更(geng)新時間(jian):2025-11-29
C58C1 電感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*50是(shi)采(cai)用(yong)大腸(chang)桿菌經(jing)特(te)殊(shu)工藝處理得到的(de)感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao),可(ke)用(yong)於(yu)DNA 的(de)化學(xue)轉(zhuan)化。使用(yong)pUC19 質粒(li)檢測(ce),轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)可(ke)達108個(ge)轉(zhuan)化子/μg質粒(li)DNA,-70℃保存(cun)3個(ge)月轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)可(ke)保持在(zai)90%以上。
C58C1 電感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*50以(yi)下(xia)是的(de)訂(ding)購信(xin)息儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian):-70℃凍(dong)存(cun)
操(cao)作方(fang)法(fa):
1. 取-80℃保(bao)存(cun)的(de)農(nong)桿菌感(gan)受(shou)態於(yu)室(shi)溫(wen)或(huo)手(shou)心(xin)片(pian)刻(ke)待(dai)其部(bu)分融化,處於(yu)冰水混合狀(zhuang)態時(shi)插入冰中。
2.每(mei)100 μl感(gan)受(shou)態加(jia)入0.01-1 μg質粒(li)DNA(轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)較高(gao),*次使用(yong)前(qian)做預(yu)實(shi)驗(yan)確(que)定所(suo)加(jia)質粒(li)的(de)量),用(yong)手管(guan)底混(hun)勻(yun),依(yi)次於(yu)冰上靜(jing)置5分(fen)鐘、液氮(dan)5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生(sheng)素的(de)LB或(huo)YEB液(ye)體培養基(ji),於(yu)28℃振(zhen)蕩(dang)培(pei)養2~3小(xiao)時。
C58C1 電感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*504. 6000 rpm離(li)心(xin)壹分鐘收(shou)菌,留(liu)取(qu)100 μl左(zuo)右上(shang)清輕輕(qing)吹打(da)重(zhong)懸菌塊(kuai)塗布於(yu)含相應(ying)抗生(sheng)素的(de)LB或(huo)YEB平板(ban)上,倒(dao)置放(fang)於(yu)28℃培(pei)養箱培養2-3天(tian)
註(zhu)意事項(xiang)
1. 加(jia)入質粒(li)時體積不(bu)應(ying)大於(yu)感(gan)受(shou)態體積的(de)1/10;質粒(li)不(bu)純(chun)或(huo)存(cun)在(zai)乙(yi)醇等有(you)機(ji)物(wu)汙(wu)染,轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)急劇(ju)下(xia)降(jiang);質粒(li)增(zeng)大壹倍,轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)下(xia)降(jiang)壹個(ge)數量級(ji)。
2. 混入質粒(li)時應(ying)輕(qing)柔(rou)操(cao)作。轉(zhuan)化高(gao)濃(nong)度的(de)質粒(li)可相應(ying)減少終(zhong)用(yong)於(yu)塗板(ban)的(de)菌量。
C58C1 電感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*503. 平板(ban)上陽性(xing)克(ke)隆(long)密度(du)過(guo)大時(shi),由於(yu)營(ying)養不(bu)足(zu),陽性(xing)克(ke)隆(long)生長(chang)變慢,菌落變小(xiao),為(wei)了獲得(de)大的(de)菌落,應(ying)減少質粒(li)用(yong)量。
4. 濃(nong)度不(bu)應(ying)高(gao)於(yu)25 μg/ml,過(guo)高(gao)的(de)濃(nong)度不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿菌生長(chang),會降(jiang)低其(qi)生(sheng)長(chang)速度和(he)轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)。本(ben)公司(si)感(gan)受(shou)態計(ji)算(suan)轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)時(shi)所用(yong)平板(ban)只(zhi)含有(you)50 μg/ml kan,若所(suo)用(yong)平板(ban)含有(you)20 μg/ml rif則轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)降(jiang)低到(dao)1/2。
5. 培(pei)養基(ji)中(zhong)加入的(de)目的(de)是(shi)防(fang)止(zhi)雜(za)菌生長(chang)、篩(shai)選(xuan)農(nong)桿菌;根據所用(yong)菌株抗性(xing)加(jia)入Ti質粒(li)篩(shai)選(xuan)抗生(sheng)素可(ke)防(fang)止(zhi)Ti質粒(li)丟失,但(dan)Ti質粒(li)篩(shai)選(xuan)抗生(sheng)素不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿菌的(de)轉(zhuan)基(ji)因(yin)操(cao)作,所(suo)以(yi)壹般培(pei)養農(nong)桿菌時不(bu)考慮這(zhe)些(xie)抗生(sheng)素,Ti質粒(li)丟失的(de)概(gai)率極(ji)低(可(ke)以(yi)忽略)。
IL-1sRⅡ 人白(bai)介素1可(ke)溶性(xing)受(shou)體Ⅱ 規格(ge): 48T/96T
IL-1sRⅠ 人白(bai)介素1可(ke)溶性(xing)受(shou)體Ⅰ 規格(ge): 48T/96T
ICE 人白(bai)介素1β轉(zhuan)換(huan)酶(mei) 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-1β 人白(bai)介素1β 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-1α 人白(bai)介素1α 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-18 人白(bai)介素18 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-17 人白(bai)介素17 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-16 人白(bai)介素16 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-15 人白(bai)介素15 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-13 人白(bai)介素13 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-12/P70 人白(bai)介素12 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-12/P40 人白(bai)介素12 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-11 人白(bai)介素11 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-10 人白(bai)介素10 規(gui)格(ge): 48T/96T
IL-1 人白(bai)介素1 規(gui)格(ge): 48T/96T
TR 人靶(ba)向核(he)糖核(he)酸(suan)酶(mei) 規(gui)格(ge): 48T/96T
OTF2B 人八聚(ju)體轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子 規格: 48T/96T
OTF2A 人八聚(ju)體轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子 規格: 48T/96T
ECHO IgM 人艾(ai)柯病毒(du)IgM 規格(ge): 48T/96T
CEF 人癌胚鐵(tie)蛋(dan)白(bai) 規格(ge): 48T/96T
CEA/CD66 人癌胚抗原(yuan) 規格(ge): 48T/96T
人癌基(ji)因(yin)蛋(dan)白(bai)質p190/bcr-abl ELISA Kit,48T/96T 人癌基(ji)因(yin)蛋(dan)白(bai)質p190/bcr-abl ELISA Kit,48T/96T 規(gui)格: 48T/96T
Orexin A 人阿(e)立新A 規格(ge): 48T/96T
AGPs 人阿(e)拉(la)伯(bo)半乳糖(tang)蛋(dan)白(bai) 規格(ge): 48T/96T
POMC 人阿(e)黑(hei)皮(pi)素原(yuan) 規格(ge): 48T/96T
POMC 人阿(e)黑(hei)皮(pi)素原(yuan) 規格(ge): 48T/96T
AO 人吖啶(ding)橙 規格(ge): 48T/96T
IFN-ω 人ω幹擾素 規(gui)格(ge): 48T/96T
Pγ 人γ肽 規(gui)格: 48T/96T
GGT 人γ谷氨酰轉(zhuan)移(yi)酶(mei) 規(gui)格(ge): 48T/96T
γ-ECS 人γ谷氨酰半合成(cheng)酶(mei) 規(gui)格(ge): 48T/96T
IFI16/p16 人γ幹擾素誘(you)導(dao)蛋(dan)白(bai)16/p16 規格(ge): 48T/96T
C58C1 電感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*50GABA 人γ氨基(ji)丁酸(suan) 規(gui)格(ge): 48T/96T
IFN-γ 人γ 幹擾素 規(gui)格(ge): 48T/96T
β-TG 人β血小(xiao)板(ban)球(qiu)蛋(dan)白(bai)/β血栓環(huan)蛋(dan)白(bai) 規格(ge): 48T/96T
BTC 人β細(xi)胞(bao)素 規(gui)格(ge): 48T/96T
人β乳糖(tang)蛋(dan)白(bai)抗體IgG ELISA Kit,48T/96T 人β乳糖(tang)蛋(dan)白(bai)抗體IgG