EHA105 感(gan)受態細胞100ul*50

EHA105 感受態細胞100ul*50以(yi)下是(shi)的(de)訂(ding)購(gou)信息儲(chu)存(cun)條件：-70℃凍存
操作(zuo)方法:
1. 取-80℃保存的(de)農(nong)桿菌感受(shou)態於(yu)室(shi)溫(wen)或手(shou)心(xin)片(pian)刻待(dai)其(qi)部分(fen)融(rong)化，處於冰水(shui)混(hun)合狀態時(shi)插(cha)入(ru)冰中(zhong)。
2.每(mei)100 μl感(gan)受態加(jia)入(ru)0.01-1 μg質粒(li)DNA（轉化效率(lv)較(jiao)高(gao)，*次(ci)使用前(qian)做預(yu)實(shi)驗(yan)確定(ding)所加質粒(li)的(de)量(liang)），用手(shou)管(guan)底(di)混(hun)勻(yun)，依次(ci)於(yu)冰上(shang)靜置5分(fen)鐘、液(ye)氮(dan)5分(fen)鐘、37℃水浴(yu)5分(fen)鐘、冰浴(yu)5分(fen)鐘。
3. 加入(ru)700 μl無(wu)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)，於28℃振(zhen)蕩培(pei)養(yang)2~3小時。
EHA105 感(gan)受(shou)態細胞100ul*504. 6000 rpm離(li)心壹分(fen)鐘收(shou)菌，留取100 μl左右上(shang)清輕輕吹(chui)打(da)重懸(xuan)菌塊(kuai)塗布(bu)於(yu)含相(xiang)應(ying)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB平(ping)板上(shang)，倒(dao)置放於28℃培(pei)養(yang)箱(xiang)培(pei)養(yang)2-3天
註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
1. 加(jia)入(ru)質粒(li)時體(ti)積(ji)不(bu)應(ying)大於(yu)感(gan)受態體(ti)積(ji)的(de)1/10；質粒(li)不純(chun)或存(cun)在乙醇(chun)等(deng)有(you)機物汙染(ran)，轉化效率(lv)急(ji)劇(ju)下(xia)降；質粒(li)增大壹倍，轉化效率(lv)下(xia)降壹個數量級。
2. 混(hun)入(ru)質粒(li)時應(ying)輕柔(rou)操作(zuo)。轉(zhuan)化高濃(nong)度的(de)質粒(li)可相(xiang)應(ying)減少終(zhong)用於塗板的(de)菌(jun)量。
EHA105 感受態細胞100ul*503. 平(ping)板上(shang)陽性克(ke)隆(long)密度過大時(shi)，由(you)於營(ying)養(yang)不(bu)足，陽性克(ke)隆(long)生長(chang)變(bian)慢，菌落變(bian)小，為(wei)了(le)獲得(de)大的(de)菌(jun)落，應(ying)減少質粒(li)用量(liang)。
4. 濃(nong)度不應(ying)高於25 μg/ml，過(guo)高(gao)的(de)濃(nong)度不利於農桿菌(jun)生長(chang)，會降低其生長(chang)速度和轉(zhuan)化效率(lv)。本(ben)公(gong)司感(gan)受態計(ji)算(suan)轉(zhuan)化效率(lv)時(shi)所(suo)用(yong)平(ping)板只含有(you)50 μg/ml kan，若所(suo)用平(ping)板含有(you)20 μg/ml rif則轉(zhuan)化效率(lv)降低到(dao)1/2。
5. 培(pei)養(yang)基(ji)中加入(ru)的(de)目(mu)的(de)是(shi)防(fang)止(zhi)雜(za)菌(jun)生(sheng)長(chang)、篩選(xuan)農(nong)桿(gan)菌(jun)；根(gen)據所用(yong)菌株(zhu)抗(kang)性加入(ru)Ti質粒(li)篩選(xuan)抗(kang)生(sheng)素(su)可(ke)防(fang)止(zhi)Ti質粒(li)丟失，但(dan)Ti質粒(li)篩選(xuan)抗(kang)生(sheng)素(su)不(bu)利於農桿菌(jun)的(de)轉(zhuan)基因(yin)操(cao)作(zuo)，所(suo)以(yi)壹般培(pei)養(yang)農(nong)桿菌時不(bu)考慮這些抗(kang)生(sheng)素(su)，Ti質粒(li)丟失的(de)概(gai)率極(ji)低(可以(yi)忽略(lve))。

Crosslaps,Cr ELISA Kit 購(gou)買我公(gong)司ELISA試劑(ji)盒(he)保證(zheng)質量，靈(ling)敏性高、特(te)異性強、重(zhong)復性好等(deng)優點已經(jing)得到(dao)廣大客(ke)戶(hu)的(de)認可，您可放心，且(qie)我(wo)司有(you)專門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進(jin)行(xing)全(quan)線(xian)跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 小鼠骨膠原(yuan)交(jiao)聯(Cr)ELISA試劑(ji)盒(he)廠家(jia) 小鼠骨膠原(yuan)交(jiao)聯(Cr)ELISA試劑(ji)盒(he)報價 

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