GI-1細(xi)胞

公司(si)產品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養瓶中的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分瓶傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養箱(xiang)中培養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養瓶中的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並放置(zhi)於凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞凍(dong)存管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保存。使(shi)用(yong)程序

降溫(wen)盒(he)可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養操(cao)作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培(pei)養凍(dong)存處理僅(jin)供參(can)考(kao)，具體操作步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說明(ming)書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養(yang)基(ji)混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離(li)心3 min，棄去上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適量培養基(ji)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第(di)二天換液(ye)並檢查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄去培養(yang)上清(qing)，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養箱中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況而定(ding)），然後在顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞大(da)部(bu)分變圓並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回操作臺，輕(qing)敲幾下培(pei)養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養液後吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分到新的含(han)8 mL培(pei)養基(ji)的新皿中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細胞生長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時(shi)，可進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存。下面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集細胞及(ji)細胞培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心4 min，棄去上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞數(shu)量加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞凍(dong)存液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸(xuan)液，註意凍(dong)存管(guan)做好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下次(ci)拿取。

公司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的產(chan)品(pin)：

組織(zhi)半(ban)-6（CASPASE-6）活性(xing)熒光(guang)定(ding)量檢測試劑盒(he)

CY5蛋白(bai)標記(ji)試劑盒(he)

體液人體腺病毒(du)（adenovirus）定(ding)性(xing)檢(jian)測試劑盒(he)

載(zai)玻片(pian)細(xi)胞DAP KINASE蛋白(bai)表(biao)達(da)熒光(guang)顯(xian)微鏡(jing)檢(jian)測試劑盒(he)

動物(wu)源性(xing)飼(si)料(liao)樣品(pin)處理試劑盒(he)

標記(ji)二抗DAB顯色(se)試劑盒(he)

鈣調(tiao)蛋白(bai)結(jie)合(he)檢(jian)測試劑盒(he)篩選(xuan)

10151

石蠟切片結(jie)締組(zu)織（CONNECTIVE TISSUE）改良(liang)格莫瑞(rui)

前(qian)列H2（PGH2）高(gao)效液相色(se)譜(pu)法(fa)定(ding)量檢測試劑盒(he)

3,4-二氫(qing)酮衍(yan)Monastrol（K-ATPase 抑(yi)制(zhi)劑）

人體組織(zhi)N-乙酰(xian)轉(zhuan)移(yi)酶(mei)1（NAT1）活性(xing)熒光(guang)定(ding)量檢測試劑盒(he)

載(zai)玻片(pian)細(xi)胞βAMYLOID蛋白(bai)表(biao)達(da)NBT顯色(se)光學(xue)顯(xian)微鏡(jing)檢(jian)測試劑盒(he)

體液基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)（MMP-13）活性(xing)比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測試劑盒(he)

甲基(ji)纖維素細胞克(ke)隆試劑盒(he)

粘(zhan)蛋白(bai)7抗體

甘油(you)二酯酰(xian)基(ji)轉(zhuan)移(yi)酶(mei)2抗體

去整(zheng)合(he)素樣金(jin)屬(shu)23抗體

Kelch樣蛋白(bai)2抗體

細胞角(jiao)蛋白(bai)1抗體

α-(1,3)-巖藻(zao)糖基(ji)轉(zhuan)移(yi)酶(mei) 4

喹啉(lin)酸磷酸(suan)核(he)糖基(ji)轉(zhuan)移(yi)酶(mei)抗(kang)體

GI-1細(xi)胞ATP合(he)酶(mei)亞基(ji)O抗(kang)體

鋅(xin)指蛋白(bai)Aiolos抗(kang)體

三(san)、培養註意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞後(hou)首先觀察(cha)細胞瓶(ping)是否完(wan)好(hao)，培(pei)養液是否有(you)漏(lou)液、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象 發生請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞相關信息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因子等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞培(pei)養條件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由於培(pei)養條件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞出(chu)現(xian)問題，責(ze)任(ren)由 客戶自行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡(jing)下觀察(cha)細胞狀(zhuang)態。因運(yun)輸問題，部(bu)分細胞由於溫(wen)度 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破(po)碎(sui)形成碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接(jie)混勻(yun)收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細胞，並接(jie)種(zhong)到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶用(yong)相同(tong)條件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張細胞照(zhao)片，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸的原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感細(xi)胞會出現(xian)不穩(wen)定(ding)的情(qing)況，請及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系，告知(zhi)細胞 的具體情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤回訪直至問題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用(yong)的培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培養(yang)基(ji)) 不能再(zai)用(yong)來培養(yang)細胞，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞培(pei) 養條件(jian)新配制(zhi)的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收(shou)到細(xi)胞後(hou)第(di)壹次(ci)傳代建議 1：2 傳代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。