NCI-H446人(ren)小(xiao)細胞(bao)肺癌細胞(bao)

公司(si)產(chan)品僅供科研研(yan)究使用(yong)、不得用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之脫落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

壹、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細胞(bao)凍存：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之脫落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍存管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍存管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮中進(jin)行(xing)長期保(bao)存。使用(yong)程序

降溫(wen)盒(he)可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養操作

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以下細胞(bao)培養凍存處理(li)僅供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主。將含有(you)1 mL細胞(bao)懸液(ye)的(de)凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培養基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將所有(you)細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中培養過(guo)夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清(qing)，用(yong)不含(han)鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中，使消化(hua)液(ye)浸潤所有(you)細胞(bao)，將培養瓶(ping)置(zhi)於37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情況而(er)定），然後(hou)在顯微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)消化(hua)情(qing)況，若細胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅速拿回(hui)操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下培養瓶(ping)後加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分到新的(de)含8 mL培養基(ji)的(de)新皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細胞(bao)凍存：待(dai)細胞(bao)生長狀態良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞(bao)凍存。下面 T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培養液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍，棄盡PBS，進行(xing)細胞(bao)計數。

b、根據細胞(bao)數量加入(ru)無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍存液(ye)，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍存管(guan)凍存1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍存管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍存管(guan)放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存管(guan)位置(zhi)以便(bian)下次(ci)拿取。

公(gong)司(si)正在出售的產(chan)品(pin)：

Nogo R： 軸索過(guo)度(du)生長抑制(zhi)因(yin)子(zi)受體(ti)/Nogo受體(ti)抗體(ti) CCL5 Others Human 人(ren) CCL5 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性對照)

CM-M023小(xiao)鼠(shu)淋(lin)巴管內(nei)皮(pi)細胞(bao)培養基(ji)100mL 大(da)鼠(shu)神(shen)經(jing)肽(tai)Y受體(ti)Y2(NPY2R)ELISA試劑盒 ANF(Human atrial natriuretic factor)  人(ren)心納(na)素(su) 96T

NAV3： 神(shen)經(jing)元(yuan)引導(dao)蛋白3抗(kang)體(ti) 大(da)鼠(shu)胚(pei)胎(tai)心肌(ji)細胞(bao);H9c2(2-1)

TT(人(ren)甲(jia)狀腺導管(guan)癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 NCI-H838 [H838](人(ren)肺癌細胞(bao)) 大(da)鼠(shu)神(shen)經(jing)肽(tai)Y受體(ti)Y1(NPY1R)ELISA試劑盒 GSK(Mouse glycogen synthase kinase)  小(xiao)鼠(shu)糖(tang)原(yuan)合(he)成(cheng)酶(mei)激酶(mei) 96T

NCR1： 細胞(bao)毒性(xing)受體(ti)NK-p46抗體(ti) 恒河(he)猴腎(shen)細胞(bao);RM-3

IL-1 Beta： 白介(jie)素(su)1β/IL-1β抗(kang)體(ti) 人(ren)胃(wei)腺癌細胞(bao);BGC-823

SPC-A-1(人(ren)肺癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小鼠 FSTL1 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性對照) 人(ren)EB病(bing)毒IgG(EBv IgG)ELISA 試劑盒 TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein) 激(ji)素(su)受體(ti)相關(guan)蛋白/孤(gu)兒(er)素受體(ti)相關(guan)蛋白(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

IL-2： 白介(jie)素(su)2抗(kang)體(ti) 氣(qi)管上(shang)皮(pi)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(fang)(1ml)

IL8 Protein Human 重(zhong)組人(ren) IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標(biao)簽) 人(ren)EB病(bing)毒IgA(EBv IgA)ELISA 試劑盒 TRADD(TNF receptor 1 associated via death domain) 有(you)死亡(wang)區的壞(huai)死因(yin)子(zi)受體(ti)1相關(guan)蛋白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IL-2(H2E4)： 白細胞(bao)介(jie)素(su)-2單克(ke)隆抗體(ti) TNFRSF6B Others Human 人(ren) DCR3 / TNFRSF6B 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性對照)

NCI-H446人(ren)小(xiao)細胞(bao)肺癌細胞(bao)BRL 大(da)鼠(shu)肝(gan)細胞(bao) 大(da)鼠(shu)白介(jie)素(su)27(IL27)ELISA試劑盒 L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase)  人(ren)L-乳(ru)酸脫氫酶(mei) 96T

RNF211： 環(huan)指(zhi)蛋白211抗(kang)體(ti) CTLL-2細胞(bao)，小鼠(shu)T細胞(bao) 人(ren)前列腺癌細胞(bao),9L-B細胞(bao) 人(ren)絨(rong)毛間(jian)葉(ye)成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)RNAHVMF miRNA5 μg

XPNPEP2 Others Human 人(ren) XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性對照) 大(da)鼠(shu)白介(jie)素(su)27(IL-27)ELISA 試劑盒 ASM(Human acid sphingomyelinase)  人(ren)酸(suan)性神經(jing)鞘(qiao)0脂(zhi)酶(mei) 96T

RENBP： 腎(shen)素(su)結(jie)合(he)蛋白抗(kang)體(ti) 人(ren)成(cheng)骨肉(rou)瘤細胞(bao);MG-63

CL-0126JAR(人(ren)胎(tai)盤絨毛(mao)膜(mo)癌細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)白介(jie)素(su)26(IL-26)ELISA試劑盒 ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase)  人(ren)花(hua)生四(si)烯(xi)酸5脂(zhi)加氧(yang)酶(mei) 96T

三(san)、培養註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是否完好(hao)，培養液(ye)是(shi)否有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生請(qing)及時和(he)我們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞(bao)說明(ming)書(shu)，了(le)解細胞(bao)相關(guan)信息，如(ru)細胞(bao)形態、所用(yong)培養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)狀態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分細胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正常現象。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀態後，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以(yi)消(xiao)化，懸浮細胞(bao)直接(jie)混勻(yun)收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮的培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新的(de)培養瓶(ping)或培養皿中(zhong)，置(zhi)於培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同(tong)條(tiao)件(jian)的培養基(ji)用(yong)於細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞(bao)後前 3 天各拍幾張細胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀態，便於(yu)和(he)我司(si)技(ji)術部溝通(tong) 交(jiao)流。由(you)於運(yun)輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩定的(de)情況，請(qing)及時和(he)我們(men)聯系，告(gao)知細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況，以便(bian)我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪直至問(wen)題解決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供科研使用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培養細胞(bao)，請(qing)換用(yong)按照說明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新配制的培養基(ji)來(lai)培養細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。