更(geng)新(xin)時(shi)間(jian):2025-11-29
BL21 感(gan)受(shou)態細胞(bao)100ul*50菌株壹種常用於(yu)質粒克隆的(de)菌株。其(qi)φ80lacZΔM15基因(yin)的(de)產(chan)物可與pUC載體編(bian)碼(ma)的(de)b-半乳(ru)糖苷酶氨基端(duan)實(shi)現(xian)a互(hu)補(bu),可用於(yu)藍白斑篩選。recA1和endA1 的(de)突變(bian)有(you)利於(yu)克隆DNA 的(de)穩定(ding)和高純度(du)質粒DNA的(de)提取(qu)。
BL21 感(gan)受(shou)態細胞(bao)100ul*50以下(xia)是(shi)的(de)訂購(gou)信(xin)息(xi)儲(chu)存(cun)條件:-70℃凍(dong)存(cun)
操作(zuo)方法:
1. 取(qu)-80℃保存(cun)的(de)農桿(gan)菌感(gan)受(shou)態於(yu)室(shi)溫(wen)或(huo)手(shou)心(xin)片刻(ke)待其(qi)部分融(rong)化(hua),處(chu)於(yu)冰(bing)水(shui)混(hun)合狀態時(shi)插(cha)入冰(bing)中。
2.每(mei)100 μl感(gan)受(shou)態加入0.01-1 μg質粒DNA(轉(zhuan)化(hua)效率(lv)較高,*次(ci)使(shi)用前(qian)做預(yu)實驗(yan)確定(ding)所(suo)加質粒的(de)量),用(yong)手管(guan)底混勻(yun),依次(ci)於(yu)冰(bing)上(shang)靜(jing)置5分(fen)鐘(zhong)、液(ye)氮(dan)5分鐘(zhong)、37℃水(shui)浴(yu)5分(fen)鐘、冰浴(yu)5分(fen)鐘。
BL21 感(gan)受(shou)態細胞(bao)100ul*503. 加入(ru)700 μl無抗(kang)生素的(de)LB或(huo)YEB液(ye)體培(pei)養(yang)基,於(yu)28℃振(zhen)蕩培(pei)養(yang)2~3小時(shi)。
4. 6000 rpm離心(xin)壹分鐘(zhong)收菌,留取100 μl左(zuo)右上清(qing)輕(qing)輕(qing)吹打重(zhong)懸菌塊(kuai)塗(tu)布(bu)於(yu)含(han)相(xiang)應抗(kang)生素的(de)LB或(huo)YEB平板(ban)上(shang),倒置放(fang)於(yu)28℃培(pei)養(yang)箱培(pei)養(yang)2-3天(tian)
註意(yi)事項
1. 加(jia)入質粒時(shi)體積(ji)不(bu)應(ying)大於(yu)感(gan)受(shou)態體積(ji)的(de)1/10;質粒不(bu)純(chun)或(huo)存(cun)在乙醇(chun)等有(you)機物汙染(ran),轉(zhuan)化(hua)效率(lv)急(ji)劇下(xia)降(jiang);質粒增(zeng)大(da)壹倍,轉(zhuan)化(hua)效率(lv)下(xia)降(jiang)壹個(ge)數(shu)量(liang)級(ji)。
BL21 感(gan)受(shou)態細胞(bao)100ul*502. 混入(ru)質粒時(shi)應(ying)輕(qing)柔操作(zuo)。轉(zhuan)化(hua)高濃度(du)的(de)質粒可相(xiang)應減(jian)少(shao)終(zhong)用於(yu)塗(tu)板(ban)的(de)菌量(liang)。
3. 平板(ban)上(shang)陽(yang)性克隆密(mi)度(du)過大時(shi),由於(yu)營(ying)養(yang)不(bu)足(zu),陽(yang)性克隆生長變慢(man),菌落變小(xiao),為(wei)了獲(huo)得(de)大(da)的(de)菌落,應減(jian)少質粒用(yong)量(liang)。
4. 濃度(du)不(bu)應(ying)高於(yu)25 μg/ml,過(guo)高的(de)濃度(du)不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿(gan)菌生長,會降低(di)其(qi)生長速度(du)和轉(zhuan)化(hua)效率(lv)。本公司感(gan)受(shou)態計(ji)算(suan)轉(zhuan)化(hua)效率(lv)時(shi)所(suo)用平板(ban)只含(han)有(you)50 μg/ml kan,若所(suo)用平板(ban)含(han)有(you)20 μg/ml rif則轉(zhuan)化(hua)效率(lv)降低(di)到(dao)1/2。
5. 培(pei)養(yang)基中加入的(de)目的(de)是(shi)防止(zhi)雜(za)菌生長、篩選農(nong)桿(gan)菌;根(gen)據(ju)所(suo)用菌株抗(kang)性加(jia)入Ti質粒篩(shai)選抗(kang)生素可防止(zhi)Ti質粒丟(diu)失,但(dan)Ti質粒篩(shai)選抗(kang)生素不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿(gan)菌的(de)轉(zhuan)基因(yin)操作(zuo),所以(yi)壹般培(pei)養(yang)農桿(gan)菌時(shi)不(bu)考(kao)慮(lv)這(zhe)些抗(kang)生素,Ti質粒丟(diu)失的(de)概(gai)率(lv)極(ji)低(di)(可以忽(hu)略(lve))。
大鼠抗(kang)Ⅲ抗(kang)體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 :英文(wen)名稱(cheng); Rat Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量,靈敏(min)性高、特異性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可,您可放(fang)心(xin),且我(wo)司有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠(shu)抗(kang)Ⅲ抗(kang)體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒廠家 大鼠(shu)抗(kang)Ⅲ抗(kang)體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒報價(jia)
大(da)鼠上皮(pi)中性粒細(xi)胞(bao)活化(hua)肽(tai)78(ENA-78/CXCL5)ELISA試(shi)劑盒 :英文(wen)名稱(cheng); Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量,靈敏(min)性高、特異性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可,您可放(fang)心(xin),且我(wo)司有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠(shu)上(shang)皮中性粒細(xi)胞(bao)活化(hua)肽(tai)78(ENA-78/CXCL5)ELISA試(shi)劑盒廠家 大鼠(shu)上皮(pi)中性粒細(xi)胞(bao)活化(hua)肽(tai)78(ENA-78/CXCL5)ELISA試(shi)劑盒報價(jia)
大(da)鼠主(zhu)要(yao)組(zu)織相(xiang)容性復合體Ⅰ類(lei)(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試(shi)劑盒 :英文(wen)名稱(cheng); Rat major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量,靈敏(min)性高、特異性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可,您可放(fang)心(xin),且我(wo)司有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠(shu)主(zhu)要(yao)組(zu)織相(xiang)容性復合體Ⅰ類(lei)(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試(shi)劑盒廠家 大鼠(shu)主(zhu)要(yao)組(zu)織相(xiang)容性復合體Ⅰ類(lei)(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試(shi)劑盒報價(jia)
大(da)鼠結蛋(dan)白(Des)ELISA試劑盒 :英文(wen)名稱(cheng); Rat Desmin,Des ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量,靈敏(min)性高、特異性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可,您可放(fang)心(xin),且我(wo)司有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠(shu)結(jie)蛋白(bai)(Des)ELISA試(shi)劑盒廠家 大鼠(shu)結蛋(dan)白(bai)(Des)ELISA試(shi)劑盒報價(jia)
大(da)鼠肌球蛋(dan)白(bai)(Myosin)ELISA試劑盒 :英文(wen)名稱(cheng); Rat Myosin ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量,靈敏(min)性高、特異性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可,您可放(fang)心(xin),且我(wo)司有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠(shu)肌球蛋(dan)白(bai)(Myosin)ELISA試劑盒廠家 大鼠(shu)肌球蛋(dan)白(bai)(Myosin)ELISA試劑盒報價(jia)
大(da)鼠橫(heng)紋(wen)肌輔肌動(dong)蛋(dan)白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒 :英文(wen)名稱(cheng); Rat skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量,靈敏(min)性高、特異性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可,您可放(fang)心(xin),且我(wo)司有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠(shu)橫(heng)紋(wen)肌輔肌動(dong)蛋(dan)白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒廠家 大鼠(shu)橫(heng)紋(wen)肌輔肌動(dong)蛋(dan)白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒報價(jia)
大(da)鼠血纖蛋(dan)白原(yuan)(Fbg)ELISA試劑盒 :英文(wen)名稱(cheng); Rat Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量,靈敏(min)性高、特異性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可,您可放(fang)心(xin),且我(wo)司有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠(shu)血(xue)纖蛋(dan)白原(yuan)(Fbg)ELISA試劑盒廠家 大鼠(shu)血纖蛋(dan)白原(yuan)(Fbg)ELISA試劑盒報價(jia)
BL21 感(gan)受(shou)態細胞(bao)100ul*50 大鼠(shu)(SS)ELISA試劑盒 :英文(wen)名稱(cheng); Rat Somatostatin,SS ELISA Kit 購(gou)買(mai)我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量,靈敏(min)性高、特異性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao)等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可,您可放(fang)心(xin),且我(wo)司有(you)專(zhuan)門的(de)售(shou)後(hou)部門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠(shu)(SS)ELISA試(shi)劑盒廠家 大鼠(shu)(SS)ELISA試劑盒報價(jia)
大(da)鼠β內啡肽(tai)(β-EP)ELISA試(shi)劑盒 :英文(wen)名稱(cheng);