密(mi)蒙(meng)花PCR鑒定試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)書(shu)

特(te)點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用戶(hu)只(zhi)需要(yao)提(ti)供(gong)病(bing)毒樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據地(di)黃(huang)保(bao)守序(xu)列(lie)設(she)計(ji)的專(zhuan)壹性(xing)引物(wu)，與相(xiang)關病(bing)毒無交(jiao)叉反應(ying)。
3. 靈敏(min)度可(ke)以達到幾百(bai)拷(kao)貝/反應(ying)。
4. 壹管(guan)式(shi)熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR 檢(jian)測(ce)，避免後續汙染。
5. 本試(shi)劑盒足夠 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體(ti)系的(de)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只(zhi)適用於(yu)科(ke)研(yan)，不能(neng)用於臨床(chuang)診(zhen)斷。

使(shi)用方(fang)法：
壹、樣(yang)品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與(yu)預(yu)培養按(an)照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與(yu)預(yu)培養按(an)照(zhao)《食(shi)品(pin)衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗(yan)阪崎腸(chang)桿菌(jun)檢(jian)驗(yan)要(yao)求進行。
2、血液樣(yang)品(pin)：用(yong)無(wu)菌(jun)註(zhu)射(she)器(qi)抽(chou)取受檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈(mai)血(xue)2mL，註入(ru)無菌(jun)EDTA2Na(或檸檬酸(suan)鈉)抗凝(ning)管，立即(ji)混(hun)勻。
3、糞便樣(yang)品(pin)：取糞(fen)便置(zhi)於滅菌(jun)的(de)收(shou)集(ji)管(guan)中送(song)檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位(wei)樣(yang)品(pin)：取發(fa)病(bing)部(bu)位(wei)新鮮(xian)滲出(chu)物(wu)、粘(zhan)液膿血送(song)檢(jian)。
壹、稀(xi)釋 PCR 陽性(xing)對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍稀(xi)釋度為(wei)例(li)）
1. 註意(yi)：由(you)於標準(zhun)品(pin)濃(nong)度非(fei)常高，因(yin)此(ci)下列(lie)稀(xi)釋操(cao)作壹定(ding)要(yao)在獨(du)立的區(qu)域(yu)進行，千萬不能(neng)汙染樣(yang)品(pin)或(huo)本(ben)試劑盒的(de)其他(ta)成分(fen)）。為(wei)增加產(chan)品(pin)穩定性(xing)和(he)避免擴(kuo)散傳染(ran)性(xing)病(bing)原，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提(ti)供(gong)活(huo)體(ti)樣(yang)品(pin)做(zuo)陽性(xing)對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供(gong)可以直(zhi)接(jie)使(shi)用的(de) DNA段作為(wei)陽性(xing)對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個離(li)心管，分(fen)別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍(qiang)頭分(fen)別(bie)加入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀(xi)釋液（用帶(dai)芯槍(qiang)頭，下同(tong)）。
4. 在 7 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
5. 換槍(qiang)頭，在 6 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋所得)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
6. 換槍(qiang)頭，在 5 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)到 5 號管中，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
7. 重(zhong)復(fu)上(shang)面的(de)操(cao)作直(zhi)到得到 6 個稀(xi)釋度的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
註：上(shang)述(shu)樣(yang)品(pin)建(jian)議(yi)經過(guo)增菌(jun)後，收集培養物用於檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提(ti)取：
可采(cai)用PCR試劑盒配(pei)備(bei)的DNA抽提(ti)液，按(an)以下說(shuo)明(ming)進行DNA核酸(suan)的粗(cu)提(ti)。也可(ke)采購上(shang)海澤葉生(sheng)物科(ke)技(ji)有限(xian)公司(si)生(sheng)產的DNA提(ti)取試(shi)劑盒(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒光(guang)配(pei)套(tao))或其他(ta)合適的商業化產品(pin)，並(bing)按(an)照(zhao)相(xiang)應試劑盒說(shuo)明(ming)進行操(cao)作。
1、液體(ti)培養物：取液體(ti)培養物100μL加到1.5mL無菌(jun)離(li)心管中，8000rpm離(li)心3min，盡量(liang)吸(xi)棄上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
2、固體(ti)培養物：挑(tiao)取單克隆菌(jun)落(luo)與(yu)50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
3、糞便樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取米(mi)粒(li)大小糞(fen)便於滅菌(jun)離(li)心管中，加入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振蕩(dang)混勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘(zhong)，棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
4、其他(ta)液體(ti)標本：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
註：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和(he)陰(yin)性(xing)對照(zhao)為(wei)已(yi)經抽(chou)提(ti)好的(de)核酸(suan)(無需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接(jie)取5μL加入(ru)到反應(ying)體(ti)系中即(ji)可(ke)。由(you)於陽性對(dui)照(zhao)濃(nong)度較(jiao)高(gao)，建(jian)議(yi)在樣(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)區(qu)域(yu)加入(ru)陽性(xing)對照(zhao)。 
實驗(yan)流(liu)程：
1. 整個(ge)檢(jian)測(ce)過(guo)程(cheng)應(ying)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求分(fen)別(bie)在試(shi)劑準(zhun)備(bei)區(qu)、樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu)和(he)PCR擴增區(qu)進行操(cao)作，各區(qu)實驗(yan)服、儀(yi)器(qi) 、耗材(cai)應獨(du)立使(shi)用，不(bu)能(neng)混用；實(shi)驗(yan)用(yong)吸(xi)頭采用帶(dai)濾(lv)芯吸(xi)頭；樣(yang)本(ben)處理(li)區(qu)應配(pei)有生(sheng)物安(an)全(quan)櫃，樣(yang)本(ben)處理(li)在生(sheng)物安(an)全(quan)櫃中進行操(cao)作；三(san)個(ge)區(qu)應該(gai)配(pei)有紫(zi)外線(xian)殺(sha)菌(jun)裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為(wei)避免RNA降解(jie)，樣(yang)本(ben)處理(li)過(guo)程(cheng)應(ying)在0-4℃條件下操(cao)作，且完(wan)成實(shi)驗(yan)後立即(ji)上(shang)機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本(ben)處理(li)過(guo)程(cheng)中使(shi)用的(de)器(qi)具(ju)耗材(cai)應經過(guo)無(wu)核(he)酶(mei)處理(li)。
3. 每(mei)次(ci)實驗(yan)應(ying)該(gai)設置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試劑盒所有試(shi)劑在使(shi)用前(qian)應(ying)該(gai)在常(chang)溫下充分(fen)融化混勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬時(shi)離(li)心。
5. 試劑盒內(nei)所配(pei)陰(yin)性(xing)和(he)陽性對(dui)照(zhao)在壹次(ci)使(shi)用前(qian)應(ying)全(quan)部(bu)轉移(yi)至(zhi)標本準(zhun)備(bei)區(qu)，並(bing)單獨(du)存放(fang)。
6. 為(wei)防止(zhi)熒光(guang)幹擾，應避免裸手直(zhi)接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反應(ying)管(guan)，並(bing)應(ying)避免在PCR反應(ying)管(guan)上(shang)進行任(ren)何(he)標記(ji)。
7. 儀(yi)器(qi) 擴增相(xiang)關參(can)數應(ying)按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關要(yao)求進行設置(zhi)；不同批(pi)號試劑不能(neng)混用。
8. ABI系列(lie)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參(can)數設(she)置(zhi)中不(bu)選ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基(ji)因選擇(ze)None。
9. 實驗(yan)過(guo)程(cheng)中產(chan)品(pin)的(de)廢(fei)棄物(wu)應(ying)該(gai)進行無害化處理(li)後方(fang)可丟棄。
儲存(cun)條件：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集(ji)、處理(li)及(ji)保存(cun)方(fang)法
1. 血清(qing)：使(shi)用不(bu)含熱(re)原和(he)內毒素(su)的(de)試管，操(cao)作過(guo)程(cheng)中避免任(ren)何(he)細胞(bao)刺激，收集(ji)血(xue)液後，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)將血(xue)清(qing)和(he)紅細胞(bao)迅速(su)小(xiao)心地分(fen)離(li)。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或肝(gan)素(su)抗(kang)凝。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
3. 細胞(bao)上(shang)清(qing)液：3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒(li)和(he)聚合物。
4. 組織勻漿：將(jiang)組織加入(ru)適量生(sheng)理鹽(yan)水搗碎。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
5. 保存(cun)：如果樣(yang)本(ben)收(shou)集後不及(ji)時檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍存(cun)於(yu)-20℃，避免反復(fu)凍(dong)融，在室(shi)溫下解(jie)凍並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻(yun)地充分(fen)解(jie)凍。
(二水(shui)）  Formoterol fumarate   質量(liang)規(gui)格(ge)：>98.5%,二水(shui)合物 MouseIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒小(xiao)鼠(shu)白介素(su)1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(gui)格(ge)：96T/48T

(無水(shui))  Formoterol fumarate   質量(liang)規(gui)格(ge)：>98.5%,無水(shui),EP 小鼠(shu)神經營(ying)養因子3(-3)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： -3 ELISA Kit

法羅(luo)培南(鈉)(2.5水)  Faropenem   質量(liang)規(gui)格(ge)：度>99.0%,BR 小鼠(shu)血管(guan)內皮(pi)細胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子C(VEGF-C)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAkit 96T/48T

(標準(zhun)品(pin))  Faropenem   質量(liang)規(gui)格(ge)：標準(zhun)品(pin)用(yong)於(yu)含量測(ce)定(ding) 人肝細胞(bao)核因(yin)子1β(HNF-1B)試劑盒 Human HNF-1B ELISA Kit

  Orlistat(synthesis)  質量(liang)規(gui)格(ge)：≥98.0%,BR RatHistamine,HISELISAKit大鼠(shu)組胺(HIS)ELISA試劑盒規(gui)格(ge)：96T/48T

鈉；SV鈉  Rifamycin  salt  質量(liang)規(gui)格(ge)：>900IU/mg ,BR BMMY培養基(ji)100/500毫(hao)升(sheng)

  Octreotide acetate  質量(liang)規(gui)格(ge)：≥98%,BR MouseIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒小(xiao)鼠(shu)白介素(su)2(IL-2)ELISA試劑盒規(gui)格(ge)：96T/48T

S(+)-2-氨(an)基(ji)-1-丁醇  (S)-(+)-2-Ami-butanol   質量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,液態,0.944 g/mL ,25℃ 小鼠(shu)神經型合成酶(nNOS/)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： nNOS/ ELISA Kit

D-鞘氨(an)醇  trans-D-erythro-sphingosine  質量(liang)規(gui)格(ge)：度≥98% 小鼠(shu)血管(guan)內皮(pi)細胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子B(VEGF-B)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAkit 96T/48T

糖脂(zhi);植物(wu)鞘胺(an)醇  ribophytosphingosine   質量(liang)規(gui)格(ge)：≥98%,進口原裝(zhuang) 人肝素(su)-血小(xiao)板因(yin)子4復合物抗體(ti)(IgG)試劑盒 Human Heparin-Platelet factor4 Complex aibody IgG ELISA Kit
CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠(shu)β2糖蛋白1抗體(ti)IgA/G/M規(gui)格(ge)：48T/96T  2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone  中文(wen)名：2-氨(an)基(ji)-5-硝(xiao)基(ji)-2'-氯二苯甲酮  分(fen)子(zi)式(shi)：C13H9ClN2O3 

CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(HumanBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體(ti)IgA/G/M規(gui)格(ge)：48T/96T  2-Acetylfluorene  中文(wen)名：2-乙酰(xian)芴  分(fen)子(zi)式(shi)：C15H12O 

CLIAKitforBeta2-GP1AbIgM(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgM)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體(ti)IgM規(gui)格(ge)：48T/96T  2-Acetamidothiazole  中文(wen)名：2-乙酰(xian)氨(an)基(ji)噻唑  分(fen)子(zi)式(shi)：C5H6N2OS 

CLIAKitforBeta2-GP1AbIgG(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgG)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體(ti)IgG規(gui)格(ge)：48T/96T  22-Dehydroclerosterol glucoside  中文(wen)名：  分(fen)子(zi)式(shi)：C35H56O6 

CLIAKitforBeta2-GP1AbIgA(HumanBeta2-Glycoprotein1aibodyIgA)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體(ti)IgA規(gui)格(ge)：48T/96T  20-Hydroxyecdysone  中文(wen)名：20-羥(qiang)基(ji)蛻皮(pi)甾酮  分(fen)子(zi)式(shi)：C27H44O7
木蝴蝶苷(gan)B（標準(zhun)品(pin)）  Oroxin B  質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品(pin) 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)α(TNFα)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： TNFα ELISA Kit

  Fosfomycin tromethamine  質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BR 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)α(TNF-α)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： TNF-α ELISA Kit

(標準(zhun)品(pin))  Fosfomycin tromethamine  質量(liang)規(gui)格(ge)：含量測(ce)定(ding) 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)β(TNF-β)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 96T/48T

木犀(xi)草(cao)苷(標準(zhun)品(pin))  Cynaroside  質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品(pin) 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)β(TNF-β)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： TNF-β ELISA Kit

木香(xiang)烴(ting)內(nei)酯(zhi)(標準(zhun)品(pin))  Costundide  質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品(pin) 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)可溶性受體(ti)Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKIT 96T/48T

擬人參皂(zao)苷(gan)F11(標準(zhun)品(pin))  Pseudoginsenoside F11  質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品(pin) 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)可溶性受體(ti)Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： TNFsR-Ⅰ ELISA Kit

擬人參皂(zao)苷(gan)RT5(標準(zhun)品(pin))  Pseudoginsenoside RT5  質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品(pin) 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)可溶性受體(ti)Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKIT 96T/48T

（標準(zhun)品(pin)）  Allantoin  質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品(pin) 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)可溶性受體(ti)Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： TNFsR-Ⅱ ELISA Kit

檸檬苦素(su)；吳(wu)茱萸內酯(zhi)(標準(zhun)品(pin),吳茱(zhu)萸提(ti)取)  Limonin  質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準(zhun)品(pin),吳茱(zhu)萸提(ti)取 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)配(pei)體(ti)相關分(fen)子(zi)1(TL1)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： TL1 ELISA Kit

檸檬苦素(su)，黃(huang)柏(bai)內酯(zhi)(標準(zhun)品(pin),橙皮(pi)提(ti)取)   Limonin  質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%,標準(zhun)品(pin),橙皮(pi)提(ti)取 小鼠(shu)壞死(si)因子(zi)受體(ti)超家族(zu)成員11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA試劑盒 ，英文(wen)名： TNFRSF11A/RANK ELISA Kit
密(mi)蒙(meng)花PCR鑒定試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)書(shu)Octacosanoic acid (Montanic acid)，certif N-Nitrosoanabasine 506-48-9 純品(pin)型，50MG 特(te)征形態 固態

正二(er)十(shi)八(ba)烷(C28) 標準(zhun)品(pin) Ketoconazole 630-02-4 純品(pin)型，0.25G 特(te)征形態 固態

八(ba)氯苯乙烯 標準(zhun)品(pin) Diaveridine 29082-74-4 純品(pin)型，25MG 特(te)征形態 固態