更新時間(jian):2025-11-29
Ar Qual 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*10是采用大(da)腸桿(gan)菌(jun)經(jing)特殊(shu)工(gong)藝處(chu)理(li)得到(dao)的感受(shou)態(tai)細胞(bao),可(ke)用於(yu)DNA 的化學轉(zhuan)化。使用(yong)pUC19 質(zhi)粒檢測,轉化效率可(ke)達108個(ge)轉(zhuan)化子/μg質粒(li)DNA,-70℃保(bao)存3個月轉(zhuan)化效率可(ke)保持在(zai)90%以(yi)上。
Ar Qual 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*10以(yi)下是的訂(ding)購信息(xi)儲(chu)存條(tiao)件(jian):-70℃凍存
操作方(fang)法(fa):
1. 取-80℃保存的農(nong)桿(gan)菌(jun)感受(shou)態(tai)於(yu)室(shi)溫(wen)或手(shou)心(xin)片(pian)刻(ke)待其部(bu)分(fen)融(rong)化,處(chu)於(yu)冰水(shui)混合狀(zhuang)態(tai)時(shi)插(cha)入冰中(zhong)。
2.每(mei)100 μl感(gan)受(shou)態(tai)加入0.01-1 μg質粒(li)DNA(轉化效率較高,*次使用前(qian)做(zuo)預(yu)實(shi)驗(yan)確(que)定所(suo)加質粒的量),用手(shou)管底(di)混勻,依(yi)次於(yu)冰上(shang)靜置5分(fen)鐘、液氮(dan)5分(fen)鐘、37℃水(shui)浴(yu)5分(fen)鐘、冰浴(yu)5分(fen)鐘。
Ar Qual 感受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*103. 加(jia)入700 μl無抗(kang)生素的LB或YEB液(ye)體培(pei)養(yang)基,於(yu)28℃振(zhen)蕩培養2~3小(xiao)時(shi)。
4. 6000 rpm離心(xin)壹分(fen)鐘收(shou)菌(jun),留(liu)取100 μl左右上清輕(qing)輕(qing)吹打重(zhong)懸菌(jun)塊塗(tu)布於(yu)含(han)相(xiang)應抗(kang)生素的LB或YEB平(ping)板上,倒(dao)置放(fang)於(yu)28℃培(pei)養箱(xiang)培養(yang)2-3天
註意(yi)事項
1. 加入質粒(li)時體積(ji)不應大(da)於(yu)感(gan)受(shou)態(tai)體積的1/10;質粒不(bu)純(chun)或存在(zai)乙醇(chun)等有機物汙染(ran),轉(zhuan)化效率急劇(ju)下(xia)降;質(zhi)粒增(zeng)大壹倍(bei),轉(zhuan)化效率下降壹個(ge)數(shu)量(liang)級(ji)。
Ar Qual 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*102. 混入質粒(li)時應輕(qing)柔(rou)操作。轉(zhuan)化高濃(nong)度的質粒可(ke)相(xiang)應減(jian)少終用(yong)於(yu)塗(tu)板的菌(jun)量。
3. 平(ping)板上陽性(xing)克(ke)隆密度過大時(shi),由於(yu)營(ying)養(yang)不(bu)足(zu),陽性(xing)克(ke)隆生長變慢,菌(jun)落變(bian)小(xiao),為(wei)了獲(huo)得大(da)的菌(jun)落,應減(jian)少質粒(li)用量(liang)。
4. 濃(nong)度不應高於(yu)25 μg/ml,過高的濃度不利(li)於(yu)農(nong)桿(gan)菌(jun)生長,會降低(di)其生長速(su)度和(he)轉(zhuan)化效率。本公司(si)感受(shou)態(tai)計算轉化效率時所(suo)用平(ping)板只含(han)有50 μg/ml kan,若(ruo)所(suo)用平(ping)板含(han)有20 μg/ml rif則轉(zhuan)化效率降低(di)到(dao)1/2。
5. 培養基中(zhong)加(jia)入的目的是防止(zhi)雜(za)菌(jun)生長、篩選農(nong)桿(gan)菌(jun);根據(ju)所(suo)用菌(jun)株抗性(xing)加(jia)入Ti質粒(li)篩選抗生(sheng)素可(ke)防止Ti質(zhi)粒丟(diu)失,但Ti質粒(li)篩(shai)選抗生(sheng)素不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿(gan)菌(jun)的轉基因操作,所(suo)以(yi)壹般(ban)培養農(nong)桿(gan)菌(jun)時不(bu)考慮這些抗生(sheng)素(su),Ti質粒(li)丟失的概率極(ji)低(可(ke)以(yi)忽略)。
HGF 大鼠(shu)肝(gan)細胞(bao)生(sheng)長因子 規格: 48T/96T
SCFR 大(da)鼠幹(gan)細胞(bao)因(yin)子受(shou)體(ti) 規格: 48T/96T
SCF/MGF 大(da)鼠幹(gan)細胞(bao)因(yin)子/肥大(da)細胞(bao)生(sheng)長因子 規格: 48T/96T
IP-10/CXCL10 大(da)鼠幹(gan)擾素(su)誘(you)導蛋白(bai)10 規格: 48T/96T
CR 大(da)鼠鈣(gai)結合蛋(dan)白(bai) 規格: 48T/96T
CAM 大(da)鼠鈣(gai)調素(su) 規格: 48T/96T
CaN 大(da)鼠鈣(gai)調磷(lin)酸(suan)酶 規格: 48T/96T
CAMK 2 大(da)鼠鈣(gai)/鈣(gai)調素(su)依(yi)賴(lai)性(xing)蛋(dan)白(bai)激(ji)酶2 規格: 48T/96T
CPSA 大(da)鼠復(fu)合前(qian)列腺特異性(xing)抗(kang)原 規格: 48T/96T
sIgA 大(da)鼠分(fen)泌型(xing)免(mian)疫球(qiu)蛋白A 規格: 48T/96T
SP-A 大(da)鼠肺(fei)表面活性(xing)物(wu)質(zhi)相(xiang)關蛋(dan)白A 規格: 48T/96T
DPPⅣ 大(da)鼠二肽(tai)基肽(tai)酶Ⅳ 規格: 48T/96T
CA 大(da)鼠兒(er)茶酚(fen)胺 規格: 48T/96T
DAT 大(da)鼠多(duo)巴(ba)胺轉運蛋白 規格: 48T/96T
D2R 大(da)鼠多(duo)巴(ba)胺D2受(shou)體(ti) 規格: 48T/96T
D1R 大(da)鼠多(duo)巴(ba)胺D1受(shou)體(ti) 規格: 48T/96T
D1R 大(da)鼠多(duo)巴(ba)胺D1受(shou)體(ti) 規格: 48T/96T
DA 大(da)鼠多(duo)巴(ba)胺 規格: 48T/96T
TE 大(da)鼠端粒(li)酶 規格: 48T/96T
M-AChR 大(da)鼠毒(du)蕈堿(jian)型(xing)乙酰(xian)受(shou)體(ti) 規格: 48T/96T
AZT 大(da)鼠 規格: 48T/96T
AIF 大(da)鼠雕(diao)亡(wang)誘(you)導因子 規格: 48T/96T
FASL 大(da)鼠雕(diao)亡(wang)相(xiang)關因(yin)子配體(ti) 規格: 48T/96T
FAS/CD95 大(da)鼠雕(diao)亡(wang)相(xiang)關因(yin)子 規格: 48T/96T
FⅧAg 大(da)鼠第(di)八因子相(xiang)關抗(kang)原 規格: 48T/96T
Resistin 大(da)鼠抵抗(kang)素 規格: 48T/96T
HIF-1α 大(da)鼠低(di)氧誘(you)導因子1α 規格: 48T/96T
LDL-IC 大(da)鼠低(di)密(mi)度脂(zhi)蛋(dan)白免(mian)疫復(fu)合物(wu) 規格: 48T/96T
大(da)鼠的牛(niu)血(xue)清白蛋白(bai)殘留(liu)檢測ELISA Kit,48T/96T 大鼠的牛(niu)血(xue)清白蛋白(bai)殘留(liu)檢測ELISA Kit,48T/96T 規格: 48T/96T
PP 大(da)鼠蛋(dan)白(bai)磷(lin)酸(suan)酶 規格: 48T/96T
PKB 大(da)鼠蛋(dan)白(bai)激(ji)酶B 規格: 48T/96T
CCK 大(da)鼠膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素(su)/腸(chang)促(cu)肽(tai) 規格: 48T/96T
CETP 大(da)鼠酯轉(zhuan)移(yi)蛋(dan)白(bai) 規格: 48T/96T
Ar Qual 感(gan)受(shou)態(tai)細胞(bao)100ul*10 MCP-4/CCL13 大(da)鼠單核細胞(bao)趨化蛋白(bai)4 規格: 48T/96T
MCP-3/CCL7 大(da)鼠單核細胞(bao)趨化蛋白(bai)3 規格: 48T/96T
MCP-2/CCL8 大(da)鼠單核細胞(bao)趨化蛋白(bai)2 規格: 48T/96T
MCP-1/CCL2/MCAF 大(da)鼠單核細胞(bao)趨化蛋白(bai)1 規格: 48T/96T