BIU-87人(ren)膀(pang)胱(guang)癌細胞(bao)

公司產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳代(dai)，最後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養液(ye)終

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中(zhong)進(jin)行長期保(bao)存(cun)。使用程序

降溫(wen)盒(he)可直接(jie)放入(ru)-80℃。

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操作

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明(ming)書(shu)為主。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養基(ji)的培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜）。第二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去培(pei)養上清，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中，使(shi)消化液浸潤(run)所有(you)細胞(bao)，將培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養箱(xiang)中消化1-2 min（視細胞(bao)情況而定），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)消化情況，若細胞(bao)大(da)部分變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的含8 mL培(pei)養基(ji)的新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去上清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數。

b、根據細胞(bao)數量加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置(zhi)以便下(xia)次拿取(qu)。

公司正(zheng)在出(chu)售的(de)產品(pin)：

心室(shi)肌(ji)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml) 大(da)鼠載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白C3(APOC3)ELISA試劑(ji)盒(he) Guinea ovalbumin specific IgG,OVA sIgG  豚鼠卵(luan)清蛋(dan)白特(te)異性IgG 96T

Liprin alpha 1： 酪酸0酸酶(mei)受體(ti)相(xiang)互(hu)作用蛋(dan)白Liprin α1抗(kang)體 小鼠胚(pei)胎成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao);3T6-Swiss albino

G1(發(fa)綠色熒(ying)光(guang)的(de)小鼠胚(pei)胎幹(gan)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠小膠(jiao)質細胞(bao)RM 大(da)鼠載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白C2(APOC2)ELISA試劑(ji)盒(he) ACV-RAb(Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb ) 大(da)鼠活化素A受體(ti)抗(kang)體 CM-M041小鼠肝星形(xing)細胞(bao)培(pei)養基(ji)100mL

IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組(zu)食蟹(xie)猴 IGFBP3 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽) 大(da)鼠載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白C1(APOC1)ELISA試劑(ji)盒(he) Guinea interleukin 4,IL-4  豚鼠白(bai)介素4 96T

LC3C： 微管(guan)相關(guan)蛋(dan)白輕(qing)鏈(lian)3C抗(kang)體 XCL1 Others Cynomolgus 食(shi)蟹(xie)猴 XCL1 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照)

HIST1H2AH： 組蛋(dan)白H2A/S抗(kang)體 HA Others H5N1 甲(jia)型流感(gan) H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照)

小鼠樹(shu)突狀(zhuang)細胞(bao)肉(rou)瘤(liu)細胞(bao);DCS 人(ren)抗(kang)流行性出(chu)血熱(re)(EHFAb)ELISA試劑(ji)盒(he) Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3) 整(zheng)合(he)素-β3(抗(kang)原) 0.5mg

HRH2： 組胺受體(ti)H2抗(kang)體 人(ren)正(zheng)常(chang)肝細胞(bao);L-02

H4(人(ren)腦(nao)神經膠(jiao)質瘤(liu)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0328CEM/C1(人(ren)急(ji)性淋(lin)巴(ba)細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 小耳(er)豬(zhu)肺(fei)細胞(bao);SEP-L1 人(ren)抗(kang)0脂酰(xian)絲(si)酸抗(kang)體(APSA)ELISA 試劑(ji)盒(he) AQP9(aquaporin Protein-9) 水(shui)通道蛋(dan)白-9抗(kang)原 (多(duo)肽(tai)抗(kang)原) 0.5mg

phospho-HRH1(Ser398)： 0酸化組(zu)胺受體(ti)H1抗(kang)體 人(ren)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)RNAHMF miRNA5 μg

BIU-87人(ren)膀(pang)胱(guang)癌細胞(bao)PI3 Kinase p110 beta： 0脂酰(xian)肌醇激(ji)酶(mei)(PI3Kβ)抗(kang)體 RAC1 Others Human 人(ren) RAC1 / MIG5 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照)

HEL(懸浮(fu)) 紅(hong)白(bai)細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao) 大(da)鼠基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)8(MMP8)ELISA試劑(ji)盒(he) ANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody)  人(ren)抗(kang)神經(jing)元(yuan)核(he)抗(kang)體 A549細胞(bao)，人(ren)肺(fei)腺(xian)癌細胞(bao) 人(ren)低分化肺(fei)腺癌細胞(bao),SK-LU-1細胞(bao) 冠(guan)狀(zhuang)動(dong)脈平(ping)滑肌(ji)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml)

ST6GAL1 Others Mouse 小鼠 ST6GAL1 / CD75 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照) 大(da)鼠基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)7(MMP7)ELISA試劑(ji)盒(he) anti-DNase B(Human anti-deoxyribonuclease B)  人(ren)抗(kang)DNA酶(mei)B抗(kang)體 CL-0208SH-SY5Y(人(ren)神(shen)經(jing)母(mu)細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

HEC-1-A人(ren)子(zi)宮內(nei)膜(mo)腺癌細胞(bao) HEC-1-A human endomeial adenocarcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS 大(da)鼠基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)7(MMP-7)ELISA試劑(ji)盒(he) ET-1(Mouse Endothelin 1) 小鼠內(nei)皮(pi)素1 96T

phospho-PP2A alpha+beta(Tyr307)： 0酸化蛋(dan)酸酶(mei)2A(PP2Aα)抗(kang)體 PLAT Others Human 人(ren) tPAβ 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照)

三(san)、培(pei)養註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若有(you)上述現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信息，如細胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培(pei)養基(ji)、血清比(bi)例(li)、所需 細胞(bao)因(yin)子等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若由於培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而(er)導(dao)致細胞(bao)出(chu)現(xian)問題(ti)，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸(shu)問題(ti)，部分細胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰亡破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精消毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可以消化，懸浮(fu)細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養基(ji)重懸 細胞(bao)，並接(jie)種到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿中，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養基(ji)用於細胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收(shou)到細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍幾張(zhang)細胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝通 交流。由於運(yun)輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情況，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系，告(gao)知細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況，以便我(wo)們(men)的(de)技(ji)術人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回訪直至問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備註：運(yun)輸用的培(pei)養基(ji) (灌液培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來培(pei)養細胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培(pei)養基(ji)來培(pei)養細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。