SV40-MES-13小(xiao)鼠(shu)腎小(xiao)球系膜細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產品僅(jin)供科(ke)研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得用於(yu)臨(lin)床診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後將懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培養；

壹、商品介紹：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入(ru)培養(yang)液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後將懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放置於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先將細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期保存(cun)。使(shi)用(yong)程序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考，具體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含有1 mL細(xi)胞(bao)懸液的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水浴中迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心3 min，棄(qi)去上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹勻。然(ran)後將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含適(shi)量培(pei)養基的(de)培養瓶(ping)中培(pei)養過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液並檢查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如果細(xi)胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

a、棄去培養(yang)上(shang)清，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液浸潤(run)所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而定），然後在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅速(su)拿(na)回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕輕打勻後裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液後吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態良好(hao)時，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心4 min，棄(qi)去上清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在出(chu)售的(de)產品：

人齒(chi)根膜韌(ren)帶成纖維細(xi)胞(bao)(HPDLF)( 5×105 ) rEPC，大(da)鼠(shu)內皮(pi)祖(zu)細(xi)胞(bao)-骨(gu)髓(sui) Rattus 大(da)鼠(shu)內皮(pi)素受體A(EA)ELISA試劑盒(he) AQP-3(Mouse Aquaporin 3)  小鼠(shu)水通(tong)道(dao)蛋白3 96T

Natriuretic Peptide Receptor A： 利肽(tai)受(shou)體(ti)A抗體(ti) 小(xiao)鼠(shu)單核(he)巨(ju)噬細(xi)胞(bao)白(bai)血(xue)病細(xi)胞(bao);RAW 264.7 [RAW264.7

IL2 Protein Human 重組(zu)人(ren) Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 大鼠(shu)內皮(pi)素2(EDN2)ELISA試劑盒(he) GP-II  大鼠(shu)糖原0酸化酶(mei)同(tong)工酶(mei)II 96T

NRG3： 神(shen)經調節(jie)蛋白3抗體(ti) CSNK2A1 Others Human 人(ren) CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

彈白(bai)酶(mei)(含10mL酶解(jie)緩(huan)沖液) 1mL 大(da)鼠(shu)內皮(pi)素1(ET-1)ELISA試劑盒(he) P-CK(Human pan-cytokeratin)  人廣譜(pu)細(xi)胞(bao)角(jiao)蛋白 96T

EFNA1 Protein Mouse 重組(zu)小(xiao)鼠(shu) Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標(biao)簽) 綿羊白(bai)介素1β(IL-1β)ELISA 試劑盒(he) CD3 epsilon CD3 epsilon(抗原(yuan)) 0.5mg

KCNA5： 電壓(ya)閥(fa)門(men)通(tong)道(dao)混(hun)合器(qi)相關亞家(jia)族成員(yuan)5抗體(ti) USP46 Others Human 人(ren) USP46 桿狀病毒-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

人神(shen)經星形膠(jiao)質細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 綿羊白(bai)介素1(IL-1)ELISA 試劑盒(he) chloramphenicol/BSA 氯(lv)偶(ou)聯血(xue)清白蛋白 2mg

KLF10： TGF-β誘導早期應答基因(yin)1抗體(ti) rCF, 大(da)鼠(shu)心臟(zang)成纖維細(xi)胞(bao) A4細(xi)胞(bao) HL-7702(肝細(xi)胞(bao))

IL23R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 綿/山羊孕(yun)激素/(PROG)ELISA試劑盒(he) chloramphenicol/OVA 氯(lv)偶(ou)聯雞(ji)卵白蛋白蛋白 2mg

SV40-MES-13小鼠(shu)腎小(xiao)球系膜細(xi)胞(bao)QGY-7701, 人肝癌(ai)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)NADH脫氫(qing)酶(mei)1(ND1)ELISA試劑盒(he) CTX(Human cytotoxin)  人細(xi)胞(bao)毒素(su) 96T

phospho-c-Abl (Ser569)： 0酸化非(fei)受(shou)體(ti)酪(lao)酸激酶c-Abl抗體(ti) VCL Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) VCL / Vinculin 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

HSF 人皮(pi)膚成纖維樣(yang)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)M型肌(ji)酸(suan)激酶(CKM)ELISA試劑盒(he) Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein)  人α突觸核(he)蛋白 96T

SAM68： SRC有絲(si)分(fen)裂(lie)相(xiang)關(guan)蛋白68抗體(ti) KMB-17細(xi)胞(bao)，體(ti)細(xi)胞(bao)系 轉HLA-2基(ji)因(yin)B細(xi)胞(bao),T2細(xi)胞(bao) KM小(xiao)鼠(shu)子(zi)瘤株(zhu);U27

SERPINA6 Others Human 人 SerpinA6 / CBG 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠(shu)Mg2+/Mn2+依(yi)賴(lai)酸酶(mei)1A(PPM1A)ELISA試劑盒(he) CA19-9(Human Carbohydrate antigen19-9)  人糖鏈抗原(yuan)19-9 96T

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培養液是(shi)否有漏液、渾濁等現象，若有上述(shu)現象 發生請及時和我們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說明(ming)書(shu)，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培養基、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等，確(que)保細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由於(yu)培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現問題，責(ze)任由 客戶(hu)自行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸(shu)問題，部分(fen)細(xi)胞(bao)由於(yu)溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈碰亡破(po)碎形成碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現象。觀察好(hao)細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可以消(xiao)化，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並接種到新(xin)的(de)培養瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同條件(jian)的(de)培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態，便於(yu)和我司(si)技術部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現不穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及時和我們聯系，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具體情(qing)況(kuang)，以便我們的(de)技術人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問題解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用的(de)培養基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不能(neng)再(zai)用來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用按(an)照說明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培養基(ji)來培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳代(dai)建議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。