PMI基因(yin)核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒（PCR-熒光(guang)探針法）

訂(ding)購(gou)信息：
 產品名稱：PMI基因(yin)核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒（PCR-熒光(guang)探針法）
規(gui)格：48T  0.1PCR管(guan)
編號(hao)：BH-P97073
分類：PCR-熒光(guang)探針法
儲存條件(jian)：-20℃避(bi)光(guang)保存，避(bi)免反(fan)復凍(dong)融。
運輸(shu)：低(di)溫、避(bi)光(guang)，快遞免(mian)費(fei)送(song)貨上(shang)門(men)。
產品特(te)點：
◇高特(te)異(yi)性(xing)：與其(qi)他病毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)，無(wu)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)擴增(zeng)；
◇高靈敏度：檢(jian)測(ce)靈敏度可(ke)達(da)10~100拷貝；
◇操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian)：該系列(lie)所(suo)有試劑均(jun)采用相(xiang)同(tong)的體系和(he)條件(jian)，可(ke)同(tong)時進(jin)行多個(ge)檢(jian)測(ce)；
◇高通量(liang)：多(duo)種雙重PCR檢(jian)測(ce)以及(ji)三(san)重(zhong)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒。

準備(bei)物(wu)品(pin)：
清理(li)液（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色(se)液(ye)（t B）                                   微(wei)升
稀釋液(ye)（C）                                   毫(hao)升
溶解液（tD）                                   毫(hao)升
產品(pin)說明書                                   1份(fen)
使(shi)用及效果：
PCR反應(ying)特(te)點
(1) 特(te)異(yi)性(xing)強
PCR反(fan)應(ying)的特(te)異(yi)性(xing)決定(ding)因素(su)為(wei)：
①引(yin)物(wu)與模板DNA特(te)異(yi)正確的結合(he)；
②堿基配對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合酶合成反應(ying)的忠實性(xing)；
④靶(ba)基因(yin)的特(te)異(yi)性(xing)與保守性(xing)。
其(qi)中引(yin)物(wu)與模板的正確結合是(shi)關(guan)鍵。引物(wu)與模板的結合(he)及(ji)引物(wu)鏈(lian)的延伸(shen)是(shi)遵(zun)循堿(jian)基配對(dui)原(yuan)則的。聚(ju)合酶合成反應(ying)的忠實性(xing)及Taq DNA聚(ju)合酶耐高溫(wen)性(xing)，使(shi)反(fan)應(ying)中模(mo)板與引物(wu)的結合(he)(復性(xing))可(ke)以在(zai)較(jiao)高的溫度下(xia)進(jin)行，結合的特(te)異(yi)性(xing)大大(da)增(zeng)加，被擴(kuo)增(zeng)的靶基因(yin)片段也(ye)就(jiu)能(neng)保持很(hen)高的正確度。再通過(guo)選(xuan)擇(ze)特(te)異(yi)性(xing)和保守性(xing)高的靶基因(yin)區，其(qi)特(te)異(yi)性(xing)程度就(jiu)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wu)的生(sheng)成量(liang)是(shi)以指數(shu)方式增(zeng)加的，能(neng)將皮(pi)克(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的起始(shi)待(dai)測(ce)模(mo)板擴增(zeng)到(dao)微(wei)克(ug=10-6g)水平。能(neng)從100萬個(ge)細胞中檢(jian)出壹(yi)個(ge)靶(ba)細胞；在(zai)病毒(du)的檢(jian)測(ce)中，PCR的靈敏度可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑形成(cheng)單(dan)位)；在(zai)細菌學中zui小(xiao)檢(jian)出率(lv)為(wei)3個(ge)細菌。
(3) 簡(jian)便(bian)、快速
PCR反(fan)應(ying)用耐高溫(wen)的Taq DNA聚(ju)合酶，壹(yi)次(ci)性(xing)地將反(fan)應(ying)液加好(hao)後，即(ji)在DNA擴(kuo)增(zeng)液和水浴鍋上(shang)進(jin)行變(bian)性(xing)-退火(huo)-延伸(shen)反(fan)應(ying)，壹(yi)般在2～4 小(xiao)時(shi)完成擴增(zeng)反應(ying)。擴增(zeng)產物(wu)壹(yi)般用電泳分(fen)析(xi)，不(bu)壹(yi)定要用同(tong)位素(su)，無(wu)放(fang)射(she)性(xing)汙染(ran)、易(yi)推(tui)廣。
(4) 對(dui)標(biao)本的純(chun)度要求低(di)
不(bu)需(xu)要分(fen)離(li)病毒(du)或細菌及培養細胞，DNA 粗制(zhi)品(pin)及總(zong)RNA均(jun)可(ke)作(zuo)為(wei)擴(kuo)增(zeng)模板。可(ke)直(zhi)接用臨床標(biao)本如(ru)血(xue)液(ye)、體腔液(ye)、洗(xi)嗽(sou)液、毛發、細胞、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概論(lun)。
CL-0458U-118 MG(腦星(xing)形膠(jiao)質母細胞瘤(liu))5×106cells/瓶×2甲磺酸齊拉(la)西(xi)酮（）Ziprasidone mesilateHPLC法含量(liang)測(ce)定(ding)

腦微(wei)血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞鹽(yan)酸美(mei)利(li)曲(qu)辛(xin)（）Melitracen 含量(liang)測(ce)定(ding)

臍(qi)靜(jing)脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞(膀(pang)胱(guang)癌細胞汙染(ran));ECV-304 [ECV304;ECV 304] 腸(chang)靜(jing)脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞*培養基 100mL咪唑斯(si)汀(ting)（）MizolastineHPLC法含量(liang)測(ce)定(ding)

前列(lie)腺(xian)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞HPrF地（）DesloratadineUV法含量(liang)測(ce)定(ding)

CLEC4D Others Rat 大鼠(shu) CLEC4D / CLECSF8 細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 糠酸莫(mo)米(mi)（）Mometasone Furoate鑒(jian)別(bie)
CM-R025大(da)鼠(shu)外周(zhou)血白(bai)細胞*培養基100mL雌酚(fen)酮(tong)/雌酮(tong)（）HPLC>98%,Estrone

DPEP2 Others Human  DPEP2 / MBD-2 細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 鹽酸>800μg/mg,USP,BRClindamycin HCl

絨(rong)毛間(jian)充質成纖(xian)維(wei)細胞HVMF高峰(feng)來(lai)源於米(mi)曲(qu)黴(4000U/g)BR,4000u/gTaka-Diastase from Aspergillus oryzae

JEG-3-VP16-TNFa細胞，TNFa轉染(ran)耐(nai)VP16絨(rong)癌細胞 兔(tu)角膜(mo)前(qian)基質層成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞,RCFBF細胞 微(wei)血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞HMMEC高峰(feng)來(lai)源於米(mi)曲(qu)黴(100U/mg )BR,100 U/mgTaka-Diastase from Aspergillus oryzae

IR983F(大鼠(shu)骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2甘(gan)油醛(quan)-3-1酸脫氫酶(mei)BR,75U/MGGlyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase
PMI基因(yin)核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒（PCR-熒光(guang)探針法）MAPK1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 泊沙(sha)康唑-d4美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Posaconazole-d4

CL-0121Hut-102(皮(pi)膚T瘤細胞)5×106cells/瓶×2標(biao)記d6美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Riimin - Labeled d6

U251膠(jiao)質瘤細胞 內(nei)膜(mo)癌(ai)細胞，HEC-1B細胞 MDA-MB-468(癌(ai)細胞)羅(luo)匹(pi)尼(ni)羅N-氧化(hua)物(wu)美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Ropinirole N-Oxide

腎(shen)上(shang)腺(xian)皮(pi)質腺癌(ai)細胞;NCI-H295R3-氧(yang)羅(luo)匹(pi)尼(ni)羅鹽(yan)酸鹽美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)3-Oxo Ropinirole

HA Others H7N7 甲型流(liu)感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Bisoprolol
檢(jian)測(ce)步(bu)驟(zhou)：
壹(yi)、 試(shi)劑的準備(bei)
從試劑盒中取出熒光(guang)PCR反(fan)應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上融化(hua)並(bing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻後，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設所需要的PCR反(fan)應(ying)管管數(shu)為(wei)N(N=樣本(ben)數(shu)+1管陰性(xing)對照(zhao)+1管陽(yang)性(xing)對照(zhao))，每(mei)個(ge)測(ce)試(shi)反應(ying)體系配制(zhi)如(ru)下表：
試(shi)劑 每(mei)個(ge)反(fan)應(ying)加入的量(liang) N個(ge)反(fan)應(ying)加入的量(liang)
熒光(guang)PCR反(fan)應(ying)液 14µL N×14µL
酶混(hun)合物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好(hao)各(ge)試(shi)劑的使(shi)用量(liang)，加(jia)入壹(yi)適(shi)當體(ti)積潔(jie)凈(jing)離(li)心管(guan)中，充(chong)分(fen)混(hun)勻，10000rpm離心(xin)10s，向設定的N個(ge)PCR反應(ying)管中分(fen)別(bie)加入15μL熒光(guang)PCR反(fan)應(ying)液，向每(mei)管中加(jia)入處(chu)理(li)後樣品(pin)或陰(yin)性(xing)對照(zhao)(NTC)和陽(yang)性(xing)對照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離(li)心10秒。
7.2 qPCR反(fan)應(ying)條件(jian)
將各(ge)反(fan)應(ying)管放入定量(liang)PCR儀(yi)器的反應(ying)槽內(nei)。
循環(huan)條件(jian):
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸(shen)時(shi)收集(ji)熒光(guang)信(xin)號。報(bao)告基團：設置為(wei)FAM。淬(cui)滅基團：NONE，請勿選(xuan)擇(ze)ROX參(can)比(bi)熒光(guang)。