G422小(xiao)鼠腦(nao)神(shen)經膠質(zhi)母細(xi)胞(bao)

公司產品僅供科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不得用於臨(lin)床診斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫落，然(ran)後將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按 1:2 比例進行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養(yang)液終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫落，然(ran)後將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放置於凍(dong)存(cun)管中；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮中(zhong)進(jin)行長(chang)期保存(cun)。使用程(cheng)序

降溫盒可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

壹、商(shang)品介紹：

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下(xia)細胞培養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅供參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品說明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹(chui)勻。然(ran)後將所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含適(shi)量培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換(huan)液並(bing)檢查細胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行傳(chuan)代培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用不含鈣、鎂(mei)離子的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞(bao)，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細胞大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅速(su)拿(na)回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻後裝入(ru)無(wu)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液按1:2比例分到新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可進(jin)行細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心管中，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮灌儲(chu)存。記錄凍(dong)存(cun)管位置以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。

公(gong)司正在(zai)出售(shou)的(de)產品：

LA795(小(xiao)鼠肺(fei)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 V79-4(中(zhong)國(guo)倉鼠肺(fei)細(xi)胞) 大(da)鼠血(xue)纖(xian)蛋(dan)白原(yuan)(Fbg)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Bombyx mori Livetin,LT  家(jia)蠶卵黃蛋(dan)白 96T

MAP7D1： 精酸/脯酸富(fu)含卷曲蛋(dan)白1抗(kang)體(ti) CM-H013人(ren)小(xiao)氣(qi)道(dao)平滑肌(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)100mL

IFNA1 Protein Rat 重組大(da)鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋(dan)白 (His 標簽(qian)) 大(da)鼠血(xue)栓(shuan)調(tiao)節(jie)蛋(dan)白(TM)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody)  兔(tu)抗(kang)腦(nao)組織(zhi)抗(kang)體(ti) STK24 Others Human 人(ren) STK24 / MST3 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)

大(da)鼠成年表(biao)皮角(jiao)質(zhi)形(xing)成層細胞培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠血(xue)栓(shuan)調(tiao)節(jie)蛋(dan)白(TM)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Nasoniavitripennis vitellogenin,Vtg  蝶蛹(yong)金小(xiao)蜂(feng)卵(luan)黃蛋(dan)白原(yuan) 96T

MKLP1： 有絲(si)分裂(lie)驅(qu)動(dong)蛋(dan)白樣1抗(kang)體(ti) MOLT-4細(xi)胞(bao)，急性(xing)淋(lin)巴母細(xi)胞(bao)白血病(bing)細胞(bao) 髓(sui)性(xing)甲狀(zhuang)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞,TT細胞 EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化(hua)的(de)人B淋巴(ba)細(xi)胞(bao)(傣族);KM9403

phospho-Histone H1.4 (Ser27)： 0酸化(hua)組蛋(dan)白H1,4樣蛋(dan)白抗(kang)體(ti) 人(ren)晶(jing)體(ti)上(shang)皮細(xi)胞永生系;SRA01/04(HLE)

IBRS-2(豬腎細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 Caki-1, 人(ren)腎(shen)透明(ming)細胞(bao)癌(ai)皮(pi)膚(fu)轉(zhuan)移(yi)細胞 人(ren)骨肉(rou)瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] 人活(huo)化(hua)Ⅻ(FⅫa)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) CD46/MCP(membrane cofactor protein)rat, mouse 膜(mo)輔(fu)蛋(dan)白/內源性(xing)輔(fu)助(zhu)因(yin)子活(huo)性(xing)蛋(dan)白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HER2 receptor： HER2受體抗(kang)體(ti) 人(ren)真(zhen)皮成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)-cDNAHDF-a cDNA

WERI-Rb-1(人視網(wang)膜(mo)神(shen)經膠質(zhi)瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)活(huo)化(hua)蛋(dan)白C抵(di)抗(kang)素(su)(APCR)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) CD5 CD5 多(duo)肽(tai)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HCN4： 環化(hua)核(he)苷酸調(tiao)控陽(yang)離子通(tong)道(dao)蛋(dan)白亞型(xing)4 0.1ml

G422小(xiao)鼠腦(nao)神(shen)經膠質(zhi)母細(xi)胞(bao)DDR1 Others Mouse 小(xiao)鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) 大(da)鼠還(hai)原(yuan)酶(mei)(GR)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) AAV(Human adeno-associated virus)  人(ren)腺(xian)相(xiang)關(guan)病(bing)毒(du) 96T

PCDHGA4： 原(yuan)鈣粘(zhan)蛋(dan)白γA4抗(kang)體(ti) CM-R101大(da)鼠腦(nao)動(dong)脈血管(guan)平滑肌(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)100mL

HBL-100人整(zheng)合(he)SV40基(ji)因(yin)的(de)上(shang)皮細(xi)胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)(GSH-PX)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) G-CSF  大(da)鼠粒(li)細(xi)胞集(ji)落刺(ci)激因(yin)子 96T

PCDHGA2： 原(yuan)鈣粘(zhan)蛋(dan)白γA2抗(kang)體(ti) OPCML Others Human 人(ren) OPCML 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)

雜(za)交瘤(liu)(B類(lei));Z1510A2G6A2F8 大(da)鼠過(guo)氧化(hua)酶(mei)1(GPX1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) HBXIP(Human hepatitis B virus X interacting protein)  人(ren)乙(yi)型(xing)肝(gan)炎病(bing)毒(du)X蛋(dan)白相互(hu)作用蛋(dan)白 96T

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培養(yang)液是(shi)否有漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象，若有上(shang)述(shu)現象 發(fa)生請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞說明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細(xi)胞形(xing)態(tai)、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞因(yin)子等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出(chu)現問(wen)題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸(shu)問(wen)題，部分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破碎形(xing)成碎片，是正常(chang)現象。觀察好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同(tong)條件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用於細(xi)胞培養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後前 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張細胞(bao)照片，記錄細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏感細胞(bao)會(hui)出現不穩定(ding)的(de)情(qing)況，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪直至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養(yang)基(ji) (灌液培養(yang)基(ji)) 不能再用來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照說明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後次傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。