LBA4404 感(gan)受態細胞(bao)100ul*50

LBA4404 感(gan)受態細胞(bao)100ul*50 操(cao)作(zuo)方(fang)法（以下(xia)操(cao)作(zuo)均(jun)按無(wu)菌(jun)條件的(de)標準進行）
1 取(qu)感(gan)受態細胞(bao)置於冰(bing)浴(yu)中(zhong)，如需分(fen)裝(zhuang)可(ke)將剛(gang)融化(hua)細胞(bao)懸液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao)無菌(jun)預(yu)冷(leng)的(de)離(li)心管(guan)中，置於冰(bing)浴(yu)中(zhong)。
●  壹次(ci)轉(zhuan)化感(gan)受態細胞(bao)的(de)建(jian)議(yi)用量(liang)為50-100 μl，可(ke)以根(gen)據實(shi)際(ji)情(qing)況分(fen)裝(zhuang)使(shi)用。應(ying)註(zhu)意所(suo)用DNA 體積(ji)不(bu)要超(chao)過感(gan)受態細胞(bao)懸液(ye)體積(ji)的(de)十(shi)分(fen)之(zhi)壹(yi)。
以下(xia)實(shi)驗(yan)以100 μl感(gan)受態細胞(bao)為例(li)。
LBA4404 感(gan)受態細胞(bao)100ul*50 向感(gan)受態細胞(bao)懸液(ye)中加(jia)入(ru)目(mu)的(de)DNA（100 μl 的(de)感(gan)受態細胞(bao)能夠(gou)被1 ng 超螺(luo)旋質粒DNA 所(suo)飽(bao)和），輕輕旋轉(zhuan)離(li)心管(guan)以混勻(yun)內容物(wu)，在冰(bing)浴(yu)中(zhong)靜(jing)置(zhi)30 分(fen)鐘(zhong)。
3 將(jiang)離(li)心管(guan)置於42℃水浴(yu)中(zhong)放置(zhi)60-90 秒，然(ran)後快(kuai)速將(jiang)管(guan)轉(zhuan)移(yi)到(dao)冰(bing)浴(yu)中(zhong)，使細胞(bao)冷(leng)卻(que)2-3 分(fen)鐘(zhong)，該(gai)過程不(bu)要搖(yao)動離(li)心管(guan)。
4 向每(mei)個離(li)心管(guan)中加(jia)入(ru)900 μl 無(wu)菌(jun)的(de)SOC 或(huo)LB 培(pei)養(yang)基(ji)（不(bu)含(han)抗生素）， 混勻(yun)後置(zhi)於37℃搖(yao)床振(zhen)蕩(dang)培(pei)養(yang)1 小(xiao)時(shi)（160-220 轉(zhuan)/分(fen)鐘(zhong)），目(mu)的(de)是使質(zhi)粒上相(xiang)關(guan)的(de)抗性標記(ji)基因表(biao)達(da)，使菌(jun)體復蘇(su)。
LBA4404 感(gan)受態細胞(bao)100ul*505 將離(li)心管(guan)內容物(wu)混勻(yun)，吸(xi)取(qu)100 μl 已轉(zhuan)化的(de)感(gan)受態細胞(bao)加(jia)到(dao)含(han)相應抗生素的(de)SOB 或(huo)LB 固體瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)上，用無(wu)菌(jun)的(de)彎(wan)頭(tou)玻棒(bang)輕輕的(de)將(jiang)細胞(bao)均(jun)勻(yun)塗(tu)開(kai)。將(jiang)平(ping)板置(zhi)於室溫(wen)直至(zhi)液體被吸收，倒(dao)置平(ping)板，37℃培(pei)養(yang)12-16 小(xiao)時(shi)。
●  塗(tu)布用量(liang)可根(gen)據具(ju)體實(shi)驗(yan)來調整(zheng)。如(ru)轉(zhuan)化的(de)DNA 總(zong)量(liang)較(jiao)多，可取(qu)更少(shao)量(liang)轉(zhuan)化產物塗布(bu)平(ping)板；反之(zhi)，如轉(zhuan)化的(de)DNA 總(zong)量(liang)較(jiao)少(shao)，可(ke)取(qu)200-300 μl 轉(zhuan)化產物塗布(bu)平(ping)板。如(ru)果預(yu)計(ji)的(de)克(ke)隆(long)較(jiao)少(shao)，可(ke)通(tong)過(guo)離(li)心（4,000 rpm, 2分(fen)鐘(zhong)）後吸(xi)除部(bu)分(fen)培(pei)養(yang)液(ye)，懸(xuan)浮菌(jun)體後將(jiang)其(qi)塗布(bu)於壹(yi)個平(ping)板中(zhong)。（塗布(bu)剩(sheng)余(yu)的(de)菌(jun)液可置於4℃保(bao)存(cun)，如果次(ci)日的(de)轉(zhuan)化菌(jun)落(luo)數過少(shao)可(ke)以將(jiang)剩(sheng)下的(de)菌(jun)液再(zai)塗布(bu)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)板(ban)）
 註(zhu)意事項
1. 感(gan)受態細胞(bao)應保(bao)存(cun)在 -70℃，不(bu)可多次(ci)凍(dong)融(rong)和放置時(shi)間(jian)過長，以避(bi)免(mian)降低感(gan)受態細胞(bao)的(de)轉(zhuan)化效率(lv)。
2. 進行轉(zhuan)化操(cao)作(zuo)時(shi)，應(ying)根據相應溫(wen)度(du)及(ji)無(wu)菌(jun)條件的(de)要(yao)求(qiu)進行。
3 為(wei)防止(zhi)轉(zhuan)化實(shi)驗(yan)不(bu)成功，可(ke)以保(bao)留(liu)部(bu)分(fen)連(lian)接(jie)反應(ying)液，以重(zhong)新(xin)轉(zhuan)化，將損失(shi)降到(dao)低。
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LBA4404 感(gan)受態細胞(bao)100ul*50 小(xiao)鼠17-酮(tong)類(lei)固醇(chun)(17-KS)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英(ying)文(wen)名稱;   17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit 購買我(wo)公司(si)ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質(zhi)量(liang)，靈敏性高(gao)、特(te)異性(xing)強、重復性(xing)好等優點(dian)已(yi)經(jing)得到(dao)廣(guang)大客戶的(de)認(ren)可(ke)，您(nin)可(ke)放心，且(qie)我司(si)有專(zhuan)門的(de)售(shou)後部(bu)門對您進行全(quan)線(xian)跟蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 小(xiao)鼠17-酮(tong)類(lei)固醇(chun)(17-KS)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)