F56人(ren)腺癌細胞系(xi)

公司產品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀(guan)察，待細胞回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培(pei)養

液終止消化(hua)，再輕輕吹(chui)打(da)細胞使之脫落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養基重懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例進(jin)行(xing)分瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中培(pei)養；

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀(guan)察，待細胞回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入培(pei)養液終

止消化(hua)，輕輕吹(chui)打(da)細胞使之脫落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並放置於凍存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入-80℃過(guo)夜，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中進(jin)行(xing)長(chang)期保存(cun)。使(shi)用程序(xu)

降(jiang)溫盒可(ke)直接放入-80℃。

壹、商(shang)品介紹(shao)：

二、細胞培(pei)養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞：以下細胞培(pei)養凍存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基混合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹(chui)勻。然(ran)後將所(suo)有細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適量(liang)培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶中培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過(guo)夜）。第(di)二(er)天換(huan)液並檢查(zha)細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上清，用不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞，將培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱中消化(hua)1-2 min（視細胞情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細胞消化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞大部(bu)分變(bian)圓並脫落(luo)，迅速拿(na)回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養基終止消化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分到(dao)新的(de)含(han)8 mL培(pei)養基的(de)新皿中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細胞凍存(cun)：待細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培(pei)養液，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數。

b、根(gen)據細胞數量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清細胞凍存(cun)液(ye)，使細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支凍存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意凍存(cun)管(guan)做好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入液(ye)氮(dan)灌儲存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位(wei)置以便(bian)下次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出售(shou)的(de)產品(pin)：

大(da)鼠關(guan)節(jie)軟(ruan)骨細胞培(pei)養基 100mL 大鼠血(xue)小(xiao)板(ban)膜糖蛋白(bai)IIb(GPIIb)ELISA試(shi)劑盒(he) Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV  羅(luo)氏沼(zhao)蝦諾達(da)病毒(du) 96T

Myelin Protein Zero： 外周髓(sui)0脂(zhi)P0蛋白(bai)/P0蛋白(bai)抗體(ti) kasumi-1, 人(ren)白(bai)血(xue)病(bing)細胞株 橫(heng)紋肌(ji)癌細胞,A673細胞 穩(wen)定(ding)表達EBNA1的(de)人胚腎細胞;293E

FCGRT & B2M Others Rat 大(da)鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠血(xue)小(xiao)板(ban)膜糖蛋白(bai)Ib(GPIb)ELISA試(shi)劑盒(he) OMgp-Ab  小(xiao)鼠少突膠(jiao)質(zhi)細胞髓(sui)鞘糖蛋白(bai)抗體(ti) Asp2人(ren)胚(pei)胎腎細胞轉化(hua)細胞;FC33

GES-1人(ren)胃上皮(pi)細胞 Human gasic epithelial cell GES-1 1640+10% FBS 大鼠血(xue)小(xiao)板(ban)膜糖蛋白(bai)ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試(shi)劑盒(he) (Ntn1) 大(da)鼠軸(zhou)突生(sheng)長(chang)誘(you)向因子(zi)1 96T

Myogenin： 肌(ji)細胞生(sheng)成(cheng)素抗體(ti) OSTM1 Others Human 人(ren) OSTM1 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

HEATR7A： HEAT重復(fu)內含(han)蛋白(bai)7A蛋白(bai)抗體(ti) 小(xiao)型豬(zhu)腎細胞;MPK 畸(ji)胎癌細胞，P19細胞 W256細胞，Walker氏癌肉瘤(liu)256瘤(liu)株(zhu)

PDIA4 Others Human 人(ren) ERP72 / PDIA4 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 人基膜聚糖(lumican)ELISA 試(shi)劑盒(he) CD34 CD34抗原(細胞表面(mian)的(de)唾液粘蛋白(bai)) 0.5mg

HPV16 E7： 人(ren)瘤(liu)病(bing)毒(du)16型E7抗體(ti) CL-0242Vero(非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎細胞)5×106cells/瓶×2

HME6細胞，人黑(hei)色(se)素(su)瘤(liu)細胞 動物雙(shuang)歧(qi)桿(gan)菌 EB病毒(du)轉化(hua)的(de)人B淋巴(ba)細胞;KMY0919 人肌(ji)抑素(su)(MSTN)ELISA試(shi)劑盒(he) CD38(mouse, rat) CD38多肽(小(xiao)鼠、大鼠) 0.5mg

HER2： HER2抗體(ti) HA Others H5N3 甲型流(liu)感(gan) H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血(xue)凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

F56人(ren)腺(xian)癌細胞系(xi)ERBB2 Others Mouse 小(xiao)鼠 ErbB2 / HER2 / CD340 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠骨保(bao)護(hu)素(su)配(pei)體(ti)(OPGL)ELISA試(shi)劑盒(he) IGFBP-4  大(da)鼠結(jie)合(he)蛋白(bai)4 96T

PSMA7： 蛋白(bai)酶(mei)體(ti)PSMα7抗體(ti) CM-R125大(da)鼠牙(ya)細胞培(pei)養基100mL

HCC1937人(ren)癌細胞 Human breast cancer cell line HCC1937 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠骨保(bao)護(hu)素(su)配(pei)體(ti)(OPGL)ELISA 試(shi)劑盒(he) anti-HAV(Human anti-hepatitis A virus IgM antibody)  人(ren)抗甲型肝炎(yan)病(bing)毒(du)IgM抗體(ti) PDCD1 Others Human 人(ren) PD1 / PDCD1 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

tTA基因修(xiu)飾(shi)的(de)小鼠胰腺(xian)癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 大(da)鼠骨保(bao)護(hu)素(su)(OPG)ELISA試(shi)劑盒(he) IGFBP-3  大(da)鼠結(jie)合(he)蛋白(bai)3 96T

PARP16： 多腺苷(gan)二(er)0酸多聚酶(mei)16抗體(ti) 豬(zhu)靜脈(mai)血(xue)管(guan)內皮(pi)細胞;ZYM-SVEC01

三、培(pei)養註意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞瓶是否完(wan)好，培(pei)養液是否有漏液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請(qing)及時和我們聯系(xi)。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解(jie)細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形態(tai)、所(suo)用培(pei)養基、血(xue)清比例、所(suo)需(xu) 細胞因子(zi)等(deng)，確(que)保細胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致細胞出現問題，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞瓶表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸(shu)問題，部(bu)分細胞由於(yu)溫(wen)度(du) 變化(hua)及劇烈(lie)碰亡破碎(sui)形成(cheng)碎片(pian)，是正(zheng)常現象(xiang)。觀(guan)察好細胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁細胞可(ke)以消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直接混勻(yun)收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養基重懸(xuan) 細胞，並接種到(dao)新的(de)培(pei)養瓶或培(pei)養皿中，置於培(pei)養箱中進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養基用於(yu)細胞培(pei)養。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後前(qian) 3 天(tian)各拍幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片，記錄細胞狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和(he)我司技術部(bu)溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸(shu)的(de)原因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請(qing)及時和我們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具體(ti)情(qing)況，以便(bian)我們的(de)技術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直至問題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的(de)培(pei)養基 (灌液(ye)培(pei)養基) 不能(neng)再用來(lai)培(pei)養細胞，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說明書細胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養基來培(pei)養細胞。     收到(dao)細胞後第壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。