更(geng)新時(shi)間(jian):2025-11-29
AGL1 電(dian)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞50ul*50菌(jun)株(zhu)壹種(zhong)常用(yong)於(yu)質粒克(ke)隆(long)的菌(jun)株(zhu)。其(qi)φ80lacZΔM15基因的(de)產(chan)物可(ke)與pUC載體(ti)編(bian)碼的b-半(ban)乳糖(tang)苷(gan)酶(mei)氨基端實(shi)現a互補(bu),可(ke)用(yong)於(yu)藍白斑篩選。recA1和(he)endA1 的突變(bian)有(you)利於(yu)克隆(long)DNA 的穩定和(he)高純度(du)質粒(li)DNA的提取。
AGL1 電(dian)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞50ul*50以下(xia)是的訂購(gou)信(xin)息(xi)儲存條件:-70℃凍存
操作(zuo)方(fang)法(fa):
1. 取-80℃保(bao)存(cun)的農(nong)桿菌(jun)感(gan)受(shou)態(tai)於(yu)室溫(wen)或手(shou)心片(pian)刻(ke)待(dai)其(qi)部分(fen)融化(hua),處(chu)於(yu)冰水(shui)混(hun)合(he)狀(zhuang)態(tai)時(shi)插入冰中。
2.每100 μl感(gan)受(shou)態(tai)加(jia)入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效(xiao)率較高,*次(ci)使用(yong)前(qian)做(zuo)預(yu)實(shi)驗確定所加(jia)質粒(li)的量(liang)),用(yong)手(shou)管底混勻,依(yi)次(ci)於(yu)冰上靜置(zhi)5分(fen)鐘、液(ye)氮(dan)5分(fen)鐘、37℃水(shui)浴5分(fen)鐘、冰浴5分(fen)鐘。
3. 加(jia)入(ru)700 μl無抗(kang)生(sheng)素的(de)LB或YEB液體(ti)培養(yang)基,於(yu)28℃振蕩培(pei)養(yang)2~3小(xiao)時(shi)。
AGL1 電(dian)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞50ul*504. 6000 rpm離心(xin)壹分(fen)鐘收(shou)菌(jun),留取100 μl左(zuo)右(you)上清(qing)輕輕(qing)吹打(da)重(zhong)懸(xuan)菌(jun)塊塗(tu)布於(yu)含(han)相應抗(kang)生(sheng)素的(de)LB或YEB平板上,倒(dao)置(zhi)放(fang)於(yu)28℃培養箱(xiang)培(pei)養(yang)2-3天
註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
1. 加入(ru)質(zhi)粒(li)時(shi)體(ti)積不(bu)應大(da)於(yu)感(gan)受(shou)態(tai)體(ti)積的(de)1/10;質粒(li)不純或存在乙(yi)醇(chun)等有機物汙染,轉化效(xiao)率急(ji)劇(ju)下(xia)降(jiang);質(zhi)粒增大(da)壹倍,轉化效(xiao)率下(xia)降(jiang)壹(yi)個數量(liang)級(ji)。
2. 混入質粒(li)時(shi)應輕柔(rou)操作(zuo)。轉化高濃(nong)度(du)的質(zhi)粒可(ke)相應減(jian)少(shao)終用(yong)於(yu)塗板的菌(jun)量(liang)。
AGL1 電(dian)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞50ul*503. 平板上陽(yang)性克(ke)隆(long)密度(du)過大(da)時(shi),由於(yu)營養不(bu)足(zu),陽性克(ke)隆(long)生長變(bian)慢(man),菌(jun)落(luo)變(bian)小(xiao),為(wei)了獲(huo)得大(da)的菌(jun)落(luo),應減(jian)少(shao)質(zhi)粒用(yong)量(liang)。
4. 濃度(du)不應高於(yu)25 μg/ml,過高的(de)濃(nong)度(du)不利(li)於(yu)農(nong)桿菌(jun)生(sheng)長,會降(jiang)低(di)其(qi)生(sheng)長速度(du)和(he)轉化效(xiao)率。本(ben)公(gong)司感(gan)受(shou)態(tai)計算(suan)轉化效(xiao)率時(shi)所用(yong)平(ping)板只含(han)有50 μg/ml kan,若(ruo)所用(yong)平(ping)板含(han)有20 μg/ml rif則轉化效(xiao)率降(jiang)低(di)到1/2。
5. 培(pei)養基中加入(ru)的目的(de)是防(fang)止雜(za)菌(jun)生(sheng)長、篩(shai)選農(nong)桿菌(jun);根(gen)據(ju)所用(yong)菌(jun)株(zhu)抗(kang)性加(jia)入Ti質(zhi)粒(li)篩(shai)選抗(kang)生(sheng)素可(ke)防(fang)止Ti質(zhi)粒(li)丟(diu)失,但(dan)Ti質粒篩選抗(kang)生(sheng)素不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿菌(jun)的(de)轉基因操作(zuo),所(suo)以壹般培養(yang)農(nong)桿菌(jun)時(shi)不考慮(lv)這些(xie)抗(kang)生(sheng)素,Ti質(zhi)粒(li)丟(diu)失的(de)概率極(ji)低(di)(可(ke)以忽略(lve))。
有專門(men)的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)淋(lin)巴(ba)細(xi)胞功能相關(guan)抗(kang)原3(LFA-3/CD58)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家 小鼠(shu)淋(lin)巴(ba)細(xi)胞功能相關(guan)抗(kang)原3(LFA-3/CD58)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價(jia)
小(xiao)鼠糖(tang)化(hua)血紅(hong)蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英文(wen)名稱; Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公(gong)司ELISA試劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang),靈(ling)敏性高、特異(yi)性強、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到廣大(da)客戶(hu)的(de)認可(ke),您可(ke)放(fang)心(xin),且我(wo)司有專(zhuan)門(men)的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)糖(tang)化血紅(hong)蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家 小鼠(shu)糖(tang)化(hua)血紅(hong)蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試(shi)劑(ji)盒報價(jia)
小鼠(shu)胰(yi)島(dao)素受(shou)體(ti)β(ISR-β)ELISA試劑(ji)盒 :英(ying)文名稱; Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT 購(gou)買(mai)我(wo)公(gong)司ELISA試劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang),靈(ling)敏性高、特異(yi)性強、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到廣大(da)客戶(hu)的(de)認可(ke),您可(ke)放(fang)心(xin),且我(wo)司有專(zhuan)門(men)的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)胰(yi)島素受(shou)體(ti)β(ISR-β)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家 小鼠(shu)胰(yi)島(dao)素受(shou)體(ti)β(ISR-β)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價
小鼠促(cu)腎(shen)上皮(pi)質激(ji)素釋放(fang)激(ji)素(CRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公(gong)司ELISA試劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang),靈(ling)敏性高、特異(yi)性強、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到廣大(da)客戶(hu)的(de)認可(ke),您可(ke)放(fang)心(xin),且我(wo)司有專(zhuan)門(men)的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)促(cu)腎(shen)上皮(pi)質激(ji)素釋放(fang)激(ji)素(CRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家 小鼠(shu)促(cu)腎(shen)上皮(pi)質激(ji)素釋放(fang)激(ji)素(CRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價
小(xiao)鼠(shu)促(cu)甲狀腺素釋放(fang)激(ji)素(TRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA KIT 購(gou)買(mai)我(wo)公(gong)司ELISA試劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang),靈(ling)敏性高、特異(yi)性強、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到廣大(da)客戶(hu)的(de)認可(ke),您可(ke)放(fang)心(xin),且我(wo)司有專(zhuan)門(men)的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)促(cu)甲狀腺素釋放(fang)激(ji)素(TRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家 小鼠(shu)促(cu)甲狀腺素釋放(fang)激(ji)素(TRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價
小(xiao)鼠(shu)抑制素B(INH-B)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; inhibin B,INH-B ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公(gong)司ELISA試劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang),靈(ling)敏性高、特異(yi)性強、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到廣大(da)客戶(hu)的(de)認可(ke),您可(ke)放(fang)心(xin),且我(wo)司有專(zhuan)門(men)的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)抑制素B(INH-B)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家 小鼠(shu)抑制素B(INH-B)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價
AGL1 電(dian)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞50ul*50 小鼠(shu)釋放(fang)激(ji)素(GnRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公(gong)司ELISA試劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang),靈(ling)敏性高、特異(yi)性強、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到廣大(da)客戶(hu)的(de)認可(ke),您可(ke)放(fang)心(xin),且我(wo)司有專(zhuan)門(men)的售(shou)後部門(men)對您進(jin)行(xing)全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 小(xiao)鼠(shu)釋放(fang)激(ji)素(GnRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家 小鼠(shu)釋放(fang)激(ji)素(GnRH)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價
小(xiao)鼠(shu)血栓前體(ti)蛋白(TpP)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英文(wen)名稱;