Sp2/0小(xiao)鼠(shu)骨(gu)髓瘤(liu)細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品僅(jin)供(gong)科(ke)研研究使用、不得用於(yu)臨床診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮變圓後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基重(zhong)懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養箱中培(pei)養；

壹(yi)、商品介紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮變圓後(hou)加入(ru)培(pei)養液終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於(yu)凍(dong)存管中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進行(xing)長(chang)期保(bao)存。使用程(cheng)序

降溫(wen)盒可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養操作

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培(pei)養凍(dong)存處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參考(kao)，具(ju)體操作步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養基混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含適(shi)量(liang)培(pei)養基的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過夜（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜）。第(di)二天換(huan)液並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度達 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上清(qing)，用(yong)不含鈣(gai)、鎂離子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液浸潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱中消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而(er)定(ding)），然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養基終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養基的新(xin)皿(min)中或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數量(liang)加入(ru)無血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存液，使細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好標識。將凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管位(wei)置(zhi)以便(bian)下次拿取(qu)。

公司(si)正在(zai)出售的產(chan)品：

IL21 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) Ierleukin-21 / IL-21 蛋(dan)白(bai) 大(da)鼠(shu)內(nei)皮素(su)轉換酶2(ECE2)ELISA試劑盒(he) AQP-5(Mouse Aquaporin 5)  小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道(dao)蛋(dan)白(bai)5 96T

NUP88： 核孔復合(he)體蛋白(bai)88抗體 PRKD3 Others Human 人 PKC nu / PRKD3 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao))

膠(jiao)原(yuan)酶(含(han)100mL酶解(jie)緩(huan)沖(chong)液) 10mL 大(da)鼠(shu)內(nei)皮素(su)轉換酶1(ECE1)ELISA試劑盒(he) NPC(Human nasopharyngeal carcinoma)  人鼻咽(yan)癌(ai) 96T

NOL8： 核仁(ren)蛋(dan)白(bai)8抗體 RSC96細(xi)胞(bao)，大(da)鼠(shu)雪旺(wang)細(xi)胞(bao) 人肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(bao),9204細(xi)胞(bao) CL-0136L6(大(da)鼠(shu)成肌(ji)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠(shu)內(nei)皮素(su)轉化(hua)酶1(ECE1)ELISA試劑盒(he) AQP-4(Mouse Aquaporin 4)  小(xiao)鼠(shu)水通(tong)道(dao)蛋(dan)白(bai)4 96T

人神(shen)經(jing)少突(tu)起(qi)前質膠(jiao)質細(xi)胞(bao)培(pei)養基 100mL 綿(mian)羊(yang)補(bu)體片段(duan)3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒(he) CEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌(ai)胚(pei)抗原(yuan)抗原(yuan) 0.5mg

KLHL11： Kelch樣蛋(dan)白(bai)11抗體 RLFs, 大(da)鼠(shu)肺(fei)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao) R1000細(xi)胞(bao) WISH(羊(yang)膜細(xi)胞(bao))

VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 綿(mian)羊(yang)表(biao)皮生(sheng)長(chang)因子(EGF)ELISA 試劑盒(he) CD105 CD105/轉化(hua)生(sheng)長(chang)因子β受體抗原(yuan) 0.5mg

KLHL3： Kelch樣蛋(dan)白(bai)3抗體 人前(qian)列腺癌(ai)細(xi)胞(bao);PC-3 [PC3]

JB6-C30細(xi)胞(bao)，小(xiao)鼠(shu)皮膚(fu)細(xi)胞(bao) J82(膀(pang)胱癌(ai)細(xi)胞(bao)) 犬腎細(xi)胞(bao);MDCK/IgR 綿(mian)羊(yang)白介素(su)6(IL-6)ELISA 試劑盒(he) Caspase-6 (NT) 半(ban)胱胺酸(suan)蛋(dan)白(bai)酶蛋(dan)白-6(抗原(yuan)) 0.5mg

Sp2/0小(xiao)鼠(shu)骨(gu)髓瘤(liu)細(xi)胞(bao)HSCT6 大(da)鼠(shu)肝(gan)星狀(zhuang)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)N端(duan)前腦(nao)素(su)(-proBNP)ELISA 試劑盒(he) FSP(Human Fibroblast surface protein)  人纖(xian)維(wei)母細(xi)胞(bao)表(biao)面抗原(yuan) 96T

SH3PX1： 分選連(lian)接(jie)蛋(dan)白(bai)9抗體 CoC1/DDP細(xi)胞(bao)，CoC1細(xi)胞(bao)耐藥(yao)亞株(zhu) 分泌A2抗體B淋巴細(xi)胞(bao),BB7.2細(xi)胞(bao) 615小(xiao)鼠(shu)T細(xi)胞(bao)性白(bai)血(xue)病瘤(liu)株(zhu);L7712

FAM3D Others Human 人 FAM3D 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠(shu)NOD樣受(shou)體-1(NOD-1)ELISA試劑盒(he) SLPI(Human secretory leukocyte protease inhibitor)  人分泌性白細(xi)胞(bao)蛋白(bai)酶抑(yi)制因子(zi) 96T

SNX10： 分選連(lian)接(jie)蛋(dan)白(bai)10抗體 犬腎細(xi)胞(bao);MDCK(NBL-2)

CM-R003大(da)鼠(shu)Ⅱ型肺(fei)泡(pao)上皮細(xi)胞(bao)培(pei)養基100mL 大(da)鼠(shu)N-myc下遊(you)調節(jie)基因(yin)2(NDRG2)ELISA試劑盒(he) POMC(Human pro-opiomelanocortin)  人阿(e)黑(hei)皮素(su)原(yuan) 96T

三、培(pei)養註意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否完好，培(pei)養液是否有漏液、渾(hun)濁等(deng)現象，若(ruo)有(you)上述(shu)現(xian)象 發(fa)生請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞(bao)相關(guan)信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培(pei)養基、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養條(tiao)件壹(yi)致，若由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件不壹(yi)致而導致細(xi)胞(bao)出現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客戶自行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於(yu)溫(wen)度 變化(hua)及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎形(xing)成(cheng)碎片，是正常現象。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可以消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶(ping)或培(pei)養皿中，置於(yu)培(pei)養箱中進行(xing)培(pei)養。

5. 請客戶用相同(tong)條(tiao)件的培(pei)養基用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建議客戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技術部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會出(chu)現不穩定(ding)的情(qing)況，請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的具(ju)體情況，以(yi)便(bian)我們的技(ji)術人員跟蹤回訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用的培(pei)養基 (灌液培(pei)養基) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)，請換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件新(xin)配制的培(pei)養基來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。