EGY48 感(gan)受態細(xi)胞100ul*10

EGY48 感(gan)受態細(xi)胞100ul*10 操(cao)作(zuo)方法（以下操(cao)作(zuo)均按(an)無(wu)菌條(tiao)件(jian)的(de)標準(zhun)進行(xing)）
1 取感(gan)受態細(xi)胞置(zhi)於(yu)冰(bing)浴(yu)中(zhong)，如需分裝(zhuang)可(ke)將剛(gang)融(rong)化細(xi)胞懸液分裝(zhuang)到無(wu)菌預(yu)冷(leng)的(de)離(li)心管(guan)中，置(zhi)於(yu)冰(bing)浴(yu)中(zhong)。
●  壹(yi)次(ci)轉化感受態細(xi)胞的(de)建議(yi)用量(liang)為(wei)50-100 μl，可(ke)以根據(ju)實(shi)際情況分裝(zhuang)使用(yong)。應註意(yi)所用DNA 體積不(bu)要(yao)超過感受態細(xi)胞懸液體積的(de)十(shi)分(fen)之壹(yi)。
以下實(shi)驗(yan)以100 μl感(gan)受態細(xi)胞為(wei)例。
EGY48 感受態細(xi)胞100ul*102 向感受態細(xi)胞懸液中加(jia)入目(mu)的(de)DNA（100 μl 的(de)感受態細(xi)胞能夠(gou)被(bei)1 ng 超(chao)螺(luo)旋(xuan)質(zhi)粒(li)DNA 所(suo)飽和(he)），輕(qing)輕(qing)旋(xuan)轉(zhuan)離(li)心管(guan)以混(hun)勻內(nei)容(rong)物(wu)，在(zai)冰浴(yu)中(zhong)靜(jing)置(zhi)30 分(fen)鐘(zhong)。
3 將(jiang)離(li)心管(guan)置(zhi)於(yu)42℃水(shui)浴中(zhong)放(fang)置(zhi)60-90 秒(miao)，然(ran)後快速將管(guan)轉移到冰(bing)浴(yu)中，使細(xi)胞冷(leng)卻2-3 分鐘，該(gai)過程(cheng)不(bu)要(yao)搖動(dong)離(li)心管(guan)。
4 向每(mei)個(ge)離(li)心管(guan)中加(jia)入(ru)900 μl 無菌的(de)SOC 或LB 培養(yang)基(ji)（不(bu)含抗生(sheng)素）， 混(hun)勻後(hou)置(zhi)於(yu)37℃搖(yao)床(chuang)振(zhen)蕩(dang)培養(yang)1 小時（160-220 轉(zhuan)/分(fen)鐘），目(mu)的(de)是使(shi)質(zhi)粒(li)上(shang)相(xiang)關(guan)的(de)抗性(xing)標記(ji)基(ji)因(yin)表(biao)達(da)，使(shi)菌體復(fu)蘇。
EGY48 感受態細(xi)胞100ul*105 將(jiang)離(li)心管(guan)內(nei)容(rong)物(wu)混(hun)勻，吸(xi)取100 μl 已(yi)轉化的(de)感受態細(xi)胞加(jia)到(dao)含相應抗生(sheng)素的(de)SOB 或LB 固(gu)體瓊(qiong)脂(zhi)培養(yang)基(ji)上(shang)，用(yong)無菌的(de)彎(wan)頭玻棒(bang)輕(qing)輕的(de)將細(xi)胞均(jun)勻塗開(kai)。將(jiang)平板(ban)置(zhi)於(yu)室(shi)溫(wen)直(zhi)至液體被(bei)吸(xi)收(shou)，倒(dao)置(zhi)平(ping)板(ban)，37℃培養(yang)12-16 小時。
●  塗布(bu)用(yong)量(liang)可(ke)根據(ju)具(ju)體實驗(yan)來(lai)調(tiao)整(zheng)。如轉化的(de)DNA 總量(liang)較(jiao)多(duo)，可(ke)取更(geng)少(shao)量(liang)轉(zhuan)化產(chan)物(wu)塗布(bu)平(ping)板；反(fan)之(zhi)，如轉化的(de)DNA 總量(liang)較(jiao)少(shao)，可取200-300 μl 轉(zhuan)化產(chan)物(wu)塗布(bu)平(ping)板。如果(guo)預(yu)計(ji)的(de)克隆較少(shao)，可通(tong)過離(li)心（4,000 rpm, 2分(fen)鐘）後(hou)吸除(chu)部(bu)分(fen)培養(yang)液，懸浮(fu)菌體後將(jiang)其(qi)塗布(bu)於(yu)壹(yi)個平板中。（塗布(bu)剩余的(de)菌液可置(zhi)於(yu)4℃保存(cun)，如果(guo)次(ci)日的(de)轉化菌落數過少(shao)可以將(jiang)剩下的(de)菌液再塗布(bu)新(xin)的(de)培養(yang)板(ban)）
 註意(yi)事(shi)項(xiang)
1. 感(gan)受態細(xi)胞應保存(cun)在(zai) -70℃，不(bu)可(ke)多(duo)次(ci)凍(dong)融(rong)和(he)放(fang)置(zhi)時(shi)間(jian)過(guo)長，以避(bi)免降低感受態細(xi)胞的(de)轉化效率(lv)。
2. 進(jin)行(xing)轉(zhuan)化操作(zuo)時(shi)，應根據(ju)相(xiang)應溫(wen)度(du)及(ji)無菌條(tiao)件(jian)的(de)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
3 為(wei)防止轉化實驗(yan)不(bu)成功，可(ke)以保留(liu)部(bu)分(fen)連接反(fan)應液，以重新(xin)轉化，將損失降到低。
以下是(shi)的(de)相關(guan)產(chan)品(pin)：

 anti-HAV 人(ren)抗甲(jia)型(xing)肝炎病毒(du)IgM抗體 規格(ge)： 48T/96T

 anti-HAV 人(ren)抗甲(jia)型(xing)肝炎病毒(du)IgG抗體 規格(ge)： 48T/96T

 EMA IgA 人(ren)抗肌(ji)內(nei)膜抗體IgA 規格(ge)： 48T/96T

 TTN 人(ren)抗肌(ji)聯(lian)蛋(dan)白抗體 規格(ge)： 48T/96T

 AAA 人(ren)抗肌(ji)動(dong)蛋(dan)白抗體 規格(ge)： 48T/96T

 CCP 人(ren)抗環(huan)胍氨(an)酸(suan)肽抗體 規格(ge)： 48T/96T

 RSV 人(ren)抗呼(hu)吸道(dao)合胞病毒(du)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 RBC 人(ren)抗紅(hong)細(xi)胞抗體 規格(ge)： 48T/96T

 APF 人(ren)抗核周因(yin)子(zi)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 ANF 人(ren)抗核因(yin)子(zi)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 AnuA-IgG 人(ren)抗核小體抗體IgG 規格(ge)： 48T/96T

 ARPA/Rib-P 人(ren)抗核糖體P蛋(dan)白抗體 規格(ge)： 48T/96T

 RNP-Ab 人(ren)抗核糖核蛋(dan)白抗體 規格(ge)： 48T/96T

 AFA/snoRNP/U3RNP 人(ren)抗核仁(ren)纖(xian)維(wei)蛋(dan)白抗體 規格(ge)： 48T/96T

 ANA 人(ren)抗核仁(ren)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 gp210 人(ren)抗核膜糖(tang)蛋(dan)白210抗體 規格(ge)： 48T/96T

 ANA 人(ren)抗核抗體 規格(ge)： 48T/96T

 ASA 人(ren)抗骨(gu)骼(ge)肌(ji)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 anti-tox IgM 人(ren)抗弓(gong)形體IgM抗體 規格(ge)： 48T/96T

 anti-tox IgG 人(ren)抗弓(gong)形體IgG抗體 規格(ge)： 48T/96T

 AGAA 人(ren)抗高(gao)爾(er)基(ji)體抗體 規格(ge)： 48T/96T

 LMA 人(ren)抗肝細(xi)胞膜(mo)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 LC1 人(ren)抗肝細(xi)胞胞質(zhi)1型(xing)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 LSP 人(ren)抗肝特(te)異(yi)性(xing)脂(zhi)蛋(dan)白抗體 規格(ge)： 48T/96T

 LSP 人(ren)抗肝特(te)異(yi)性(xing)脂(zhi)蛋(dan)白抗體 規格(ge)： 48T/96T

 LKM 人(ren)抗肝腎微粒(li)體抗體 規格(ge)： 48T/96T

 CAM-ab 人(ren)抗鈣調(tiao)素特異(yi)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 ACAST-DⅣ 人(ren)抗鈣蛋(dan)白酶抑素抗體 規格(ge)： 48T/96T

 anti-PIV IgM 人(ren)抗副(fu)流(liu)感病毒(du)IgM抗體 規格(ge)： 48T/96T

 anti-RV IgG 人(ren)抗風(feng)疹(zhen)病毒(du)IgG抗體 規格(ge)： 48T/96T

 ABM-Ab 人(ren)抗肺(fei)泡基(ji)底(di)膜(mo)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 MSA 人(ren)抗紡錘(chui)體抗體 規格(ge)： 48T/96T

 PM-Scl/PM-1 人(ren)抗多(duo)發(fa)性肌(ji)炎硬皮(pi)病抗體 規格(ge)： 48T/96T

 anti-HDV 人(ren)抗丁型肝炎病毒(du)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 PR3 Ab-IgG 人(ren)抗蛋(dan)白酶3抗體IgG 規格(ge)： 48T/96T

 ssDNA 人(ren)抗單鏈DNA抗體/變性(xing)DNA抗體 規格(ge)： 48T/96T

 AMA 人(ren)抗單核細(xi)胞抗體 規格(ge)： 48T/96T

 TRAb 人(ren)抗促(cu)甲(jia)狀腺(xian)素受體抗體 規格(ge)： 48T/96T

 C1q 人(ren)抗補(bu)體1q抗體 規格(ge)： 48T/96T

 anti-HCV 人(ren)抗丙(bing)型(xing)肝炎病毒(du)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 EBMZ 人(ren)抗表(biao)皮(pi)細(xi)胞基(ji)底(di)膜(mo)抗體 規格(ge)： 48T/96T

 anti-typhus-Ab 人(ren)抗斑(ban)疹(zhen)傷寒抗體 規格(ge)： 48T/96T

 AAA 人(ren)抗白(bai)蛋(dan)白抗體 規格(ge)： 48T/96T

EGY48 感(gan)受態細(xi)胞100ul*10 IFNα-Ab 人(ren)抗α幹(gan)擾(rao)素抗體 規格(ge)： 48T/96T

 α-Fodrin IgG/IgA 人(ren)抗α-胞襯蛋(dan)白抗體IgG/IgA 規格(ge)： 48T/96T

人(ren)抗SS-B/La抗體ELISA Kit，48T/96T 人抗SS-B/La抗體ELISA