RM-1小(xiao)鼠前(qian)列(lie)腺(xian)癌細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅供科研(yan)研究(jiu)使(shi)用、不(bu)得用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細胞生長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變圓後加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消化，再輕輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按 1:2 比例(li)進行分(fen)瓶傳代，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱中培養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品(pin)介(jie)紹：

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變圓後加入(ru)培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消化，輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先將(jiang)細胞凍存(cun)管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液(ye)氮(dan)中進行長(chang)期(qi)保(bao)存。使(shi)用程序

降(jiang)溫盒可直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇細胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞培養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書為主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹(chui)勻。然(ran)後將所(suo)有細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養過夜（或(huo)將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜）。第二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消(xiao)化液浸潤(run)所(suo)有細(xi)胞，將培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而定(ding)），然(ran)後在顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞消化情況，若(ruo)細胞大部分(fen)變圓並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消化。輕輕打(da)勻後裝入(ru)無(wu)菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存(cun)：待細(xi)胞生長狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可進行細(xi)胞凍存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細胞及(ji)細胞培養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄(qi)盡PBS，進行細(xi)胞計數。

b、根(gen)據(ju)細胞數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞凍存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍存1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意凍存(cun)管(guan)做好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿取。

公(gong)司(si)正在出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

Nectin 4： 脊(ji)髓灰(hui)質(zhi)炎(yan)病(bing)毒(du)受體(ti)相(xiang)關蛋白(bai)4抗(kang)體(ti) NBL1 Others Human 人(ren) DAN 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

CM-H036人(ren)小(xiao)腸(chang)平(ping)滑(hua)肌(ji)細胞培養(yang)基100mL 大(da)鼠牛(niu)血清白蛋白(bai)(BSA)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Beta2-GP1 IgA/G/M  大鼠β2糖(tang)蛋(dan)白1抗(kang)體(ti) 倉(cang)鼠源(yuan)細(xi)胞

人(ren)表(biao)皮(pi)微血管內皮(pi)細胞(HDMEC)( 5×105 ) 人(ren)少(shao)突(tu)膠質(zhi)細(xi)胞 Human 大鼠牛(niu)小(xiao)腸(chang)堿性(xing)0酸酶(mei)(CIAP)ELISA試劑盒 BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2)  人(ren)癌易(yi)感(gan)蛋白(bai)2 96T

NDUFS7： 線(xian)粒(li)體(ti)復合物(wu)NDUFS7蛋(dan)白抗(kang)體(ti) 大(da)鼠腎(shen)上腺(xian)嗜(shi)鉻(ge)細(xi)胞瘤細(xi)胞;PC-12 [PC12]

IL4 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠 IL4 / Ierleukin-4 蛋(dan)白(bai) (Q136D, Y139D, His 標(biao)簽(qian)) 大鼠牛(niu)小(xiao)腸(chang)堿性(xing)0酸酶(mei)(CIAP)ELISA 試劑盒 EMAb  大鼠抗(kang)子(zi)宮(gong)內膜(mo)抗(kang)體(ti) CSNK1A1 Others Human 人(ren) CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

IFNA4 Others Rat 大(da)鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 犬(quan)β內啡肽(tai)(β-EP)ELISA 試劑(ji)盒 P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A) 抑癌基因(yin)p16(抗(kang)原) 0.5mg

IFI27L2： alpha幹(gan)擾素(su)誘導蛋(dan)白27樣(yang)蛋(dan)白2抗(kang)體(ti) 615小(xiao)鼠肺癌瘤(liu)株;HP615

C2C12細(xi)胞，鼠肌(ji)原細(xi)胞 H08910(卵(luan)巢癌細(xi)胞) 大鼠胰(yi)島細胞瘤細(xi)胞;INS-1 犬α幹(gan)擾素(su)(IFN-α)ELISA 試劑盒 p21/WAF1/CIP1 p21 核分(fen)裂抑制(zhi)因(yin)子之(zhi)壹(抗(kang)原) 0.5mg

Insulin： 胰(yi)島素抗(kang)體(ti) CA10 Others Human 人(ren) CA10 / Carbonic anhydrase X 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

人(ren)主動(dong)脈平(ping)滑肌細胞cDNAHASMC cDNA 犬C肽(tai)(C-Peptide)ELISA試劑(ji)盒 p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗(kang)原) 0.5mg

RM-1小(xiao)鼠前(qian)列(lie)腺(xian)癌細(xi)胞Rad17： 細(xi)胞周期(qi)檢(jian)控Rad17蛋白(bai)抗(kang)體(ti) FAS Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

GPL1 豚(tun)鼠肺成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細(xi)胞 大鼠α2-巨(ju)球蛋白(bai)(α2M)ELISA試劑(ji)盒 VS(Human versican/PG-M/PG-350)  人(ren)多(duo)功(gong)能蛋白(bai)聚糖 96T

Phospho-Rad17 (Ser645)： 0酸(suan)化細胞周期(qi)檢(jian)控Rad17蛋白(bai)抗(kang)體(ti) Bowes Melanoma細(xi)胞，黑色素(su)瘤(liu)細胞 人(ren)原髓細胞白血病細胞,AL7P/HL-60R細胞 人(ren)結直腸(chang)腺(xian)癌細(xi)胞;HT-29

MET Others Canine 狗(gou) c-MET / HGFR 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 大(da)鼠α2-HS糖(tang)蛋(dan)白(αHSG)ELISA試(shi)劑盒 NFKB p65 (Human NF-κΒ p65) KLISA Kit 人(ren)細(xi)胞核因(yin)子(zi)/k基因(yin)結合核因(yin)子(zi) 96T

RIP2： 受(shou)體(ti)結合絲酸(suan)蘇酸激(ji)酶2抗(kang)體(ti) 非(fei)洲綠猴(hou)腎(shen)細胞;VERO

三(san)、培(pei)養註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞後首先觀察細(xi)胞瓶是(shi)否(fou)完好，培養液是(shi)否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁等現象(xiang)，若有上(shang)述(shu)現象 發生請及(ji)時(shi)和我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細胞相(xiang)關信息(xi)，如(ru)細(xi)胞形態(tai)、所(suo)用培(pei)養(yang)基、血清比例(li)、所(suo)需 細胞因子(zi)等，確(que)保(bao)細胞培養(yang)條件(jian)壹致，若(ruo)由於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而導致細(xi)胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸(shu)問題(ti)，部分(fen)細胞由於(yu)溫(wen)度 變化及(ji)劇烈(lie)碰亡破碎(sui)形成碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察好細胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞可以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直接混勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中進行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基用於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後前 3 天各拍幾(ji)張細胞照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部溝通(tong) 交(jiao)流。由於(yu)運輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別敏(min)感(gan)細胞會出(chu)現(xian)不穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及(ji)時(shi)和我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知細(xi)胞 的具(ju)體(ti)情況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技(ji)術(shu)人(ren)員跟蹤回訪直至問題(ti)解決。

7. 該細(xi)胞僅供科研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能再用來培(pei)養細(xi)胞，請換(huan)用按照說(shuo)明(ming)書細胞培 養(yang)條件(jian)新配(pei)制(zhi)的培(pei)養(yang)基來培(pei)養細(xi)胞。     收到(dao)細(xi)胞後第壹(yi)次(ci)傳代(dai)建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。