RWPE-2 人(ren)前(qian)列腺(xian)正常細胞

公司產品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床診(zhen)斷！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的培(pei)養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察，待細(xi)胞回縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再輕輕吹打(da)細胞使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比例(li)進行分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培養；

壹、商(shang)品介紹(shao)：

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的培(pei)養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察，待細(xi)胞回縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養液終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕輕吹打(da)細胞使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存(cun)。使用(yong)程(cheng)序(xu)

降溫盒可直(zhi)接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培(pei)養凍(dong)存處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考，具體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將含(han)有1 mL細胞懸(xuan)液的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速搖(yao)晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然後將所有細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培養(yang)基(ji)的培(pei)養瓶中培養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜）。第(di)二天換液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞密度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細(xi)胞密度達 80%-90%，即可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所有細胞，將培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細胞情(qing)況而定(ding)），然後在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀察細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分到(dao)新的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細(xi)胞生(sheng)長狀態良好時(shi)，可進(jin)行細胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細胞培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清(qing)細胞凍(dong)存液，使細(xi)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標識。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以便下(xia)次拿(na)取。

公司正在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

CM-H020人胰島(dao)β細胞培(pei)養基(ji)100mL 大鼠ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 CP/CER(Mouse Ceruloplasmin)  小(xiao)鼠銅藍(lan)蛋白 96T

Neurogenin 2： 神經元素(su)2抗(kang)體 中國倉(cang)鼠卵巢細胞K1(亞(ya)系克(ke)隆(long));CHO-K1

人表(biao)皮(pi)角質(zhi)細胞-新(xin)生(sheng)兒(er)(HEK-n)( 5×105 ) 細胞名(ming)稱 種屬 大鼠ⅩⅢ(F13)ELISA試劑(ji)盒 SAA  大鼠(shu)血(xue)清(qing)澱(dian)粉樣蛋白A 96T

NDRG3： 抑癌(ai)基(ji)因NDRG3抗體 正常大鼠(shu)腎細胞;NRK

IL7 Protein Human 重組(zu)人(ren) IL7 / ierleukin 7 蛋白 大鼠(shu)Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑(ji)盒 CCA(Human Colon Cancer Antigen)  人結(jie)腸(chang)癌(ai)抗原(yuan) 96T

Jak3： 蛋白酪酸激(ji)酶JAK-3抗體 Hela, 人細胞系

EFNA5 Protein Cynomolgus 重組(zu)食(shi)蟹(xie)猴(hou) Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽) 牛(niu)脂多(duo)糖(tang)結(jie)合(he)蛋白(LBP) ELISA試劑(ji)盒 PBEF (CT) 內(nei)脂素(su)/B細(xi)胞克(ke)隆(long)增強(qiang)因子(zi) 0.5mg

Phospho-Jak3 (Tyr785)： 0酸化(hua)蛋白酪酸激(ji)酶JAK-3抗體 EPHB3 Others Human 人 EphB3 / HEK2 (aa 585-998) 桿(gan)狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照)

人軟骨(gu)細(xi)胞培(pei)養基(ji) 100mL 牛脂多(duo)糖(tang)(LPS)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PEDF (pigment epithelium-derived factor) 色素上(shang)皮(pi)源(yuan)性(xing)因子(zi)(多肽(tai)抗原(yuan)) 0.5mg

Phospho-Jak3 (Tyr980 + Tyr981)： 0酸化(hua)蛋白酪酸激(ji)酶JAK-3抗體 CSC, 小(xiao)鼠心(xin)肌(ji)細(xi)胞 人(ren)小(xiao)腸頸部(bu)表皮(pi)樣癌(ai)細胞，Ca Ski細(xi)胞 F81(貓(mao)腎細胞)

RWPE-2 人前(qian)列腺(xian)正常細胞RNF150： 環指(zhi)蛋白150抗體 A-375(人惡性(xing)黑(hei)色素瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2

EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化(hua)的人(ren)B淋巴細(xi)胞;KMY0908 人(ren)破骨(gu)細胞培(pei)養基(ji) 100mL 大鼠α1-抗(kang)(α1AT)ELISA試劑(ji)盒 human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene  人類(lei)似RIKEN cDNA 2010109K09 基(ji)因 96T

RANTES： T細胞特(te)異(yi)性(xing)趨化(hua)因子(zi)抗體 CL-0229T84(人結(jie)腸(chang)腺(xian)癌(ai)肺轉(zhuan)移細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

MDA-MB-231(ATCC來(lai)源(yuan)), 人癌(ai)細胞 大(da)鼠YY肽(tai)(PYY)ELISA試劑(ji)盒 RHOB(Human ras homolog gene family,memmber B)  人ras同(tong)源(yuan)物基(ji)因家族(zu)成員b 96T

RAGE： 晚(wan)期(qi)糖(tang)基(ji)化(hua)終(zhong)末產(chan)物特異(yi)性(xing)受體抗體 PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴(hou) Epcr / PROCR 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照)

三(san)、培(pei)養註意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀察細胞瓶(ping)是否完(wan)好，培(pei)養液是(shi)否有漏液、渾濁(zhuo)等(deng)現象，若有上述(shu)現象 發生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了解細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息，如(ru)細胞形態、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所需 細(xi)胞因(yin)子(zi)等，確保(bao)細(xi)胞培(pei)養條件壹(yi)致，若由(you)於培養(yang)條件不(bu)壹(yi)致而導(dao)致細(xi)胞出(chu)現問題，責任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞瓶(ping)表面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀察細胞狀態。因運輸問題，部(bu)分細(xi)胞由(you)於溫度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是正常現象。觀察好細(xi)胞狀態後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重懸(xuan) 細胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新的培(pei)養瓶或培(pei)養皿中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行培(pei)養(yang)。

5. 請客戶(hu)用(yong)相同(tong)條件的培(pei)養基(ji)用於細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞狀態，便於和我(wo)司技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由於運輸的原(yuan)因，個別(bie)敏感(gan)細(xi)胞會出(chu)現不(bu)穩定(ding)的情(qing)況，請及時和(he)我(wo)們聯系，告知細(xi)胞 的具(ju)體情(qing)況，以便我(wo)們的技術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤回訪直至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供科(ke)研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用的培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換用(yong)按照說(shuo)明(ming)書細胞培(pei) 養條件新(xin)配(pei)制的培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。