有蛋白質，基質(zhi)中(zhong)有影響酶(mei)活的(de)物質等(deng)
 

　　4. 體系中是否(fou)有其(qi)他(ta)影響抗原(yuan)抗(kang)體結合的物質
 

　　5. 孵育(yu)條件(jian)是否(fou)正確(que)
 

　　6. 洗滌(di)不能(neng)過(guo)猛(meng)，洗滌(di)過(guo)猛(meng)也可(ke)能(neng)會造(zao)成(cheng)顯(xian)色偏(pian)低(di)
 

　　第二(er)種(zhong)情(qing)況(kuang)，標(biao)準(zhun)曲(qu)線OK，樣本(ben)的OD值很低(di)
 

　　情況(kuang)概述(shu)：操作步(bu)驟全按照(zhao)要(yao)求(qiu)，樣(yang)本(ben)信息也適(shi)用，樣本(ben)類型(xing)血清(qing)，標(biao)曲(qu)OK，但就是樣(yang)本(ben)的OD值很低(di)，不在(zai)曲(qu)線範(fan)圍(wei)內。
 

　　可(ke)能(neng)情(qing)況分(fen)析(xi)：
 

　　1. 壹(yi)般(ban)標曲(qu)OK，試(shi)劑盒基本(ben)沒(mei)有質量問(wen)題，這個時候(hou)先(xian)去(qu)分析(xi)樣品和(he)保存方(fang)法(fa)的(de)原(yuan)因(yin)。
 

　　2. 樣品是否(fou)新(xin)鮮，小愛(ai)之前看到很多(duo)論壇(tan)大咖(ka)建議(yi)用新(xin)鮮樣品檢測(ce)，將標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)後(hou)加入血清(qing)或(huo)血漿中(zhong)檢測(ce)(也就是血清(qing)進(jin)壹(yi)步(bu)稀釋(shi)標準(zhun)品)，觀(guan)察(cha)檢測(ce)結果，判斷(duan)是否(fou)是血清(qing)中(zhong)有未(wei)知(zhi)物質影(ying)響(xiang)。
 

　　3. 血清(qing)中(zhong)成(cheng)分復(fu)雜，標(biao)準(zhun)蛋白的稀(xi)釋液成(cheng)分簡單(dan)，血清(qing)中(zhong)可(ke)能(neng)有450nm顯(xian)色物質與(yu)板(ban)底非(fei)特異(yi)結合，或者(zhe)有些(xie)非(fei)特異(yi)結合抗體的蛋白，不能(neng)洗幹(gan)凈，所(suo)以本(ben)底比(bi)標準(zhun)樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液高(gao)。
 

　　4. 適當延長(chang)顯(xian)色時間。
 

　　5. 更換(huan)酶(mei)標儀(yi)，排(pai)除(chu)儀器原(yuan)因(yin)。
 

　　6. 聯(lian)系(xi)我(wo)們(men)，嘗(chang)試(shi)其(qi)他(ta)方(fang)法(fa)。