DAMI人巨(ju)核細胞(bao)白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產品僅(jin)供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不得(de)用於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶(ping)中的培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培養

液終止消化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱中培養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶(ping)中的培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加入培養液終

止消化，輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適量的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍存管(guan)中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移入-80℃過(guo)夜，24h 後轉(zhuan)入液氮中進(jin)行(xing)長期保(bao)存(cun)。使用程序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可直接放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養操(cao)作

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培養凍(dong)存處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考，具體(ti)操(cao)作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產品說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養基後(hou)吹勻。然(ran)後將所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入含(han)適量培養基的(de)培養瓶(ping)中培養過(guo)夜（或將細胞(bao)懸(xuan)液加入10 cm皿中，加入約(yue)8 mL培養基，培養過(guo)夜）。第二天換(huan)液並檢(jian)查細胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去培養上(shang)清(qing)，用不含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中，使消(xiao)化液浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於37℃培養箱中消化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而(er)定），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養基終止消化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝入無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上(shang)清(qing)液，補加1-2 mL培養液後吹勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養基的(de)新(xin)皿中或者(zhe)瓶(ping)中，置於(yu)培養箱中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時，可進(jin)行(xing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養液，裝入無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加入無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支(zhi)凍存管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註意(yi)凍存(cun)管(guan)做好標識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入液氮灌儲(chu)存(cun)。記錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出售的產品：

胃癌組(zu)織(zhi)源(yuan)性(xing)原代(dai)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)/1ml 大(da)鼠載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白(bai)A1(APOA1)ELISA試(shi)劑盒(he) (BAX)Rat Bcl-2 associated X protein,Bax  大(da)鼠Bcl-2相(xiang)關X蛋(dan)白(bai) 96T

LOX： 蛋(dan)白(bai)賴(lai)酸-6-氧化酶(mei)抗(kang)體(ti) 小鼠(shu)淋(lin)巴瘤細(xi)胞(bao);EL4

FC33(人胚胎腎細胞(bao)(Asp-2基因(yin)修(xiu)飾(shi))) 5×106cells/瓶(ping)×2 小鼠(shu)巨(ju)噬細(xi)胞(bao)MMa 大(da)鼠載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白(bai)A(apo-A)ELISA 試(shi)劑盒(he) TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha)  兔(tu)子(zi)壞死(si)因子(zi)α 96T

LTK： 白(bai)細胞(bao)酪(lao)酸激酶(mei)受(shou)體(ti)抗體(ti) CM-M017小鼠(shu)胰(yi)腺(xian)導管(guan)上(shang)皮細胞(bao)培養基100mL

IGFBP1 Protein Cynomolgus 重(zhong)組(zu)食(shi)蟹猴(hou) IGFBP1 蛋(dan)白(bai) (His 標簽(qian)) 大(da)鼠孕(yun)烷(wan)X受(shou)體(ti)(PXR)ELISA試(shi)劑盒(he) Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA  小鼠(shu)抗(kang)單鏈(lian)DNA抗(kang)體(ti) MAP2K6 Others Human 人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 (207 Ser/Asp, 211 Thr/Asp) 桿(gan)狀病毒-昆蟲細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

Phospho-HER4 (Tyr1188)： 0酸化HER4抗(kang)體(ti) HA Others H5N1 甲型流(liu)感(gan) H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

小鼠(shu)T淋(lin)巴細胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao);Cyc-Tag(S49) 人抗結核桿(gan)菌(jun)(TB-Ab)ELISA試(shi)劑盒(he) AR Alpha1( Alpha1-adrenergic receptor) α1能(neng)受(shou)體(ti)抗原 0.5mg

HSD17B3： 羥類(lei)固(gu)醇(chun)脫(tuo)氫(qing)酶17β3抗(kang)體(ti) 人腎皮質近曲小管(guan)上(shang)皮細胞(bao);HK-2

Hacat(人永生化角(jiao)質(zhi)形(xing)成(cheng)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0352HFF-1(人成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 白(bai)牦牛(niu)皮膚細(xi)胞(bao);Yak-2 人抗角(jiao)蛋(dan)白(bai)絲聚(ju)集(ji)素/絲集(ji)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)(AFA)ELISA 試(shi)劑盒(he) Apelin36 脂(zhi)肪(fang)炎癥因(yin)子(zi)Apelin36 1mg

HSD11B1： 羥基類(lei)固(gu)醇(chun)脫(tuo)氫(qing)酶11β1抗(kang)體(ti) 人心(xin)肌細胞(bao)RNAHCM miRNA5 μg

DAMI人巨(ju)核細胞(bao)白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao)PCDH11Y： 原鈣粘附蛋(dan)白(bai)11Y抗體(ti) 兔源(yuan)細胞(bao)

大(da)鼠脊柱神經(jing)細(xi)胞(bao)(RSCMN)(1×106) UM-UC-3, 人膀胱(guang)移行(xing)細胞(bao)癌(ai) Human 大(da)鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白(bai)酶10(MMP-10)ELISA試(shi)劑盒(he) TRACP-5b(Mouse tartrate-resistant acid phosphatase 5b) 小鼠(shu)抗(kang)酸性(xing)0酸酶5b 96T

PCDH12： 原鈣粘附蛋(dan)白(bai)12/血管(guan)內皮鈣粘蛋(dan)白(bai)2抗體(ti) 人絨毛間(jian)葉(ye)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)裂解(jie)物(wu)HVMFL

TNFSF8 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白(bai) (Fc 標簽(qian)) 大(da)鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白(bai)酶10(MMP10)ELISA試(shi)劑盒(he) OxLDL  大(da)鼠氧化低密(mi)度脂(zhi)蛋白(bai) 96T

PCDH17： 原鈣粘附蛋(dan)白(bai)17抗體(ti) SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿(gan)狀病毒-昆蟲細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

三(san)、培養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養液是否有漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及時和我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培養基、血清(qing)比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等，確(que)保細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由於培養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客戶自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫度 變化及(ji)劇烈(lie)碰亡破(po)碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接混勻收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培養瓶(ping)或(huo)培養皿中，置於(yu)培養箱中進(jin)行(xing)培養。

5. 請客戶用相同(tong)條(tiao)件(jian)的培養基用於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的(de)原因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會出現(xian)不穩(wen)定的(de)情(qing)況，請及時和我(wo)們聯系，告知(zhi)細胞(bao) 的(de)具體(ti)情(qing)況，以(yi)便我(wo)們的(de)技術(shu)人員跟蹤回訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供(gong)科研(yan)使用。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用的培養基 (灌液培養基) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請換用按照(zhao)說明(ming)書細胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制的培養基來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。