BY4741 感受態細(xi)胞(bao)100ul*10

BY4741 感受態細(xi)胞(bao)100ul*10操作方(fang)法（以下(xia)操作均按無(wu)菌條(tiao)件(jian)的標準(zhun)進(jin)行(xing)）
1 取(qu)感受態細(xi)胞(bao)置(zhi)於(yu)冰(bing)浴中(zhong)，如需(xu)分裝可(ke)將剛(gang)融化細胞(bao)懸(xuan)液(ye)分裝到(dao)無菌(jun)預(yu)冷(leng)的離心(xin)管(guan)中(zhong)，置於(yu)冰(bing)浴中(zhong)。
●  壹次(ci)轉(zhuan)化(hua)感受態細(xi)胞(bao)的建議(yi)用量(liang)為(wei)50-100 μl，可(ke)以根(gen)據實(shi)際(ji)情(qing)況分裝使(shi)用(yong)。應(ying)註(zhu)意所(suo)用(yong)DNA 體(ti)積(ji)不要(yao)超過感受態細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)體(ti)積(ji)的十分之壹。
以下(xia)實驗(yan)以100 μl感受態細(xi)胞(bao)為(wei)例。
BY4741 感受態細(xi)胞(bao)100ul*102 向(xiang)感受態細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)中(zhong)加入(ru)目的DNA（100 μl 的感受態細(xi)胞(bao)能夠被(bei)1 ng 超(chao)螺旋質粒DNA 所(suo)飽(bao)和），輕(qing)輕旋轉(zhuan)離心(xin)管(guan)以混勻內容物，在冰浴(yu)中(zhong)靜(jing)置30 分鐘(zhong)。
3 將離心(xin)管(guan)置於(yu)42℃水(shui)浴中(zhong)放置(zhi)60-90 秒，然(ran)後(hou)快速將管(guan)轉移到(dao)冰浴(yu)中(zhong)，使(shi)細(xi)胞(bao)冷(leng)卻2-3 分鐘(zhong)，該過程不要(yao)搖(yao)動離心(xin)管(guan)。
4 向(xiang)每個離心(xin)管(guan)中(zhong)加入(ru)900 μl 無菌(jun)的SOC 或(huo)LB 培(pei)養(yang)基（不含(han)抗生(sheng)素）， 混勻後置於(yu)37℃搖(yao)床振(zhen)蕩培(pei)養(yang)1 小(xiao)時(shi)（160-220 轉/分鐘(zhong)），目的是使(shi)質粒上(shang)相(xiang)關的抗性(xing)標(biao)記(ji)基因表(biao)達(da)，使(shi)菌(jun)體(ti)復蘇。
BY4741 感受態細(xi)胞(bao)100ul*105 將離心(xin)管(guan)內容(rong)物混勻，吸取100 μl 已轉化(hua)的感受態細(xi)胞(bao)加(jia)到(dao)含相(xiang)應(ying)抗生(sheng)素的SOB 或(huo)LB 固體(ti)瓊脂(zhi)培養(yang)基上(shang)，用(yong)無(wu)菌(jun)的彎頭(tou)玻棒輕(qing)輕(qing)的將細(xi)胞(bao)均勻塗(tu)開。將平(ping)板置於(yu)室(shi)溫(wen)直至(zhi)液(ye)體(ti)被(bei)吸收，倒置(zhi)平(ping)板，37℃培養(yang)12-16 小(xiao)時(shi)。
●  塗布(bu)用量(liang)可(ke)根據具體實(shi)驗(yan)來(lai)調整(zheng)。如(ru)轉化的DNA 總(zong)量(liang)較多，可(ke)取更少量(liang)轉(zhuan)化(hua)產(chan)物塗布平(ping)板；反之，如(ru)轉(zhuan)化的DNA 總(zong)量(liang)較少，可(ke)取200-300 μl 轉化產(chan)物塗布平(ping)板。如果(guo)預(yu)計的克隆(long)較少，可(ke)通(tong)過離心(xin)（4,000 rpm, 2分鐘(zhong)）後(hou)吸除部分培養(yang)液(ye)，懸(xuan)浮(fu)菌(jun)體後(hou)將其(qi)塗(tu)布於(yu)壹個平(ping)板中(zhong)。（塗布(bu)剩(sheng)余(yu)的菌液(ye)可(ke)置於(yu)4℃保存(cun)，如(ru)果(guo)次(ci)日(ri)的轉化(hua)菌落(luo)數過少可(ke)以將剩(sheng)下(xia)的菌液(ye)再(zai)塗(tu)布(bu)新的培養(yang)板）
 註(zhu)意事(shi)項(xiang)
1. 感受態細(xi)胞(bao)應(ying)保存(cun)在(zai) -70℃，不可(ke)多次(ci)凍(dong)融和放(fang)置時間過長，以避(bi)免(mian)降(jiang)低感受態細(xi)胞(bao)的轉化(hua)效率(lv)。
2. 進(jin)行(xing)轉(zhuan)化(hua)操作時(shi)，應(ying)根據(ju)相(xiang)應(ying)溫(wen)度(du)及無(wu)菌條(tiao)件(jian)的要求(qiu)進(jin)行(xing)。
3 為(wei)防(fang)止(zhi)轉(zhuan)化實驗不成(cheng)功，可(ke)以保留部分連接(jie)反應(ying)液(ye)，以重(zhong)新轉(zhuan)化(hua)，將損失(shi)降(jiang)到(dao)低。
以下(xia)是的相(xiang)關產(chan)品(pin)：

 FcγRⅠ/CD64 G Fc段(duan)受體Ⅰ 規格： 48T/96T

 IgE E 規格： 48T/96T

 FcεRⅡ/CD23 E Fc段(duan)受體Ⅱ 規格： 48T/96T

 FcεRⅠ E Fc段(duan)受體Ⅰ 規格： 48T/96T

 IgA A 規格： 48T/96T

 FcαRⅠ/CD89 A Fc段(duan)受體Ⅰ 規格： 48T/96T

 Irna 人(ren)免(mian)疫(yi)核糖(tang)核(he)酸 規格： 48T/96T

 irGH 人(ren)免(mian)疫(yi)反應(ying)性(xing)生(sheng)長激素 規格： 48T/96T

 PWM 人(ren)美洲(zhou)商(shang)陸(lu)素 規格： 48T/96T

 CED-3 人(ren)美麗線(xian)蟲(chong)雕亡(wang)基因 規格： 48T/96T

 ankyrin 人(ren)錨蛋(dan)白(bai) 規格： 48T/96T

 ATM 人(ren)毛(mao)細(xi)血管(guan)擴(kuo)張(zhang)性(xing)共(gong)濟(ji)失(shi)調突(tu)變基因 規格： 48T/96T

 Gliadin-IgA 人(ren)麥角蛋白(bai)IgA 規格： 48T/96T

 MV IgM 人(ren)麻疹病(bing)毒IgM 規格： 48T/96T

 MV IgG 人(ren)麻疹病(bing)毒IgG 規格： 48T/96T

 MV 人(ren)麻疹病(bing)毒 規格： 48T/96T

 PF 人(ren)落(luo)葉型天(tian)皰瘡(chuang)抗體 規格： 48T/96T

 Helical Peptide 人(ren)螺旋肽(tai) 規格： 48T/96T

 RV Ag 人(ren)輪狀(zhuang)病毒抗原 規格： 48T/96T

 OVA sIgG 人(ren)卵(luan)清蛋(dan)白(bai)特(te)異(yi)性(xing)IgG 規格： 48T/96T

 OVA sIgE 人(ren)卵(luan)清蛋(dan)白(bai)特(te)異(yi)性(xing)IgE 規格： 48T/96T

人(ren)卵(luan)巢癌標誌(zhi)物CA125ELISA Kit，48T/96T 人(ren)卵(luan)巢癌標誌(zhi)物CA125ELISA Kit，48T/96T 規格： 48T/96T

 PEA 人(ren)綠(lv)膿(nong)桿(gan)菌(jun)外(wai)毒素A 規格： 48T/96T

 TrxR 人(ren)硫氧(yang)還(hai)蛋(dan)白(bai)還(hai)原(yuan)酶(mei) 規格： 48T/96T

 Trx 人(ren)硫氧(yang)化還(hai)原(yuan)蛋(dan)白(bai) 規格： 48T/96T

 MS 人(ren)硫酸褪(tui)黑色素 規格： 48T/96T

 KS 人(ren)硫酸角質素 規格： 48T/96T

 HSPG 人(ren)硫酸肝(gan)素糖(tang)蛋(dan)白(bai) 規格： 48T/96T

 JE IgG 人(ren)流行(xing)性(xing)乙(yi)型腦(nao)炎抗體(ti)IgG 規格： 48T/96T

 EP 人(ren)流行(xing)性(xing)腮腺(xian)炎 規格： 48T/96T

 FLU 人(ren)流感病毒抗體IgG 規格： 48T/96T

 FLU A 人(ren)流感病毒A 規格： 48T/96T

 SCCAg 人(ren)鱗狀(zhuang)細胞(bao)癌相(xiang)關抗原 規格： 48T/96T

 SCCAg-2 人(ren)鱗狀(zhuang)上(shang)皮細胞(bao)癌抗原(yuan)2 規格： 48T/96T

BY4741 感受態細(xi)胞(bao)100ul*10 PIPLC 人(ren)磷酯(zhi)酰(xian)肌醇(chun)特異(yi)性(xing)磷(lin)酯(zhi)酶(mei)C 規格： 48T/96T

 PLCγ1 人(ren)磷酯(zhi)酶(mei)Cγ鏈(lian) 規格： 48T/96T

 PLC 人(ren)磷酯(zhi)酶(mei)C 規格： 48T/96T