EPI300 感受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*50

EPI300 感受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*50以下(xia)是的(de)訂購(gou)信息(xi)儲存條件(jian)：-70℃凍(dong)存
操(cao)作(zuo)方法:
1. 取(qu)-80℃保存(cun)的(de)農(nong)桿菌感受(shou)態於(yu)室溫或(huo)手(shou)心片(pian)刻待(dai)其(qi)部(bu)分(fen)融(rong)化，處(chu)於冰水(shui)混(hun)合狀態時(shi)插(cha)入(ru)冰中(zhong)。
2.每100 μl感受(shou)態加(jia)入(ru)0.01-1 μg質粒(li)DNA（轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率較(jiao)高，*次(ci)使(shi)用前(qian)做(zuo)預(yu)實(shi)驗確定所(suo)加(jia)質(zhi)粒(li)的(de)量），用手(shou)管(guan)底混(hun)勻，依次於(yu)冰上(shang)靜置(zhi)5分鐘(zhong)、液氮(dan)5分(fen)鐘(zhong)、37℃水(shui)浴(yu)5分鐘(zhong)、冰浴(yu)5分(fen)鐘(zhong)。
EPI300 感受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*503. 加(jia)入(ru)700 μl無抗(kang)生素(su)的(de)LB或YEB液體(ti)培養基，於28℃振(zhen)蕩培養(yang)2~3小時(shi)。
4. 6000 rpm離(li)心壹分鐘(zhong)收菌，留取(qu)100 μl左(zuo)右上清輕(qing)輕(qing)吹打重(zhong)懸菌塊(kuai)塗(tu)布(bu)於含(han)相應(ying)抗生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB平板(ban)上(shang)，倒置(zhi)放於28℃培(pei)養(yang)箱(xiang)培養(yang)2-3天
註(zhu)意事項(xiang)
1. 加(jia)入(ru)質粒(li)時(shi)體(ti)積(ji)不(bu)應(ying)大於感受(shou)態體(ti)積(ji)的(de)1/10；質粒(li)不(bu)純(chun)或存(cun)在(zai)乙醇(chun)等有(you)機物(wu)汙染(ran)，轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率急劇(ju)下降；質粒(li)增大壹倍，轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率下降壹個數量級。
EPI300 感受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*502. 混(hun)入(ru)質粒(li)時(shi)應(ying)輕柔(rou)操(cao)作(zuo)。轉(zhuan)化(hua)高(gao)濃度(du)的(de)質粒(li)可(ke)相(xiang)應(ying)減少(shao)終用於(yu)塗(tu)板(ban)的(de)菌量。
3. 平板(ban)上(shang)陽性(xing)克隆密度(du)過大時(shi)，由(you)於營(ying)養不(bu)足(zu)，陽性(xing)克隆生長(chang)變慢(man)，菌落變(bian)小(xiao)，為了獲得大的(de)菌落，應(ying)減少(shao)質(zhi)粒(li)用量(liang)。
4. 濃(nong)度(du)不(bu)應(ying)高於(yu)25 μg/ml，過(guo)高的(de)濃度(du)不(bu)利於(yu)農(nong)桿菌生長(chang)，會(hui)降低(di)其(qi)生長(chang)速(su)度(du)和(he)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率。本(ben)公司(si)感受(shou)態計(ji)算轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率時(shi)所(suo)用平板(ban)只含(han)有(you)50 μg/ml kan，若所(suo)用平板(ban)含(han)有(you)20 μg/ml rif則轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率降低(di)到(dao)1/2。
5. 培養(yang)基中(zhong)加(jia)入(ru)的(de)目的(de)是防止雜(za)菌生長(chang)、篩選農(nong)桿菌；根(gen)據所(suo)用菌株(zhu)抗性加(jia)入(ru)Ti質粒(li)篩選抗生(sheng)素(su)可(ke)防(fang)止(zhi)Ti質粒(li)丟失(shi)，但(dan)Ti質(zhi)粒(li)篩選抗生(sheng)素(su)不(bu)利於(yu)農(nong)桿菌的(de)轉(zhuan)基(ji)因(yin)操作(zuo)，所(suo)以壹般培養農(nong)桿菌時(shi)不(bu)考慮這些(xie)抗生素，Ti質(zhi)粒(li)丟失(shi)的(de)概(gai)率極(ji)低(di)(可(ke)以忽(hu)略(lve))。

敏感蛋(dan)白(bai)1(TSP-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大鼠血(xue)小(xiao)板反應(ying)蛋白(bai)/敏(min)感蛋(dan)白(bai)1(TSP-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價 

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 大鼠氧(yang)化(hua)低(di)密(mi)度(du)脂蛋白抗體(ti)(OLAb)ELISA試劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng); Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司(si)ELISA試劑(ji)盒保證(zheng)質(zhi)量，靈敏性(xing)高、特(te)異性強(qiang)、重復性好(hao)等優(you)點已經得到廣大客戶(hu)的(de)認可(ke)，您(nin)可(ke)放(fang)心，且我(wo)司有(you)專門的(de)售(shou)後(hou)部門對您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠氧(yang)化(hua)低(di)密(mi)度(du)脂蛋白抗體(ti)(OLAb)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠氧(yang)化(hua)低(di)密(mi)度(du)脂蛋白抗體(ti)(OLAb)ELISA試劑盒報(bao)價 

EPI300 感受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*50 大鼠抗(kang)單核細(xi)胞(bao)抗體(ti)(AMA)ELISA試劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng); Rat anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司(si)ELISA試劑(ji)盒保證(zheng)質(zhi)量，靈敏性(xing)高、特(te)異性強(qiang)、重復性好(hao)等優(you)點已經得到廣大客戶(hu)的(de)認可(ke)，您(nin)可(ke)放(fang)心，且我(wo)司有(you)專門的(de)售(shou)後(hou)部門對您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟蹤。 :規格(ge); 96T/48T 大鼠抗(kang)單核細(xi)胞(bao)抗體(ti)(AMA)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大鼠抗(kang)單核細(xi)胞(bao)抗體(ti)(AMA)ELISA試劑盒報(bao)價 

試(shi)劑盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng);